吳歡歡，張運(yùn)海，陳 文，王 蕭，劉欣苑，譚 剛，張 建，師文竹，吳 雷，譚德清

(武漢中科瑞華生態(tài)科技股份有限公司，武漢 430080)

前鰭高原鰍(Triplophysaanterodorsalis)隸屬鯉形目(Cypriniformes)條鰍科(Nemacheilidae)高原鰍屬(Triplophysa)，模式產(chǎn)地為四川省會(huì)東縣金沙江支流鲹魚河[1]。由于其生活水域窄，再加上過(guò)度捕撈、環(huán)境污染以及梯級(jí)電站的規(guī)劃等因素的影響，前鰭高原鰍野生資源量急劇下降。通過(guò)人工繁殖技術(shù)獲得苗種進(jìn)行增殖放流，是當(dāng)前修復(fù)魚類野生資源較為有效的方法[2]。目前尚無(wú)關(guān)于前鰭高原鰍的相關(guān)研究報(bào)道。溫度作為重要的環(huán)境因子之一，影響著魚類的生長(zhǎng)發(fā)育與生理機(jī)能[3]。前鰭高原鰍屬于冷水性魚類，水溫對(duì)其苗種生長(zhǎng)存活起著決定性的影響。本試驗(yàn)研究不同溫度對(duì)前鰭高原鰍幼魚生長(zhǎng)和存活的影響，以期進(jìn)一步探討前鰭高原鰍人工苗種培育的適宜溫度條件，為其資源增殖提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

前鰭高原鰍苗種為2018年從會(huì)東縣鲹魚河采購(gòu)的野生親本，經(jīng)人工馴養(yǎng)至性腺成熟后，于12月開展人工催產(chǎn)試驗(yàn)得到的當(dāng)年苗種。試驗(yàn)用魚為人工繁殖培育的30日齡幼魚。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

設(shè)置8、13、18、23、28 ℃五個(gè)溫度梯度組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾幼魚。試驗(yàn)在15個(gè)直徑1 m的圓形缸中進(jìn)行，半流水養(yǎng)殖，并保持進(jìn)水量和流速一致。試驗(yàn)期間，每天投喂3次，分別在8:00、14:00、20:00。投喂量為大多數(shù)實(shí)驗(yàn)魚不搶食為止，試驗(yàn)為期30天。其中，每10天記錄每個(gè)缸中成活尾數(shù)，每隔5天各實(shí)驗(yàn)缸隨機(jī)選取15尾幼魚，測(cè)量體長(zhǎng)、體重。體長(zhǎng)精確到0.01 mm，體重精確到0.000 1 g。

1.3 數(shù)據(jù)計(jì)算及處理

采用Microsoft Excel 2013和SPSS 19.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，利用單因素方差分析和Ducan多重比較來(lái)檢驗(yàn)各組之間的顯著性水平；采用OriginPro 9進(jìn)行繪圖。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)一采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

特定生長(zhǎng)率、日增重率、體重增重率和體長(zhǎng)增長(zhǎng)率計(jì)算公式為：

特定生長(zhǎng)率(SGR)=(lnW2-lnW1)/(t2-t1)×100%

日增重(DWG)=(W2-W1)/(t2-t1)

式中：W2、W1分別為終末和初始魚體濕重(g)；t2、t1分別為終末、初始時(shí)間；L2、L1分別為終末和初始魚體體長(zhǎng)(mm)。

2 結(jié)果

2.1 水溫對(duì)前鰭高原鰍存活率的影響

結(jié)果如圖1所示，水溫為8、13和18 ℃時(shí)，實(shí)驗(yàn)魚攝食積極，實(shí)驗(yàn)期間存活率基本保持穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后累積存活率分別為(98.89±1.92)%、100%和(95.56±5.09)%，各組之間累積存活率差異不顯著(P>0.05)；水溫為23和28 ℃時(shí)，存活率均在實(shí)驗(yàn)的第20天開始迅速下降，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，累積存活率分別降至(84.44±8.39)%和(68.89±11.7)%，顯著低于前三組，表明水溫對(duì)前鰭高原鰍幼魚的存活具有顯著影響，溫度過(guò)高會(huì)致使魚苗死亡。

圖1 不同溫度對(duì)前鰭高原鰍幼魚存活率的影響

利用二次方程回歸擬合的溫度和存活率的關(guān)系為：y=-0.16x2+3.893x+75.786，R2=0.964 2(圖2)，計(jì)算得到的最適生存溫度為12.17 ℃。

圖2 水溫與前鰭高原鰍幼魚存活率關(guān)系

2.2 水溫對(duì)前鰭高原鰍體重、體長(zhǎng)生長(zhǎng)的影響

實(shí)驗(yàn)測(cè)定了8～28 ℃之間前鰭高原鰍幼魚的生長(zhǎng)情況，采用指數(shù)函數(shù)L=a·eb·d對(duì)各溫度組的日齡與體長(zhǎng)、體重分別進(jìn)行擬合(圖3)。從曲線的變化可知，當(dāng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到第10天以后，各溫度組的體長(zhǎng)、體重差異開始逐漸增大。

圖3 不同溫度下前鰭高原鰍幼魚體長(zhǎng)(a)、體重(b)的生長(zhǎng)曲線

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)60日齡的最終生長(zhǎng)指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)(表1)。結(jié)果顯示，當(dāng)水溫在8～18 ℃時(shí)，隨著水溫的升高，終末體長(zhǎng)、體重逐漸增大；當(dāng)水溫到達(dá)18 ℃時(shí)，終末體長(zhǎng)為(20.86±0.53)mm，終末體重為(0.186 9±0.005 5)g；然后隨著水溫的升高，終末體長(zhǎng)、體重逐漸減小，當(dāng)水溫到達(dá)28 ℃時(shí)，終末體長(zhǎng)為(16.65±0.94)mm，終末體重為(0.157 6±0.011 2)g。綜上所述，結(jié)果認(rèn)為適宜的水溫可以促進(jìn)前鰭高原鰍的生長(zhǎng)。

表1 前鰭高原鰍在不同養(yǎng)殖溫度下的生長(zhǎng)指標(biāo)

2.3 前鰭高原鰍最適生長(zhǎng)水溫的研究

采用二次方程(y=ax2+bx+c)對(duì)表1中DWG、BWGR、BLGR和SGR進(jìn)行不同溫度下的擬合(圖4)，所計(jì)算最適生長(zhǎng)水溫分別為16.47 ℃、16.30 ℃、17.32 ℃和16.20 ℃，平均為(16.57±0.51)℃。

圖4 前鰭高原鰍幼魚BLGR(a)、BWGR(b)、SGR(c)和DWG(d)隨溫度變化曲線

3 討論

3.1 養(yǎng)殖水溫對(duì)前鰭高原鰍幼魚生長(zhǎng)和存活的影響

魚類生長(zhǎng)和存活與水環(huán)境因子密切相關(guān)[4]。尤其是幼魚階段，因?yàn)榇穗A段幼魚的內(nèi)臟器官還未完全發(fā)育完善，對(duì)環(huán)境因子的變化非常敏感[5-7]。而水溫作為苗種培育過(guò)程中最為關(guān)鍵的因子，主要是通過(guò)改變幼魚消化酶和代謝酶的活性來(lái)影響幼魚對(duì)餌料的消化率，從而間接調(diào)節(jié)幼魚機(jī)體能量收支平衡，最終影響其生長(zhǎng)和存活[8,9]。在本實(shí)驗(yàn)的溫度設(shè)定中，隨著溫度的升高，8、13、18 ℃組之間的累積存活率均可達(dá)到95%以上；而23、28 ℃兩組在實(shí)驗(yàn)期間存活率持續(xù)下降，最終累積存活率已經(jīng)降至(84.44±8.39)%和(68.89±11.7)%，相較于前三組(8、13、18 ℃)顯著下降(P<0.05)。研究結(jié)果與李勇等關(guān)于大菱鲆幼魚[10]、白海文關(guān)于施氏鱘幼魚[11]和李大鵬等關(guān)于異齒裂腹魚幼魚[12]的研究結(jié)論是一致的，在實(shí)驗(yàn)設(shè)定的溫度范圍內(nèi)，低溫組保持較高累積存活率，溫度超過(guò)一定閾值后開始逐漸下降。但是薛美巖等關(guān)于綠鰭?cǎi)R面鲀幼魚[13]、張進(jìn)軍關(guān)于虹鱒幼苗[9]等的研究結(jié)果認(rèn)為隨著水溫的升高，累積存活率呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)。前鰭高原鰍屬于低溫性魚類，因此猜測(cè)其可能具備耐低溫的能力，而實(shí)驗(yàn)設(shè)置最低溫度(8 ℃)沒有達(dá)到實(shí)驗(yàn)魚低溫極限。因此，對(duì)前鰭高原鰍幼魚在低溫環(huán)境下的存活狀況仍需進(jìn)一步的研究。

在生長(zhǎng)方面，我國(guó)學(xué)者蔡瑞鈺等[3]為了探究云南盤鮈仔稚魚培育的最適溫度，在14～26 ℃之間設(shè)置5個(gè)溫度梯度，結(jié)果顯示當(dāng)水溫在14～20 ℃之間時(shí)，實(shí)驗(yàn)魚的生長(zhǎng)率隨溫度升高而增加，當(dāng)水溫超過(guò)20 ℃時(shí)，實(shí)驗(yàn)魚的生長(zhǎng)速率開始逐漸下降。史晉絨等[14]對(duì)在皇冠沙鰍幼魚的生長(zhǎng)研究結(jié)果表明，皇冠沙鰍幼魚在28 ℃時(shí)特定生長(zhǎng)率達(dá)到最大值(0.33±0.12)%/d，低于或高于28 ℃的實(shí)驗(yàn)組特定生長(zhǎng)率均有所下降。本實(shí)驗(yàn)與上面結(jié)論是一致的，水溫在8～18 ℃之間，前鰭高原鰍幼魚的終末體重和終末體長(zhǎng)均隨溫度升高而增大；在18～28 ℃之間，終末體重和終末體長(zhǎng)均隨溫度升高而減小。有學(xué)者利用此研究結(jié)論在幼鯢越冬時(shí)，通過(guò)提高養(yǎng)殖水溫，成功加快了幼魚的生長(zhǎng)，縮短了生長(zhǎng)周期[15]。

3.2 前鰭高原鰍幼魚人工培育適宜水溫分析

魚類的最適溫度并非是一個(gè)絕對(duì)的溫度值，其他的因子會(huì)與溫度進(jìn)行交互，共同影響著魚類的生長(zhǎng)與存活[16]。因此，當(dāng)魚類所處的環(huán)境出現(xiàn)變動(dòng)，其最適溫度點(diǎn)也會(huì)出現(xiàn)波動(dòng)[17]。有學(xué)者為了更加準(zhǔn)確地描述最適溫度提出了“最適溫度平臺(tái)(Optimum temperature platform)”這一概念，認(rèn)為魚類最適溫度應(yīng)由多種因子共同決定[18]。選擇哪些指標(biāo)來(lái)共同衡量最適溫度范圍也有一定的差異[12]。牟振波等[16]通過(guò)二次方程擬合了特定生長(zhǎng)率、最大攝食率和最大食物轉(zhuǎn)化率這3個(gè)指標(biāo)與水溫的關(guān)系，利用擬合方程求得三者的“最適溫度”來(lái)確定實(shí)驗(yàn)魚的最適溫度范圍。本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)魚為人工催產(chǎn)野生親本的子一代魚種，由于人工養(yǎng)殖環(huán)境與野生環(huán)境下水溫相差較大，幼魚存在緩慢持續(xù)性死亡現(xiàn)象。而水溫作為魚類生長(zhǎng)和存活的關(guān)鍵因子，所以本實(shí)驗(yàn)采用了存活和生長(zhǎng)兩個(gè)指標(biāo)來(lái)衡量最適溫度范圍。根據(jù)溫度和累積存活率的數(shù)據(jù)，利用二次方程回歸擬合了兩者的關(guān)系(y=-0.16x2+3.893x+75.786，R2=0.964 2)，獲得的最適存溫度為12.17 ℃；通過(guò)對(duì)日增重、體長(zhǎng)增長(zhǎng)率、體重增重率和特定生長(zhǎng)率等4個(gè)生長(zhǎng)指標(biāo)與水溫進(jìn)行二次方程擬合，獲得的最快生長(zhǎng)水溫為(16.57±0.51)℃，與最高生存水溫相差近4 ℃。楊發(fā)群等[19]通過(guò)黃顙的攝食率研究結(jié)果表明，當(dāng)魚類餌料充足，魚類的生長(zhǎng)與攝食量正相關(guān)，即使水溫超過(guò)魚類最適生長(zhǎng)水溫，魚類仍然會(huì)繼續(xù)加大攝食量，加快生長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)前鰭高原鰍幼魚存活率主要取決于其對(duì)水溫的耐受水平，這與遺傳水平和外在環(huán)境因素息息相關(guān)。前鰭高原鰍模式產(chǎn)地在四川會(huì)東縣鲹魚河，實(shí)驗(yàn)人員在18年7月夏季采集野生親魚時(shí)水溫不超過(guò)8 ℃，而人工繁殖時(shí)間是在冬季11月-12月，所以推測(cè)野生前鰭高原鰍仔魚是在水溫低于8 ℃時(shí)生長(zhǎng)的。因此，前鰭高原鰍不具備耐高溫的能力。綜上所述，為保證生長(zhǎng)速率的同時(shí)還能有較高的存活率，培育前鰭高原鰍幼魚較適宜的水溫范圍為12.17～16.57 ℃。