李佳祺

（河南省新鄉(xiāng)市人民公園 453000）

1 方法

1.1 病料采取

選取馬趙營村和楊窯兩處奶牛場共5 頭患病奶牛,對患乳區(qū)乳頭嚴格消毒,待干后,每個乳頭先棄去前3 把奶,采取患病乳區(qū)共5 份奶樣（5ml/乳區(qū)）至無菌管內(nèi)并進行標號,立即送至實驗室進行檢驗[1]。

1.2 病原菌分離培養(yǎng)及鑒定

用接種環(huán)取病料于鮮血肉湯中培養(yǎng)24h,挑取典型菌落涂片,革蘭氏染色,鏡檢。根據(jù)菌體形態(tài)、溶血情況及革蘭氏染色特性初步判定細菌類屬。并將其進一步純化培養(yǎng)。純培養(yǎng)后鏡檢無雜菌者保存于試管斜面培養(yǎng)基內(nèi)。

1.3 復(fù)方雙丁散浸提液的制備

按配方中一定比例取中藥蒲公英、二花、連翹、紫花地丁、王不留行、絲瓜絡(luò)等共340g,浸泡、加熱、蒸餾取濾液將剩余藥液配成340ml。

此時藥液濃度為1g/ml,分別取80、40、20ml 藥液,將其濃縮成10ml 藥液,制成8、4、2 倍藥液待用。

1.4 藥敏試驗

1.4.1 細菌計數(shù)

將菌液分別稀釋106、107、108倍,另備一試管中盛有9ml滅菌生理鹽水,作為空白對照。

培養(yǎng)24h 左右后應(yīng)立即計數(shù)每個平板上的菌落數(shù)。按30～300 個菌落計數(shù)規(guī)則計算平板的菌落數(shù)。

不同稀釋濃度細菌計數(shù)結(jié)果,見表1。

由表1 可知,于37℃溫箱中培養(yǎng)24h 后,菌液計數(shù)結(jié)果大致為5.0×107個/ml。

2 試驗結(jié)果

2.1 分離培養(yǎng)鑒定結(jié)果

表1 細菌計數(shù)結(jié)果

經(jīng)革蘭氏染色,鏡檢,細菌的形態(tài)觀察從中成功分離培養(yǎng)出葡萄球菌2 株、鏈球菌1 株、大腸桿菌3 株。

2.2 藥敏試驗

各菌株藥敏試驗結(jié)果,見表2。

培養(yǎng)24h 后觀察時,青、鏈霉素抑菌效果明顯,且多為高敏,而復(fù)方雙丁散多為高敏、中敏效果；在培養(yǎng)48h 觀察后,鏈霉素抑菌圈中長有新的菌落,而復(fù)方雙丁散不同濃度的抑菌效果均有增加。

3 分析討論

3.1 復(fù)方雙丁散浸提液與青、鏈霉素藥敏試驗比較

從臨床型奶樣的細菌分離情況來看,葡萄球菌,鏈球菌和大腸桿菌是該奶牛場奶牛乳房炎的主要病原菌[2]。從本文的藥敏試驗結(jié)果中可以看出,復(fù)方雙丁散浸提液對奶牛乳房炎病原菌有很好的抑菌作用,而青、鏈霉素的耐藥性相比中藥制劑抑菌圈相對較小。

3.2 復(fù)方雙丁散功效分析

本試驗根據(jù)奶牛乳房炎的發(fā)病機理和中藥藥性選取具有清熱解毒、抗菌消炎、活血化瘀、消腫散結(jié)的12 種中藥材組成復(fù)方制劑。

主藥蒲公英和紫花地丁性味甘平、微苦寒、具有清熱解毒、尿通淋、消腫散結(jié)的功效,是治乳癰之要藥；金銀花性味甘寒、疏散風(fēng)熱、連翹性苦微寒、消癰散結(jié)。這3 種藥物結(jié)合在一起可以增強整個組方的療效。

3.3 抗生素的耐藥性問題

由表2 可以看出,青、鏈霉素普遍比中藥抑菌圈小,且該病例在發(fā)病后用抗生素治療,病情沒有好轉(zhuǎn)跡象,這很可能與病原菌對抗生素產(chǎn)生耐藥性有關(guān)。

在培養(yǎng)24h 觀察,抗生素抑菌效果明顯,而復(fù)方雙丁散只有部分高敏、中敏效果；在培養(yǎng)48h 觀察后,鏈霉素抑菌圈中長有新的菌落,而復(fù)方雙丁散不同濃度的抑菌效果均有增加[3]。這很可能也與抗生素產(chǎn)生耐藥性有關(guān),而中藥藥效較慢,24h未達到最高抑菌效果。

4 結(jié)論

本試驗表明,復(fù)方雙丁散浸提液對乳房炎常見3 種病原菌抑菌效果比青、鏈霉素明顯,且藥效持久,可以進一步進行臨床治療試驗。