李雪梅 沈廣志 翟鳳國(guó) 劉佳維 侯甲福(牡丹江醫(yī)學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157011)

0 引言

囊泡又稱非離子表面活性劑囊泡，是由非離子表面活性劑和膽固醇，在親水介質(zhì)中自組裝形成的具有閉合雙分子層膜結(jié)構(gòu)的封閉體系[1,2]。囊泡是具有雙層膜結(jié)構(gòu)的載體，可以作為體內(nèi)藥物的載體。文中采用乙醇注入法制備紅花黃色素囊泡，對(duì)影響因素進(jìn)行考察，得最佳的制備工藝。

1 材料與儀器

紅花黃色素(自提)；吐溫-80(江蘇省海安石油化工廠)；膽固醇(南京新百藥業(yè)有限公司)；無(wú)水乙醇(色譜純，江蘇強(qiáng)盛功能化學(xué)股份有限公司)；95%乙醇。09A5型恒溫磁力攪拌器(上海一恒科學(xué)儀器有限公司)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 囊泡的制備

吐溫-80和膽固醇的總重恒定為0.4g，取適當(dāng)比例的吐溫80和膽固醇加入到乙醇溶液中，磁力攪拌使其全部溶解，將溶液迅速注射到置于50℃恒溫水浴的10mL濃度1.5mg·mL-1紅花黃色素溶液中，攪拌至乙醇揮盡，過(guò)0.45μm的微孔濾膜過(guò)慮，得紅花黃色素囊泡樣品溶液。

2.2 影響因素考察

2.2.1 吐溫80和膽固醇的比例的影響

分別稱取質(zhì)量比為3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1的吐溫和膽固醇溶于無(wú)水乙醇中，按2.1項(xiàng)下操作制備囊泡。

2.2.2 水浴溫度的影響

稱取質(zhì)量比為5:1的吐溫和膽固醇溶于無(wú)水乙醇中，按照2.1項(xiàng)下操作，水浴溫度分別為40℃，45℃，50℃，55℃，60℃，制備囊泡。

2.2.3 藥物溶度的影響

稱取質(zhì)量比為5:1的吐溫和膽固醇溶于無(wú)水乙醇中，按照2.1項(xiàng)下操作，紅花黃色素濃度分別為1.0mg·mL-1，1.5mg·mL-1，2.0mg·mL-1，2.5mg·mL-1，3mg·mL-1，制備囊泡。

2.3 穩(wěn)定性考察

將制備好的非離子表面活性劑紅花黃色素囊泡密封，分別在室溫25℃，低溫4℃下避光保存，在第0，15，30天測(cè)定其包封率。

包封率測(cè)定，取囊泡溶液于容器中，加入甲醇溶液，超聲破乳，使藥物釋放。對(duì)破乳后溶液進(jìn)行離心。取上清液，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定吸收度。另取一份囊泡溶液直接離心，稀釋至相同倍數(shù)，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定吸收度。

包封率E%=(A×B)/A×100%(A總藥物量，B未包裹藥物量)

4 結(jié)果與討論

4.1 吐溫-80和膽固醇的比例

對(duì)于雙分子層膜結(jié)構(gòu)的流動(dòng)性，膜的剛性太強(qiáng)時(shí)，流動(dòng)性會(huì)降低，不論流動(dòng)性過(guò)高還是過(guò)低，都不利于囊泡的形成，包封率會(huì)隨著膽固醇含量的減少升高后降低。膽固醇可以適當(dāng)降低膜的流動(dòng)性，但含量過(guò)高又會(huì)使膜的剛性變強(qiáng)。只有在一個(gè)合適的比例時(shí)才能形成穩(wěn)定的囊泡，故吐溫-80與膽固醇的比例為6:1時(shí)是最佳比例。結(jié)果見(jiàn)表1。

4.2 水浴溫度

溫度的變化會(huì)影響囊泡的形成，水合溫度要保持高于表面活性劑的相變溫度，溫度過(guò)低時(shí)不利于囊泡的形成，而溫度過(guò)高時(shí)，會(huì)影響藥物的穩(wěn)定性，包封率隨著水浴溫度的增加逐漸升高，最后趨于持平，故最佳的水浴溫度為50℃。結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 吐溫-80和膽固醇比例的影響

4.3 藥物濃度的影響

制備囊泡的包封容量是有限的，溶度越低時(shí)越易包容，包封率隨著藥物濃度的升高而逐漸降低，考慮到1.0和1.5時(shí)包封率差別不大，故最佳的藥物濃度選為1.5mg·mL-1。結(jié)果見(jiàn)表3。

4.4 穩(wěn)定性考察

按照最佳工藝制備紅花黃色素囊泡，密封，分別在室溫25℃，低溫4℃避光保存，分別測(cè)定包封率。室溫下放置囊泡的包封率明顯下降，而在低溫4℃下保存，包封率變化較小，比較穩(wěn)定，故囊泡的最佳保存溫度為4℃。結(jié)果見(jiàn)表4。

5 結(jié)語(yǔ)

本文利用單因素考察紅花黃色素囊泡[3-5]制備的最佳工藝，選定的最佳工藝制備為吐溫-80和膽固醇比例為6:1，水浴溫度50℃，藥液濃度為1.5mg·mL-1。該方法簡(jiǎn)單可行，制備的囊泡包封率較高，穩(wěn)定性好，有一定的應(yīng)用價(jià)值，囊泡可以作為一種能夠提高紅花黃色素有效性的優(yōu)良載體。

表2 水浴溫度的影響

表3 藥物濃度的影響

表4 穩(wěn)定性考察(n=6)