梁 濤，劉 鳳，張德太，王 琳，胡麗華

（華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬協(xié)和醫(yī)院檢驗科，湖北 武漢 430022）

隨著生活水平的不斷提高，我國居民的飲食及生活習慣發(fā)生了很大變化，導(dǎo)致心腦血管疾病的發(fā)生率逐年升高。心腦血管疾病一旦突然發(fā)作，往往會造成嚴重的后果。因此，有必要早期篩查出高風險人群，提供預(yù)警信號，加強早期預(yù)防工作。然而，目前尚缺乏針對表觀健康人群的有效的心腦血管疾病發(fā)生風險預(yù)測指標。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（lipoproteinassociated phospholipase A2，Lp-PLA2）是一種具有多種促炎性質(zhì)的酶，廣泛參與動脈粥樣硬化斑塊形成、破裂等過程，可作為冠心病和缺血性腦卒中的獨立危險預(yù)測因子[1-2]。中國老年學學會心腦血管病專業(yè)委員會建議將Lp-PLA2作為預(yù)測心腦血管疾病事件發(fā)生風險的指標[3]。目前，有關(guān)Lp-PLA2在冠心病、動脈粥樣硬化、腦梗死等心腦血管疾病中的應(yīng)用的研究較多，但對于Lp-PLA2在表觀健康人群中的篩查價值少有研究。為此，本研究擬通過檢測血清Lp-PLA2水平，評估武漢地區(qū)表觀健康人群Lp-PLA2水平的分布、陽性檢出率及Lp-PLA2水平升高者與正常者之間相關(guān)資料的差異，為早期預(yù)測表觀健康人群心腦血管疾病發(fā)病風險提供參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2018年4月—2019年4月在華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬協(xié)和醫(yī)院體檢中心的體檢者。體檢內(nèi)容包括一般內(nèi)科檢查、外科檢查、心電圖、血常規(guī)、尿常規(guī)、血壓、胸部X線檢查、心臟B超、頭部電子計算機斷層掃描（computed tomography，CT）、常規(guī)生化項目檢測及免疫項目檢測等。根據(jù)體檢結(jié)果

排除血壓異常、急性感染、慢性感染、惡性腫瘤、近期手術(shù)史、近期用藥史以及有嚴重肝、肺、腎等重要器官功能障礙的體檢者，根據(jù)影像學檢查結(jié)果及相關(guān)調(diào)查結(jié)果排除既往有心肌梗死、冠心病及腦梗死治療史的體檢者。本研究共入組表觀健康者1 503名，其中男1 010名、女493名，年齡17～86歲。收集所有對象的一般資料，包括年齡、性別及總膽紅素（total bilirubin，TB）、直接膽紅素（direct bilirubin，DBil）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶（gamma-glutamyltransferase，GGT）、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、肌酐（creatinine，Cr）、尿酸（uric acid，UA）、胱抑素C（cystatin C，Cys C）、血糖（glucose，Glu）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、載脂蛋白A（apolipoprotein A，apo A）、載脂蛋白B（apolipoprotein B，apo B）、脂蛋白（a）[lipoprotein（a），Lp（a）]等常規(guī)生化指標的檢測結(jié)果。

1.2 方法

采用含惰性分離膠的促凝管采集所有研究對象空腹靜脈血3 mL，1 500×g離心10 min，分離血清，1 h內(nèi)完成檢測，剩余血清-20 ℃冷凍保存。

Lp-PLA2采用NORMAN散射比濁分析儀（南京諾爾曼生物技術(shù)有限公司）及配套試劑（散射免疫增強比濁法）檢測，試劑盒檢測上限為2 000 ng/mL，參考區(qū)間為＜200 ng/mL，以≥200 ng/mL為升高（陽性）標準。血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A，SAA）采用乳膠增強免疫比濁法檢測，試劑盒、質(zhì)控品及校準品均購自廣州微米生物科技有限公司。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）采用酶循環(huán)法檢測，試劑盒、質(zhì)控品及校準品均購自北京九強生物技術(shù)股份有限公司。檢測儀器均為AU5800全自動生化分析儀（美國Beckman Coulter公司）。所有操作均嚴格按儀器和試劑盒說明書要求進行。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計分析。所有計量數(shù)據(jù)經(jīng)正態(tài)性檢驗后均呈偏態(tài)分布，以中位數(shù)（M）[四分位數(shù)（P25～P75）]表示，各組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗。計數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗。Lp-PLA2與其他項目的相關(guān)性評價采用Spearman相關(guān)分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同性別表觀健康者一般資料分析

所有研究對象男、女性之間年齡差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），男性血清Lp-PLA2水平高于女性（P＜0.001）。1 503名表觀健康者血清Lp-PLA2水平為130（100～238）ng/mL，有413名（27.48%）血清Lp-PLA2陽性，其中男性的陽性率為20.96%（315/1 503），女性的陽性率為6.52%（98/1 503）。男性Lp-PLA2陽性率明顯高于女性（P＜0.001）。見表1。

表1 不同性別表觀健康者一般資料分析

2.2 不同年齡表觀健康者血清Lp-PLA2水平及陽性率

在表觀健康者總體人群及男、女性人群中，≥61歲組Lp-PLA2陽性率均高于41～60歲組及≤40歲組，且41～60歲組血清Lp-PLA2水平最高。見表2～表4。

表2 不同年齡表觀健康者血清Lp-PLA2水平及陽性率比較

表3 不同年齡男性表觀健康者血清Lp-PLA2水平及陽性率比較

表4 不同年齡女性表觀健康者血清Lp-PLA2水平及陽性率比較

2.3 Lp-PLA2升高組及Lp-PLA2正常組一般資料及常規(guī)生化指標比較

將1 503名表觀健康者按血清Lp-PLA2水平分為Lp-PLA2升高組（413名）及Lp-PLA2正常組（1 090名）。Lp-PLA2升高組年齡、SAA、ALT、AST、ALP、GGT、BUN、UA、Cr、Cys C、Glu、TG、apo B、Hcy均高于Lp-PLA2正常組（P＜0.05），TB、DBil、HDL-C、apo A均低于Lp-PLA2正常組（P＜0.05），2個組之間TC、LDL-C、Lp（a）差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表5。

2.4 不同程度Lp-PLA2升高者一般資料及常規(guī)生化指標比較

將413名Lp-PLA2升高者按血清Lp-PLA2水平分為輕度升高（200～300 ng/mL）組、中度升高（301～400 ng/mL）組、高度升高（＞400 ng/mL）組。高度升高組LP-PLA2、SAA、GGT、Glu水平顯著高于中度升高組及輕度升高組（P＜0.05），其他指標3個組之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表6。

表5 Lp-PLA2升高組及Lp-PLA2正常組一般資料及常規(guī)生化指標比較

2.5 Lp-PLA2升高組Lp-PLA2與其他指標的相關(guān)性分析

Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，Lp-PLA2與SAA、GGT呈正相關(guān)（r值分別為0.422、0.162，P值分別為＜0.001、0.001），與其他指標[DBil、ALT、AST、ALP、Cr、BUN、UA、Cys C、Glu、TC、TG、HDL-C、LDL-C、apo A、apo B、Lp（a）、Hcy]均無相關(guān)性（r值分別為-0.059、0.03、-0.023、0.114、-0.022、0.034、-0.002、0.016、0.051、-0.070、-0.080、-0.020、-0.053、-0.034、-0.051、0.047、-0.006，P＞0.05）。

表6 不同程度Lp-PLA2升高者一般資料及常規(guī)生化指標比較

3 討論

目前，心腦血管疾病已成為嚴重影響人類健康的一種具有致殘性、致死性危險的疾病。然而，心腦血管疾病在發(fā)生之前往往難以被察覺，因此迫切需要能早期預(yù)警心腦血管疾病發(fā)生風險的生物標志物，以便在表觀健康人群中篩選出有高發(fā)病風險的個體。近年來，有多種生物學標志物被廣泛研究，Lp-PLA2是其中最受關(guān)注的指標之一，尤其是其促進動脈粥樣硬化的作用逐漸被重視[4]。盡管關(guān)于Lp-PLA2與動脈粥樣硬化、心肌梗死、腦梗死等心腦血管疾病的研究已較多，但Lp-PLA2在表觀健康人群中的篩查價值卻較少被關(guān)注，因此本研究對湖北省武漢地區(qū)1 503名表觀健康者的血清Lp-PLA2水平進行了分析。結(jié)果顯示，男性血清Lp-PLA2水平明顯高于女性（P＜0.001）；在1 503名表觀健康者中，血清Lp-PLA2水平超過參考區(qū)間的有413名，陽性率為27.48%，其中男315名、女98名，男性的Lp-LPA2陽性率高于女性（P＜0.001）。由于本研究的入組人數(shù)有限，男性發(fā)生心腦血管疾病的風險是否比女性更高，或性別對Lp-PLA2水平的影響還有待更廣泛、更深入的流行病學調(diào)查結(jié)果加以證實。有研究結(jié)果顯示，血清Lp-PLA2活性存在性別差異，女性Lp-PLA2活性與雌激素水平相關(guān)[5]。為了分析Lp-LPA2與年齡是否存在關(guān)聯(lián)性，本研究將所有對象按年齡分為≤40歲組、41～60歲組和≥61歲組，結(jié)果顯示在表觀健康者總體人群及男、女性人群中，≥61歲組的Lp-PLA2陽性率均高于41～60歲組及≤40歲組，但其血清Lp-PLA2水平卻未見顯著升高，血清Lp-PLA2水平最高的是41～60歲組，這種現(xiàn)象可能與本研究≥61歲的受試者過少有關(guān)。豐睿捷等[6]在建立健康成人血清Lp-PLA2活性參考區(qū)間時發(fā)現(xiàn)，血清Lp-PLA2活性會隨著年齡緩慢升高。因此，我們將在后續(xù)研究中擴大老年人群的樣本量，以驗證這一結(jié)果。

本研究進一步分析了Lp-PLA2升高者與Lp-PLA2正常者之間常規(guī)生化指標的差異，結(jié)果顯示Lp-PLA2升高組年齡、SAA、ALT、AST、ALP、GGT、BUN、UA、Cr、Cys C、Glu、TG、apo B、Hcy均高于Lp-PLA2正常組（P＜0.05），TB、DBil、HDL-C、apo A均低于Lp-PLA2正常組（P＜0.05），這提示Lp-PLA2升高組可能存在肝、腎功能受損及血脂和/或Glu異?，F(xiàn)象。本研究結(jié)果還顯示，Lp-PLA2高度升高組僅SAA、GGT、Glu水平顯著高于中度升高組及輕度升高組（P＜0.05），這為Lp-PLA2聯(lián)合其他指標預(yù)測表觀健康者心腦血管疾病的發(fā)生提供了參考依據(jù)。由于本研究并未對上述Lp-PLA2陽性者，尤其是具有較高Lp-PLA2水平的陽性者進行定期、長期的隨訪，因此難以預(yù)測其心腦血管疾病事件是否真正發(fā)生。此外，本研究中Lp-PLA2僅與SAA、GGT呈正相關(guān)（r值分別為0.422、0.162，P值分別為＜0.001、0.001）。Lp-PLA2與SAA相似，在血管炎癥反應(yīng)中發(fā)揮一定的作用，但Lp-PLA2與GGT呈正相關(guān)的原因尚不清楚，還有待后續(xù)進一步研究。

綜上所述，武漢地區(qū)表觀健康人群中具有較高心腦血管疾病潛在風險的人并不少見，因此有必要在表觀健康人群中開展Lp-PLA2篩查，從而實現(xiàn)對心腦血管疾病的早期發(fā)現(xiàn)、早期干預(yù)。