陳粉合 鄧 祎 王恩棟 王 琰

有研究報道[1]HPV感染是宮頸癌主要的致病因素，且EGFR作為HPV感染過程中的協(xié)同因子[2]，通過調(diào)節(jié)Sox2基因表達、轉(zhuǎn)錄水平、翻譯水平等蛋白質(zhì)表達的多方面參與宮頸癌的發(fā)病機制[3]。尋找敏感的檢測方便的生化標志物對宮頸癌的診治至關(guān)重要。本研究選取宮頸癌患者96例，通過對比與癌旁組織EGFR蛋白表達水平、Sox2水平差異及與HPV感染陽性率、預(yù)后和臨床病理分期的相關(guān)性，旨在為宮頸癌的診治和預(yù)后評估提供科學(xué)依據(jù)?，F(xiàn)將報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集本院2017年1月至2019年1月宮頸癌患者的宮頸癌組織樣本91例，同時收集癌旁正常組織樣本96例?；颊咂骄挲g(57.46±8.73)歲，Ⅰ期26例、Ⅱ期45例、Ⅲ期20例，高分化26例、中分化42例、低分化23例。納入標準：治療前未進行放、化療，無嚴重免疫性疾病，無肝腎功能損傷，無其他嚴重疾病。

1.2 實驗方法

PCR-DNA反向雜交：取石蠟包埋組織標本按照試劑盒說明書依次進行HPV-DNA提取、PCR擴增、雜交、洗膜和顯色，結(jié)果判讀：陽性質(zhì)控品雜交膜條出現(xiàn)在HPV基因型位點或IC位點呈藍色，其它位點均不顯色；陰性結(jié)果：IC位點顯色外，其它均不顯色。

1.3 治療及隨訪方法

建立隨訪檔案，門診隨訪或電話隨訪。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 宮頸HPV感染率及宮頸癌組織樣本內(nèi)的EGFR、Sox2陽性表達情況

91例宮頸癌組織樣本中有71例檢測出HPV感染，感染率為78.0%。同時對所有患者組織樣本的EGFR、Sox2表達情況進行比較發(fā)現(xiàn)，宮頸癌組織樣本內(nèi)的EGFR、Sox2陽性表達情況明顯高于癌旁正常組織樣本，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同組織樣本EGFR、Sox2陽性表達比較(例，%)

2.2 EGFR、Sox2陽性表達與腫瘤分化程度的關(guān)系

EGFR、Sox2陽性表達與腫瘤分化程度有密切關(guān)系，腫瘤分化越低其EGFR陽性表達率越高(P<0.05)，而Sox2陽性表達率在中分化組最高(P<0.05)，見表2。

2.3 治療后復(fù)發(fā)患者的HPV感染、EGFR、Sox2陽性表達情況

對宮頸癌患者進行手術(shù)隨訪發(fā)現(xiàn)有20例患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)，其中復(fù)發(fā)患者HPV陽性率明顯高于未復(fù)發(fā)患者(P<0.05)，EGFR、Sox2陽性表達率也較未復(fù)發(fā)患者高(P<0.05)，見表3。

表2 不同分化程度腫瘤組織中EGFR、Sox2陽性表達率比較(例，%)

表3 預(yù)后與HPV感染率及EGFR、Sox2陽性表達率的關(guān)系(例，%)

3 討論

宮頸癌致死率在婦科惡性腫瘤中占第4位，且發(fā)病率呈逐年上升趨勢，據(jù)統(tǒng)計，全球每年約52.9萬宮頸癌新發(fā)病例，其中27.5萬死亡病例。我國宮頸癌新發(fā)病例約13萬/年，死亡病例2萬/年[4-6]。尋找宮頸癌診斷的敏感的生化指標，尤其是對中晚期特殊類型的宮頸癌的診斷具有重要的臨床意義，有利于為宮頸癌患者接受放化療后是否存在殘留癌灶、轉(zhuǎn)移灶、復(fù)發(fā)的評估提供科學(xué)依據(jù)。

人類乳頭瘤病毒(HPV)是乳頭瘤空泡病毒A屬，主要有HPV1、2、6、11、16、18、31、33及35型，其中HPV16或18型長期感染可能與女性宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。有文獻報道[7]HPV病毒感染宮頸黏膜組織后，病毒基因可整合到宿主細胞基因組中，引起宿主細胞染色體畸變誘發(fā)腫瘤。此外，HPV-DNA還可以整合原癌基因附近，促進原癌基因激活和抑癌基因的抑制，從而使原癌、抑癌基因水平失衡誘發(fā)腫瘤的發(fā)生和進展。有研究報道[8]宮頸癌的發(fā)生機制中有與促進細胞增殖、生長、分化，抑制細胞凋亡進而影響腫瘤發(fā)生發(fā)展進程的信號傳導(dǎo)途徑絡(luò)氨酸激酶途徑有關(guān)，該過程中的絡(luò)氨酸激酶受體(EFGR)被多項研究報道參與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。有研究報道[9]宮頸癌的EGFR途徑中，EGFR蛋白過表達，但該研究并未報道EGFR與宮頸癌臨床病理分期的關(guān)系。另有研究[10]通過檢測78例宮頸鱗狀細胞癌標本時發(fā)現(xiàn)，所有宮頸癌患者EGFR蛋白陽性表達率為100%，其中72%患者呈強陽性且EGFR陽性表達水平和程度與患者的病理分期有關(guān)。Ⅲ、Ⅳ期患者EGFR蛋白表達水平顯著高于Ⅰ、Ⅱ期，且Ⅳ期EGFR蛋白表達率顯著高于Ⅲ期患者。同時，有研究報道[11]EGFR陽性強度與宮頸癌患者的預(yù)后密切相關(guān)，EGFR蛋白高表達，預(yù)后差。本研究結(jié)果顯示，宮頸癌患者病灶組織與癌旁組織相比，EGFR蛋白表達水平顯著升高且預(yù)后較差，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，與既往研究報道一致。本研究還發(fā)現(xiàn)，EGFR蛋白表達陽性率與HPV感染率具有一致性。提示，宮頸癌患者應(yīng)考慮HPV抗感染治療，且EGFR蛋白表達水平可能與HPV感染陽性率所致的復(fù)發(fā)具有密切關(guān)系，以此可作為宮頸癌病理分期和預(yù)后的評估指標。Sox2是Sox家族中的主要成員，在多種腫瘤細胞組織如肺癌、胰腺癌、乳腺癌、神經(jīng)內(nèi)分泌癌等中廣泛表達。有研究報道[12]Sox表達水平與卵巢癌細胞株的侵襲轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)，高表達Sox2基因的組織中，惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)率較高。說明，Sox2基因參與惡性腫瘤的基因表達過程，影響腫瘤細胞的生長繁殖、侵襲轉(zhuǎn)移等，可將Sox2作為惡性腫瘤細胞病情發(fā)展程度的評估指標。本研究從宮頸癌患者組織中檢測到Sox2基因且發(fā)現(xiàn)其表達水平與HPV感染陽性率、宮頸癌患者預(yù)后等密切相關(guān)。Sox2基因可作為轉(zhuǎn)錄因子同時參與轉(zhuǎn)錄水平、翻譯水平、翻譯后水平等蛋白表達多水平過程，參與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程。

綜上所述，宮頸癌患者HPV感染率較高，同時應(yīng)特別注意EGFR、Sox2陽性表達患者治療后的定期隨訪。本研究創(chuàng)新處，從蛋白質(zhì)表達水平和基因表達水平兩方面確定宮頸癌分化程度和預(yù)后的影響因素，為宮頸癌的臨床診治提供科學(xué)依據(jù)。