楊勝男 梁建波 馬清霞 何宇乾 張嚴(yán)琦

（山東省青島市動物疫病預(yù)防控制中心 266000）

山東省青島市家禽養(yǎng)殖量大,養(yǎng)殖密度高。根據(jù)《中國畜牧獸醫(yī)年鑒》（2018 年）中的數(shù)據(jù),截至2018 年底,青島市家禽存欄5524 萬只,其中蛋雞1301 萬只、肉雞3890 萬只、水禽315 萬只。2019 年青島全市發(fā)放禽流感（H5+H7）滅活苗2592.83 萬ml,免疫雞3468.42 萬羽,鴨229.53 萬羽,鵝51.85萬羽,其他禽16.55 萬羽。2017 年青島市被農(nóng)業(yè)農(nóng)村部列為全國畜禽“先打后補(bǔ)” 試點(diǎn)市,因此,免疫抗體監(jiān)測和疫苗的免疫效果評價(jià)結(jié)果格外重要,關(guān)系到養(yǎng)殖場是否可以領(lǐng)取補(bǔ)貼的切實(shí)利益。此外,青島市作為山東省膠東半島無規(guī)定動物疫病區(qū)的核心區(qū),定期對易感動物的免疫密度、應(yīng)免率,免疫抗體合格率等免疫效果指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測,有助于進(jìn)一步推進(jìn)無疫小區(qū)的建設(shè)。根據(jù)青島市家禽養(yǎng)殖類型采取隨機(jī)抽樣檢測的方法,調(diào)查全市家禽禽流感的群體免疫合格率和個體免疫合格率,及時(shí)掌握流行病學(xué)動態(tài)和免疫效果。

1 材料與方法

1.1 監(jiān)測對象與范圍

監(jiān)測對象：青島市范圍內(nèi)的雞、鴨、鵝和其他家禽。

監(jiān)測范圍：種禽場、規(guī)模商品禽場、散養(yǎng)戶。

規(guī)模養(yǎng)殖場：蛋雞、水禽存欄2000 只以上,肉雞存欄10000 只以上；散養(yǎng)戶：蛋雞、水禽存欄2000 只以下,肉雞存欄10000 只以下。

1.2 抽樣策略與樣本量計(jì)算

血清學(xué)檢測的抽樣策略。以全市所有的家禽養(yǎng)殖場（戶）為抽樣框,按照二階段隨機(jī)抽樣策略進(jìn)行抽樣監(jiān)測。首先根據(jù)估計(jì)流行率的抽樣方法隨機(jī)抽取養(yǎng)殖場（戶）,按照預(yù)期抗體合格率為90%、可接受誤差為5%、置信水平95%計(jì)算抽樣場（戶）數(shù),計(jì)算得出青島市需要采集126 個養(yǎng)殖場（戶）。在每個養(yǎng)殖場點(diǎn)內(nèi),根據(jù)發(fā)現(xiàn)疫病的抽樣策略,隨機(jī)抽取個體。每個場點(diǎn)按照群內(nèi)陽性率10%,置信水平95%,隨機(jī)抽樣30 份,不足30 只的全部采集[1,2]。

1.3 樣品來源及場點(diǎn)分布

在全市范圍內(nèi),隨機(jī)抽取124 個養(yǎng)殖場（戶）。

1.4 血清學(xué)檢測

在家禽養(yǎng)殖場采集咽喉、泄殖腔棉拭子的同時(shí),翅下靜脈采集全血,分離血清。依據(jù)GB/T 18936-2003 標(biāo)準(zhǔn)中的血凝抑制試驗(yàn)（HI）方法,使用H5亞型禽流感血凝抗原（Re-11 和Re-12）、H7亞型禽流感血凝抗原（Re-2）（青島易邦生物工程有限公司和哈爾濱畜牧獸醫(yī)研究所,批號分別為190056100、190046300、190056501 和2019004、2019005、2019005）,測定H5 亞型禽流感免疫抗體水平和H7亞型HI 抗體滴度。HI 抗體滴度在24 以上的判為免疫抗體合格或抗體陽性,場戶內(nèi)合格率≥70%的判為抗體合格場戶或抗體陽性場戶。

1.5 數(shù)據(jù)分析

個體免疫合格率%=（接種禽流感疫苗后免疫合格的動物數(shù)/實(shí)際接種動物數(shù)）×100

群體免疫合格率%=（個體免疫合格率＞70%的場戶數(shù)/實(shí)際接種的場戶數(shù)）×100

2 結(jié)果與分析

免疫抗體檢測。在全市范圍內(nèi),隨機(jī)抽取的124 個養(yǎng)殖場（戶）,其中,散養(yǎng)戶數(shù)占37.10%,規(guī)模場數(shù)占52.42%,共采集樣品5150 份,其中來自種畜禽場1110 份,規(guī)模場2770 份。經(jīng)檢測,全市家禽H5亞型禽流感和H9亞型禽流感的整體免疫合格率在85%以上,詳見表1。青島市5 區(qū)市的免疫抗體水平中即墨市免疫抗體水平均較好,均達(dá)到100%,詳見表2。進(jìn)一步分析不同養(yǎng)殖類型的免疫抗體水平發(fā)現(xiàn),種畜禽場的免疫抗體合格率均高于商品代場和散養(yǎng)戶,詳見表3。

青島市高致病性禽流感的免疫抗體合格率均在85%以上,高于國家要求的70%。且高于青島市無規(guī)定動物疫病區(qū)管理?xiàng)l例中規(guī)定的免疫抗體合格率80%的標(biāo)準(zhǔn)。說明免疫效果較好。一是全市加強(qiáng)了疫苗儲藏和運(yùn)輸?shù)睦滏溝到y(tǒng)管理,同時(shí)加強(qiáng)對點(diǎn)畜禽飼養(yǎng)場、重點(diǎn)村戶強(qiáng)化免疫,自2015 年起,不斷加大對防疫員隊(duì)伍的建設(shè)力度,建立相對穩(wěn)定的防疫員體系。對檢測免疫抗體結(jié)果不理想的場戶定期開展補(bǔ)免政策。從各區(qū)市免疫抗體水平可以看出,即墨區(qū)和西海岸新區(qū)的整體免疫水平都比其他區(qū)市高,這兩地市相較于其他地市,財(cái)政資金、技術(shù)人員配備較充裕,整體的動物疫病防控投入較充足。種畜禽場的免疫水平全部為100%,可以考慮在有條件的種畜禽場建立生物安全隔離區(qū),或者是進(jìn)行非免疫禽流感無疫小區(qū)的探索,規(guī)模養(yǎng)殖場的禽流感抗體水平相對于散養(yǎng)戶來說較高,由于規(guī)模養(yǎng)殖場選址嚴(yán)格、管理專業(yè)規(guī)范,有專職獸醫(yī)和技術(shù)人員,且有合理、成熟的免疫程序。個別散養(yǎng)戶的禽流感免疫抗體在90%以下,其主要原因可能是由于養(yǎng)雞場免疫日期不同造成的,同時(shí)還要繼續(xù)對散養(yǎng)戶做好宣傳工作,加強(qiáng)監(jiān)管。下一步將繼續(xù)做好免疫抗體定點(diǎn)監(jiān)測工作,為青島市禽流感疫情預(yù)警預(yù)報(bào)提供技術(shù)支撐。

表1 禽流感的免疫抗體水平

表2 青島市5 區(qū)市禽流感的免疫抗體水平

表3 不同養(yǎng)殖類型的禽流感免疫抗體水平