楊麗紅，張世國，畢其華，江再菊，柳 強(qiáng)

1.杭州迪安醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，浙江杭州 310030；2.浙江醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江杭州 310013

自身免疫性疾病主要是指機(jī)體對(duì)于自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)而導(dǎo)致自身組織損害所引起的疾病[1]。近年來，抗核抗體(ANA)、抗可提取性核抗原抗體(抗ENA抗體)及抗雙鏈DNA(抗ds-DNA)抗體在多種自身免疫性疾病的診斷中具有重要的意義[2-3]。而在對(duì)患者的ANA、抗ENA抗體、抗ds-DNA抗體進(jìn)行檢測(cè)過程中，采用間接免疫熒光法、免疫印跡法及酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法的技術(shù)相對(duì)較為成熟，操作過程較為簡(jiǎn)單，對(duì)于患者的病情診斷有積極意義[4]。本研究擬通過對(duì)自身免疫性疾病患者的ANA、抗ENA抗體、抗ds-DNA抗體檢測(cè)情況進(jìn)行分析，為臨床早期診斷及早期干預(yù)提供有效依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取杭州迪安醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心2017年5月至2018年4月診斷的2 400例自身免疫性疾病患者作為研究對(duì)象，其中男1 300例，女1 100例，平均年齡(52.40±7.78)歲；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者412例，混合性結(jié)締組織病(MCTD)患者219例，強(qiáng)直性脊柱炎(AS)患者100例，多發(fā)性肌炎(PM/DM)患者97例，血小板性紫癜(ITP)患者233例，系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者490例，系統(tǒng)性硬皮病(PSS)患者489例，干燥綜合征患者(SS)患者360例。另選取體檢健康者240例作為對(duì)照組，其中男120例，女120例；平均年齡(51.45±8.12)歲。兩組研究對(duì)象的基礎(chǔ)資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書，并經(jīng)杭州迪安醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合自身免疫性疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并有嚴(yán)重肝、腎、心、肺功能障礙；(2)患有血液系統(tǒng)疾??；(3)合并精神疾??；(4)具有語言、認(rèn)知障礙。

1.2方法 分別對(duì)所有研究對(duì)象空腹采集肘靜脈血4 mL，3 500 r/min離心15 min，ANA采用間接免疫熒光法檢測(cè)，ANA抗體滴度大于1∶100則為陽性。采用免疫印跡法檢測(cè)患者的抗ENA抗體，主要包括抗nRNP/Sm抗體、抗Sm抗體、抗SS-A抗體、抗Ro-52抗體、抗SS-B抗體、抗SCL-70抗體、抗PM-SCL抗體、抗J0-1抗體。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法對(duì)患者的抗ds-DNA抗體水平進(jìn)行檢測(cè)，試劑均購自歐蒙公司，抗ds-DNA抗體水平≥100 kIU/L則為陽性。以上項(xiàng)目操作流程嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。

1.3觀察指標(biāo) 觀察各組血清ANA、抗ENA抗體、抗ds-DNA抗體陽性率并進(jìn)行比較；觀察各組血清抗nRNP/Sm抗體、抗Sm抗體、抗SS-A抗體、抗Ro-52抗體、抗SS-B抗體、抗SCL-70抗體、抗PM- SCL抗體、抗J0-1抗體陽性率并進(jìn)行比較。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0軟件進(jìn)行匯總分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1各組血清ANA、抗ENA抗體、抗ds-DNA抗體水平比較 觀察組血清ANA、抗ENA抗體、抗ds-DNA抗體陽性率均高于對(duì)照組(χ2=812.591、369.412、315.362，均P<0.001)。觀察組中SLE、MCTD、RA、AS患者血清ANA、抗ENA抗體、抗ds-DNA抗體水平陽性率較高，見表1。

表1 各組血清ANA,抗ENA抗體、抗ds-DNA抗體水平比較[n(%)]

2.2觀察組患者抗ENA抗體類別比較 觀察組患者抗nRNP/Sm抗體、抗Sm抗體、抗SS-A抗體、抗Ro-52抗體、抗SS-B抗體、抗SCL-70抗體、抗PM- SCL抗體、抗J0-1抗體的陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.362，P<0.001)，見表2。

表2 觀察組患者抗ENA抗體類別比較(n)

3 討 論

在臨床治療中，血清自身抗體的檢測(cè)在自身免疫性疾病的診斷中具有重要意義。研究報(bào)道顯示，ANA是一組對(duì)細(xì)胞核內(nèi)的DNA、RNA、蛋白或這些物質(zhì)的分子復(fù)合物產(chǎn)生的自身抗體[7]。在臨床疾病的診斷中，常常作為風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷依據(jù)[8]。本研究中，自身免疫性疾病患者的ANA陽性率為83.21%，高于健康人群，而在健康人群中，ANA基本處于陰性狀態(tài)，但是也存在一定的陽性表達(dá)情況，所以在臨床診斷中，單獨(dú)采用ANA作為患者的診斷依據(jù)，存在一定的誤診及漏診風(fēng)險(xiǎn)[9-10]，所以在對(duì)患者的臨床診斷中，當(dāng)患者診斷為ANA陽性后，尚不能進(jìn)行確診，需要綜合多種指標(biāo)對(duì)患者進(jìn)行診斷[11]，抗ds-DNA抗體在臨床多作為SLE患者診斷中的重要依據(jù)。本研究中，患者的抗ds-DNA抗體陽性率為64.25%。研究報(bào)道顯示，隨著自身免疫性疾病患者的好轉(zhuǎn)，其抗ds-DNA抗體陽性率下降[12]，但是單獨(dú)采用抗ds-DNA抗體作為自身免疫性疾病患者的診斷依據(jù)，其靈敏度相對(duì)較低?？笶NA抗體包含了多種抗體成分[13]，包括抗nRNP/Sm抗體、抗Sm抗體、抗SS-A抗體、抗Ro-52抗體、抗SS-B抗體、抗SCL-70抗體、抗PM-SCL抗體、抗J0-1抗體。本研究中，自身免疫性疾病患者的抗ENA抗體陽性率為60.25%，而針對(duì)不同的抗體成分，其陽性率不同。研究結(jié)果顯示，不同的自身抗原抗體指標(biāo)，對(duì)區(qū)分患者自身免疫性疾病的鑒別診斷有重要意義[14]。本研究中，抗Sm抗體的陽性率為9.38%，與國內(nèi)學(xué)者報(bào)道的抗ENA抗體抗Sm抗體的陽性率較一致[15]。而在對(duì)自身免疫性疾病患者的診斷中，抗Sm抗體的陽性率與患者血清抗nRNP/Sm抗體的陽性率存在一定的相關(guān)性。研究表明，患者血清抗nRNP/Sm抗體、抗Sm抗體及抗SS-A抗體的陽性率升高，可能存在一定狼瘡性腎炎的風(fēng)險(xiǎn)，通過對(duì)患者的抗nRNP/Sm抗體、抗Sm抗體、抗SS-A抗體、抗Ro-52抗體、抗SS-B抗體、抗SCL-70抗體、抗PM- SCL抗體、抗J0-1抗體陽性率分析，其中以抗nRNP/Sm抗體陽性率較高，在自身性免疫性疾病患者中有更好的診斷價(jià)值[16]。提示在不同的自身性免疫疾病患者的診斷中，均普遍存在著抗nRNP/Sm抗體陽性率的升高，可作為其重要的診斷依據(jù)。

本研究局限于患者的計(jì)數(shù)資料的分析，未對(duì)不同類型的疾病量化指標(biāo)開展相關(guān)性研究，有待日后深入探討。

綜上所述，血清ANA、抗ENA抗體聯(lián)合抗ds-DNA抗體的檢測(cè)，對(duì)于自身免疫性疾病的診斷及分型具有重要的意義。