鐘雪彬，柏 峰，黃 洋，李 緯

(南京長澳醫(yī)藥科技有限公司，江蘇 南京 210038)

雷貝拉唑(Rabeprazole sodium)為苯并咪唑類化合物，是繼奧美拉唑、蘭索拉唑、泮托拉唑后第四個(gè)上市的新一代質(zhì)子泵抑制劑，本品是由日本衛(wèi)材公司開發(fā)，于1997年首先在日本上市，1999年在美國上市，商品名：Pariet?，劑型為腸溶片[1-2]。2007年波利特腸溶片進(jìn)入中國。

雷貝拉唑鈉在胃酸中極其不穩(wěn)定，目前其口服制劑多開發(fā)為腸溶片或者腸溶膠囊，但是該類劑型不適合吞咽有困難的特定病人群體，因此，本研究擬將雷貝拉唑鈉開發(fā)為口崩片，極大的提高服用順應(yīng)性，同時(shí)以市售的雷貝拉唑鈉腸溶片作為參比制劑，進(jìn)行體外溶出曲線和體內(nèi)生物等效性研究。

本研究擬先制備雷貝拉唑鈉腸溶微丸，然后通過壓片的方法制備雷貝拉唑鈉口腔崩解片，因口腔崩解片要求在口腔內(nèi)能夠迅速崩解、無沙礫感、口感良好、容易吞咽，對(duì)口腔黏膜無刺激性[3]。因此，關(guān)鍵中間體腸溶微丸相較于普通的腸溶膠囊中的微丸粒徑要求更細(xì)小，同時(shí)需要更有韌性才能經(jīng)受壓片過程而不被破壞。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Mini Glatt5流化床(德國Glatt公司)；BT100-2J 蠕動(dòng)泵驅(qū)動(dòng)器(保定蘭格恒流泵有限公司)；TD20002C電子天平(天津天馬衡基儀器有限公司)；AL204電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)；Agilent780+850DS自動(dòng)溶出儀(安捷倫)；U3000高效液相色譜儀(戴安)；Milli-Q純水儀(密理博)；S220 pH計(jì)(梅特勒-托利多儀器有限公司)；UV-2700紫外可見光光度計(jì)(島津公司)。

1.2 藥品與試劑

雷貝拉唑鈉(常州康麗制藥有限公司);雷貝拉唑鈉腸溶片(日本衛(wèi)材公司)；蘇麗芯TM250/355(上?？房蛋录夹g(shù)有限公司)；羥丙甲纖維素E3LV(陶氏化學(xué)公司)；滑石粉(廣西龍勝華美滑石開發(fā)有限公司)；檸檬酸三乙酯(上海冒為醫(yī)藥輔料技術(shù)有限公司)；二氧化鈦(江蘇宏遠(yuǎn)藥業(yè)有限公司)；甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物水分散體L 30D-55(Evonik Rohm GmbH公司)；氫氧化鈉(湖南爾康制藥有限公司)；氧化鎂(湖南新綠方藥業(yè)有限公司)；聚乙二醇6000(山東瑞升藥用輔料有限公司)；磷酸氫二鉀(分析純)，氫氧化鉀(分析純)，磷酸(色譜純)，甲醇(色譜純)，乙腈(色譜純)。

2 方法與結(jié)果

2.1 測定方法

2.1.1 有關(guān)物質(zhì)和含量測定方法

供試品溶液配制：精確稱取適量腸溶微丸(約含雷貝拉唑鈉10mg)，加入100 mL棕色容量瓶中，加入0.01 mol/L氫氧化鈉60 mL超聲溶解，完全溶解用乙腈定容至刻度線，搖勻即得供試品溶液。

對(duì)照品溶液配制：取雷貝拉唑鈉對(duì)照品10mg于100 mL棕色容量瓶中，加0.01 mol/L氫氧化鈉60 mL超聲溶解完全后用乙腈定容至刻度線，搖勻即得對(duì)照品溶液。

空白輔料溶液配制：按處方配比取空白輔料適量(相當(dāng)于雷貝拉唑鈉10mg)置于100 mL棕色容量瓶中，加0.01 mol/L氫氧化鈉60 mL超聲溶解完全溶解用乙腈定容至刻度線，搖勻即得空白輔料溶液。

有關(guān)物質(zhì)、含量按以下色譜方法進(jìn)行測定。參照《中國藥典》2015版雷貝拉唑鈉腸溶膠囊及腸溶片的有關(guān)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積1.0%，各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2.0%。有關(guān)物質(zhì)測定色譜條件采用梯度洗脫，洗脫方法見下表。

表1 有關(guān)物質(zhì)、含量色譜條件

表2 有關(guān)物質(zhì)液相洗脫梯度

2.1.2 耐酸力的測定[4]

耐酸力的測定按照《中國藥典》2015版XC第二法，以0.1mol/L鹽酸溶液500 ml 為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r/min，2 h后，棄去溶出介質(zhì)，用水沖洗溶出杯內(nèi)顆粒，照2.1.1中含量的測定方法測定取出的微丸含量，每個(gè)顆粒中雷貝拉唑鈉含量應(yīng)不低于標(biāo)示量的90%。

2.1.3 溶出度測定[5]

pH值為1.0鹽酸溶液：取自制微丸及市售原研片(批號(hào)：1706085)，照釋放度測定法(中國藥典2015年版四部通則0931第一法方法1)，采用溶出度測定法(中國藥典2015年版二部通則0931第一法)的裝置，以pH值為1.2鹽酸、pH值為6.0磷酸鹽緩沖液、pH值為6.8磷酸鹽緩沖液溶液900mL為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為 50r/min，依法操作，分別于5,10,15,30,45,60,90、120min時(shí)，取溶液5mL，濾過，作為供試品溶液；另取雷貝拉唑鈉對(duì)照品適量，用相應(yīng)溶出介質(zhì)配制0.01mg/mL的對(duì)照品溶液。照紫外-可見分光光度法(中國藥典2015版四部通則0401)測定吸光度，pH值為1.2鹽酸溶液在299nm測定；pH值為6.0磷酸鹽緩沖液在295nm測定；pH值為6.8磷酸鹽緩沖液在285nm測定。每批樣品各測定6份。計(jì)算每份樣品各時(shí)間點(diǎn)的釋放量，繪制釋放曲線。

2.2 處方篩選與優(yōu)化

雷貝拉唑鈉微丸設(shè)計(jì)為三層包衣，采用微丸(250～350μm)為內(nèi)核，第一層包衣為含藥層，第二層包衣為隔離層，第三層包衣為腸溶層，并且優(yōu)化了各層的處方。以下處方篩選均以100g微丸為例。

2.2.1 含藥層包衣

按照表3稱取處方量羥丙甲纖維素慢慢分散至攪拌狀態(tài)下的純化水中，溶脹完全后，加入氧化鎂和滑石粉，攪拌均勻后，加入雷貝拉唑鈉使其溶解完全，過200目篩，按照表4中包衣參數(shù)進(jìn)行包衣。

表3 含藥層包衣處方

表4 含藥層包衣工藝

含藥層包衣過程，考察了不同粘合劑用量對(duì)上藥率的影響，上藥率通過包衣結(jié)束后檢測藥物含量計(jì)算得到。結(jié)果表明：隨著HPMC濃度的提高，上藥率逐步增加，當(dāng)HPMC濃度為4.5g時(shí)在包衣過程中粘丸現(xiàn)象嚴(yán)重，故包衣處方選擇粘合劑用量為3.0gHPMC，詳細(xì)結(jié)果見表5。

表5 粘合劑用量對(duì)上藥率的影響

2.2.2 隔離層包衣

按照表6取處方量羥丙甲纖維素慢慢分散至攪拌狀態(tài)下的純化水中，溶脹完全后，加入檸檬酸三乙酯、聚乙二醇6000和滑石粉，攪拌均勻后，過200目篩，按照表7中工藝參數(shù)進(jìn)行包衣。

表6 隔離層包衣處方

表7 隔離層包衣工藝

隔離層主要起到增加穩(wěn)定性的作用，因此，本研究考查了不同增重對(duì)雷貝拉唑鈉腸溶微丸的穩(wěn)定性[6]，將隔離層微丸放置在60℃，RH75%條件下放置5天后進(jìn)行觀察并取樣檢測有關(guān)物質(zhì)。結(jié)果表明：隔離層中羥丙甲基纖維素用量在12g以上有利于微丸的穩(wěn)定，最終選擇12g，此處方隔離層增重約為15%，詳細(xì)結(jié)果見表8。

表8 隔離層對(duì)含藥層的保護(hù)

2.2.3 腸溶層包衣

按照表9取處方量甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物水分散體，在攪拌狀態(tài)下慢慢加入氫氧化鈉溶液，檸檬酸三乙酯，攪拌均勻，過300目篩；稱取處方量的水，攪拌狀態(tài)下，加入處方量滑石粉，二氧化鈦，攪拌混合均勻后，過200目篩，備用；上述兩溶液混合均勻，按照表10中工藝參數(shù)進(jìn)行包衣。

表9 腸溶層包衣處方

表10 腸溶層層包衣工藝

腸溶層包衣過程，考察甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物水分散體用量對(duì)微丸耐酸力的影響，測定方法參考文獻(xiàn)[7]，結(jié)果表明(表11)：隨著甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物水分散體用量提高微丸的耐酸能力增強(qiáng)，當(dāng)其用量在120g以上具有較好的耐酸性能，且包衣效率較高，因此，最終選擇用量為120g，此處方腸溶層增重約為50%。

表11 腸溶層微丸的耐酸力

2.3 自制雷貝拉唑鈉腸溶微丸釋放行為與市售品對(duì)比

按最佳處方工藝制備三批微丸，并且與日本衛(wèi)材公司研制的雷貝拉唑鈉腸溶片(商品名為波利特，規(guī)格10mg)進(jìn)行溶出曲線比較，釋放度實(shí)驗(yàn)采用2.1.3中所述溶出度測定方法，分別選擇pH值為1.2鹽酸溶液，pH值為6.0磷酸鹽緩沖液，pH值為6.8磷酸鹽緩沖液三種不同的介質(zhì)進(jìn)行，轉(zhuǎn)速為50 r/min，結(jié)果表明：按照最佳處方工藝制備的三批微丸批間重復(fù)性高，在pH值為1.2鹽酸條件下市售品和自制品的各時(shí)間點(diǎn)的平均釋放量均小于10%，溶出行為相似。由表12可知，pH值為6.0磷酸鹽和pH值為6.8磷酸鹽介質(zhì)中自制品和市售片釋放曲線的f2均大于50，兩者釋放行為相似。詳細(xì)結(jié)果見圖1、圖2、圖3、表12。

圖1 pH值為1.2鹽酸介質(zhì)中的釋放度曲線

圖2 pH值為6.0磷酸鹽介質(zhì)中的釋放度曲線

圖3 pH值為6.8磷酸鹽介質(zhì)中的釋放度曲線

表12 pH值為6.0和pH6.8值 為磷酸鹽介質(zhì)下的f2因子結(jié)果

3 討論

在本研究中，采用流化床包衣工藝，設(shè)計(jì)并制備了可用于雷貝拉唑鈉口腔崩解片的腸溶微丸，研究了不同處方工藝對(duì)制備雷貝拉唑鈉腸溶微丸的影響并確定了最優(yōu)處方工藝。

本實(shí)驗(yàn)微丸包衣過程中，由于微丸較小(粒徑0.3 mm左右)，比表面積較大，微丸靜電現(xiàn)象嚴(yán)重。在處方中加入聚乙二醇6000后，靜電現(xiàn)象得到改善；包衣過程中粘丸現(xiàn)象較明顯，最終通過選擇低粘度HPMC，控制增塑劑用量，合理控制包衣過程工藝參數(shù)，以保持良好的流化狀態(tài)。

通過本實(shí)驗(yàn)篩選的最優(yōu)處方工藝制備的雷貝拉唑鈉腸溶微丸，批間重復(fù)性好，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，體外釋放行為與市售品雷貝拉唑鈉腸溶片相似，在后期研究中筆者擬采用該微丸進(jìn)行雷貝拉唑鈉口腔崩解片的處方和工藝的研究。