黃菁梅 謝寶釗 李水賢 楊柳 陸雪 鐘金河 盧品伶

原發(fā)性干燥綜合征(Primary sjogren′s syndrome，pSS)是一種以淚腺與唾液腺等外分泌腺分泌減少為特點(diǎn)的慢性炎癥性自身免疫病，主要以口、眼干燥為主要表現(xiàn)，并可累及肺、腎、肝等重要器官[1-2]，其中，間質(zhì)性肺疾病(interstitial lung disease,ILD)是pSS患者肺部受累的主要表現(xiàn)，也是pSS患者最常見的并發(fā)癥之一[3]。干燥綜合征并間質(zhì)性肺疾病(pSS-ILD)可導(dǎo)致感染與呼吸衰竭，是pSS患者死亡的主要原因之一[4-5]。目前關(guān)于pSS-ILD的病因尚未完全清晰，但有研究報(bào)道可能與多種炎癥細(xì)胞因子的釋放導(dǎo)致肺部炎癥有關(guān)[6]，已知IL-6、IL-8、IL-10以及TNF-α等炎癥細(xì)胞因子與多種自身免疫性疾病有關(guān)[7]，但在pSS-ILD患者中尚未見有關(guān)報(bào)道。本研究通過比較IL-6、IL-8、IL-10以及TNF-α等細(xì)胞因子在單純pSS患者與并發(fā)ILD的pSS患者中的表達(dá)水平，旨在探究這些細(xì)胞因子與pSS患者并發(fā)ILD的關(guān)系?，F(xiàn)報(bào)道如下。

資料與方法

一、一般資料

選取2017年1月至2019年12月在我院接受治療的50例pSS患者作為研究對(duì)象，納入標(biāo)準(zhǔn)為：①經(jīng)臨床確診為pSS[8]；②年齡>18歲；③無其他自身免疫性疾?。虎芫哂凶灾餍袨槟芰?。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并肺部惡性腫瘤患者；②伴有其他原因?qū)е碌姆尾繃?yán)重?fù)p傷疾病者(如慢性阻塞性肺疾病、肺結(jié)核、支氣管擴(kuò)張等)；③長(zhǎng)期服用可導(dǎo)致肺纖維化的藥物；④伴有慢性心、肝、腎功能不全者；⑤既往明確診斷為肺癌、急性呼吸窘迫綜合征、其他間質(zhì)性肺疾病(如特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化、結(jié)節(jié)病等)者。根據(jù)是否合并ILD分為干燥綜合征并間質(zhì)性肺疾病組(pSS-ILD組)與干燥綜合征不合并間質(zhì)性肺疾病組(pSS-n-ILD組)。另選擇同期在我院進(jìn)行體檢且性別、年齡等一般資料與pSS患者均衡可比的20名健康人群作為對(duì)照組。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批同意，所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。

二、細(xì)胞因子檢測(cè)方法

所有研究對(duì)象均于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血3 mL，置于無菌試管中，進(jìn)行10min的3000r/min的離心處理，取上層血清于-80℃低溫下保存。使用西門子公司生產(chǎn)的試劑盒與試劑通過酶聯(lián)免疫法(ELISA)對(duì)患者血清IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α表達(dá)水平進(jìn)行測(cè)定，所有操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

三、ILD診斷方法

根據(jù)患者肺部高分辨率CT(high resolution CT,HRCT)檢查結(jié)果判斷是否合并ILD的依據(jù)，將HRCT結(jié)果中出現(xiàn)蜂窩肺、磨玻璃影或網(wǎng)格狀影的患者判定為合并ILD。收集兩組患者性別、年齡、病程、免疫球蛋白以及是否吸煙等資料。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、pSS患者與健康人群細(xì)胞因子表達(dá)水平比較

兩組IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α表達(dá)水平差異均有顯著性(P<0.05)。其中pSS組患者IL-6、IL-8、TNF-α表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組，IL-10表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表1)。

表1 pSS組與對(duì)照組IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α表達(dá)水平比較

二、pSS患者合并ILD現(xiàn)狀及一般資料對(duì)比情況

本研究50例pSS患者中，合并ILD的占30.0%(15/50)，未合并的占70.0%(35/50)，對(duì)兩組患者的基線資料進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)，合并ILD與未合并ILD患者的年齡、性別、平均病程、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)以及吸煙情況，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表2)。

表2 pSS-ILD組與pSS-n-ILD組患者一般資料比較

三、pSS-ILD組與pSS-n-ILD組細(xì)胞因子水平比較

兩組IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α表達(dá)水平均具有顯著差異(P<0.05)。其中pSS-ILD組患者IL-6、IL-8、TNF-α表達(dá)水平顯著高于pSS-n-ILD組，IL-10表達(dá)水平顯著低于pSS-n-ILD組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表3)。

表3 pSS-ILD組與pSS-n-ILD組細(xì)胞因子水平比較

四、pSS患者IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α表達(dá)水平預(yù)測(cè)ILD的ROC曲線分析

IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α水平在評(píng)價(jià)pSS患者并發(fā)ILD的AUC分別為：0.667、0.712、0.894、0.733(見圖1與表4)。

表4 IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α指標(biāo)的ROC曲線分析結(jié)果

圖1 pSS患者IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α表達(dá)水平預(yù)測(cè)ILD的ROC曲線分析

討 論

pSS是一種全球性疾病，隨著世界人口老齡化的進(jìn)展，其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，在我國(guó)老年群體中，pSS的發(fā)病率超過4%，是危害我國(guó)國(guó)民健康的重要疾病之一[9]。pSS患者除表現(xiàn)為明顯的外分泌腺體分泌減少外，也會(huì)伴有皮膚病變、骨骼肌肉疼痛以及重要臟器與系統(tǒng)的損害作用，其中肺是pSS最易受累的腺體外器官，有流行病學(xué)研究顯示，約有8%～75%的pSS患者因累及肺部而出現(xiàn)ILD(因檢測(cè)方法與診斷標(biāo)準(zhǔn)不同，累及率存在較大差別)[10]。pSS-ILD患者通常存在明顯的呼吸困難與限制性肺通氣功能障礙，同時(shí)肺彌散功能降低，最終可能發(fā)展為彌漫性肺纖維化，導(dǎo)致患者出現(xiàn)呼吸衰竭而死亡，有研究顯示，pSS-ILD患者死亡率可超過60%[10]。目前關(guān)于pSS-ILD的病因尚未完全清晰，臨床上認(rèn)為其與遺傳、病毒感染以及性激素異常等多種因素共同作用有關(guān)[11]，而近期研究認(rèn)為慢性炎癥與pSS-ILD關(guān)系密切，因此，目前對(duì)于pSS-ILD的治療也更多從減輕患者炎癥反應(yīng)出發(fā)，通過減輕患者炎癥反應(yīng)來阻止或改善其肺間質(zhì)纖維化進(jìn)展[12]。但pSS-ILD與炎癥細(xì)胞因子的關(guān)系仍需大量研究進(jìn)一步證實(shí)。

本研究中，pSS患者與健康人群體內(nèi)IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α表達(dá)水平均具有顯著差異，進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn)，合并ILD的患者血清IL-6、IL-8、TNF-α等炎癥因子表達(dá)水平顯著高于未合并ILD患者，而IL-10表達(dá)水平卻較未合并ILD的患者低，分析其原因：pSS患者合并ILD可能與機(jī)體多種炎癥因子過多分泌導(dǎo)致肺泡炎癥有關(guān)，IL-6是炎癥細(xì)胞因子的核心成員，它可由激活的T細(xì)胞、成纖維細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等在受到外界刺激時(shí)產(chǎn)生的一種促炎因子，能有效反應(yīng)機(jī)體炎癥狀態(tài)，已被證實(shí)，在多種機(jī)體免疫疾病中起到重要作用[13]。IL-8是主要由單核細(xì)胞產(chǎn)生的炎癥因子，可促進(jìn)中性粒細(xì)胞趨化，被證實(shí)在小支氣管炎和囊性纖維化的發(fā)病中發(fā)揮重要作用[14]。TNF-α是一種人腫瘤壞死因子，能夠作用于T細(xì)胞，產(chǎn)生多種炎癥因子，誘發(fā)機(jī)體炎癥反應(yīng)，同時(shí)，其末端的羧基重復(fù)結(jié)構(gòu)能通過與IL-8等炎癥因子的糖蛋白結(jié)合，增強(qiáng)炎癥因子活性，進(jìn)而加重機(jī)體炎癥反應(yīng)[15]。合并ILD的pSS患者血清IL-6、IL-8及TNF-α均顯著高于未合并的pSS患者，這提示pSS-ILD患者體內(nèi)存在較為嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。大量炎癥因子長(zhǎng)期浸潤(rùn)肺部，可能會(huì)促進(jìn)肺纖維細(xì)胞增生與細(xì)胞外基質(zhì)的合成，進(jìn)而導(dǎo)致肺纖維化的發(fā)生與發(fā)展。

IL-10是一種具有抑制炎性反應(yīng)作用的細(xì)胞因子，參與機(jī)體炎癥與免疫反應(yīng)，與血液、消化及心血管系統(tǒng)疾病關(guān)系密切，幾乎能由所有的淋巴細(xì)胞合成，而在人體內(nèi)主要由T細(xì)胞亞群：Treg細(xì)胞合成與分泌。其抑制炎癥反應(yīng)的機(jī)制為抑制單核巨噬細(xì)胞釋放炎癥介質(zhì)，從而抑制LPS與IFN-γ導(dǎo)致的IL-6、IL-8及TNF-α等促炎因子分泌，降低機(jī)體炎癥反應(yīng)[16]。IL-10在抑制炎癥因子分泌的同時(shí)還能下調(diào)刺激因子CD86與粘附因子CD54的表達(dá)。合并ILD的pSS患者血清IL-10表達(dá)水平顯著降低，這可能是疾病狀態(tài)下，Treg細(xì)胞被抑制，導(dǎo)致IL-10分泌減少[17]。經(jīng)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，IL-10預(yù)測(cè)pSS患者并發(fā)ILD的效能最高，且當(dāng)pSS患者IL-10低于5.162 pg/mL時(shí)，發(fā)生ILD的可能性明顯上升，這可能跟IL-10表達(dá)水平過低時(shí)，不足以對(duì)抗機(jī)體炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致大量炎癥因子浸潤(rùn)肺部，造成肺部損傷有關(guān)。本研究通過分析pSS患者血清IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α表達(dá)水平與ILD的關(guān)系，揭示了IL-10等炎癥細(xì)胞因子在pSS患者肺間質(zhì)受累中可能具有重要作用，為明確pSS-ILD發(fā)病機(jī)制與治療提供新的參考思路。但本研究還存在樣本量較小的不足，可能會(huì)使結(jié)果存在偏倚，且尚未對(duì)炎癥細(xì)胞因子與pSS-ILD患者疾病嚴(yán)重程度進(jìn)行研究，望今后納入更大樣本進(jìn)行更全面的研究。

綜上所述，血清IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α細(xì)胞因子與pSS患者并發(fā)ILD關(guān)系密切，IL-10表達(dá)水平在預(yù)測(cè)pSS患者并發(fā)ILD上具有較高效能，臨床上應(yīng)對(duì)IL-10呈低表達(dá)的pSS患者予以重點(diǎn)關(guān)注。