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        赤峰市漢族和蒙古族孕期女性MTHFR與MTRR的基因多態(tài)性分布研究

        2020-09-24 12:03:50蘇亞力李耀輝烏蘭托婭江玉華崔貴虎華永娟胡季芳魯衍強(qiáng)
        生命科學(xué)研究 2020年4期
        關(guān)鍵詞:赤峰市蒙古族漢族

        蘇亞力,李耀輝,烏蘭托婭,江玉華,崔貴虎,王 改,華永娟,胡季芳,魯衍強(qiáng)*

        (1.赤峰市婦產(chǎn)醫(yī)院,中國(guó)內(nèi)蒙古赤峰024005;2.上海張江普匯轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究院,中國(guó)上海201314)

        葉酸是人體重要的營(yíng)養(yǎng)素,葉酸攝入不足或代謝障礙會(huì)造成體內(nèi)同型半胱氨酸升高和甲基化降低。孕期葉酸營(yíng)養(yǎng)不足會(huì)導(dǎo)致胎兒神經(jīng)管畸形[1]、先天性心臟病[2]、唐氏綜合征[3]、唇腭裂[4]等出生缺陷,并與流產(chǎn)[5]、早產(chǎn)[6]等不良妊娠結(jié)局以及妊娠期糖尿病[7]、妊娠期高血壓[8]等疾病密切相關(guān)。5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)和甲硫氨酸合成酶還原酶(methionine synthase reductase,MTRR)是葉酸代謝通路中的關(guān)鍵酶,基因多態(tài)性決定了不同的酶活性以及葉酸利用能力。本研究針對(duì)赤峰市漢族和蒙古族孕期女性開展分子流行病學(xué)調(diào)查,研究MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G的基因多態(tài)性分布,并獲取本地區(qū)的群體遺傳學(xué)特征。

        1 資料與方法

        1.1 研究對(duì)象

        選取2019年4月至9月到赤峰市婦產(chǎn)醫(yī)院進(jìn)行孕期檢查的健康女性,依據(jù)知情同意原則采集口腔黏膜細(xì)胞。入組對(duì)象共853人,其中漢族647人、蒙古族206人。

        1.2 檢測(cè)方法

        利用硅膠吸附法提取口腔黏膜細(xì)胞樣本的基因組DNA。采用熒光定量PCR技術(shù),檢測(cè)MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G的基因多態(tài)性。DNA抽提試劑盒、熒光定量PCR儀等相關(guān)試劑、儀器均購(gòu)自美國(guó)ABI公司。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

        采用Haploview 4.2軟件進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNP)的 Hardy-Weinberg平衡、連鎖不平衡(linkage disequilibrium,LD)分析。采用SPSS 19.0軟件分析基因型頻率和等位基因頻率,兩組間數(shù)據(jù)的比較采用卡方檢驗(yàn),P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 Hardy-Weinberg平衡分析

        入組對(duì)象MTHFR C677T、A1298C和 MTRR A66G的基因多態(tài)性分布見表1。漢族和蒙古族孕期女性的葉酸代謝相關(guān)基因位點(diǎn)分布均符合遺傳平衡(P>0.05),說(shuō)明樣本數(shù)據(jù)符合孟德爾定律,樣本具有群體代表性。

        2.2 基因型頻率分析

        入組對(duì)象MTHFR C677T、A1298C和 MTRR A66G的基因型頻率分布見表2。漢族和蒙古族女性MTHFR C677T、MTRR A66G的基因型頻率具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),MTHFR A1298C的基因型頻率無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

        2.3 等位基因頻率分析

        入組對(duì)象MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G的等位基因頻率分布見表3。漢族和蒙古族女性MTHFR C677T、MTRR A66G的等位基因頻率具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),MTHFR A1298C 的等位基因頻率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

        表1 Hardy-Weinberg平衡分析Table 1 Hardy-Weinberg equilibrium analysis

        表2 漢族、蒙古族女性MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G的基因型頻率Table 2 MTHFR C677T,A1298C and MTRR A66G genotype frequencies of Han and Mongolian women n(percentage,%)

        表3 漢族、蒙古族女性MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G的等位基因頻率Table 3 MTHFR C677T,A1298C and MTRR A66G allele frequencies of Han and Mongolian women n(percentage,%)

        2.4 MTHFR C677T和A1298C的連鎖及單倍型分析

        MTHFR C677T和A1298C兩位點(diǎn)的連鎖情況見表4、表5。它們?cè)跐h族和蒙古族女性都有6種組合,其中,頻率最高的均為CT/AA,之后依次均為 TT/AA、CT/AC、CC/AA、CC/AC、CC/CC,均沒有CT/CC、TT/AC和TT/CC組合。

        表4 漢族女性MTHFR C677T和A1298C的連鎖型分布Table 4 MTHFR C677T and A1298C linkage type distribution in Han women n(percentage,%)

        表5 蒙古族女性MTHFR C677T和A1298C的連鎖型分布Table 5 MTHFR C677T and A1298C linkage type distribution in Mongolian women n(percentage,%)

        漢族、蒙古族女性MTHFR C677T和A1298C兩個(gè)位點(diǎn)構(gòu)建的單倍型均存在3種組合:TA、CA、CC,兩位點(diǎn)間存在完全連鎖不平衡(表6)。

        3 討論

        MTHFR和MTRR的基因多態(tài)性分布具有地域和民族差異[9]。近年來(lái)該領(lǐng)域的報(bào)道大多為漢族人群,鮮有蒙古族人群的調(diào)查研究。根據(jù)2010年第六次全國(guó)人口普查數(shù)據(jù),我國(guó)蒙古族人口約650萬(wàn),其中423萬(wàn)分布在內(nèi)蒙古自治區(qū)。內(nèi)蒙古自治區(qū)常住人口中,漢族占79.5%,蒙古族占17.1%且分布于各盟市。本研究調(diào)查了赤峰市漢族及蒙古族MTHFR和MTRR的基因多態(tài)性分布。調(diào)查顯示赤峰市蒙古族女性MTHFR C677T位點(diǎn)TT基因型頻率為25.24%,T等位基因頻率為50.73%,低于漢族女性的 31.99%和 58.19%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這與裴麗君等[10]報(bào)道的包頭市蒙古族和漢族人群的比較結(jié)果類似。此外,赤峰市蒙古族女性MTRR A66G位點(diǎn)GG基因型頻率為8.74%,G等位基因頻率為29.13%,高于漢族女性的4.95%和23.26%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        表6 漢族、蒙古族女性MTHFR C677T和A1298C的單倍型分布頻率Table 6 Distribution frequency of haplotypes of MTHFR C677T and A1298C in Han and Mongolian women

        本研究的檢測(cè)結(jié)果顯示,赤峰市漢族女性MTHFR C677T位點(diǎn)TT的基因型頻率為31.99%,T等位基因頻率為58.19%,高于已有報(bào)道的新疆阿克蘇(21.9%,47.1%)[11]、湖北宜都市(12.2%,36.8%)[12]、廣東佛山市(5.6%,21.5%)[13]等地,低于山東淄博市(43.6%,65.6%)[14]、河南新鄉(xiāng)市(38.9%,62.0%)[15]、河北廊坊市(37.8%,60.9%)[16]等地。

        總的來(lái)講,通過(guò)調(diào)查各地區(qū)漢族及少數(shù)民族葉酸代謝關(guān)鍵酶的基因多態(tài)性分布,可以為基于群體遺傳特征的出生缺陷病因?qū)W研究和臨床干預(yù)研究提供依據(jù)。從全國(guó)范圍內(nèi)來(lái)看,赤峰市漢族及蒙古族女性葉酸代謝關(guān)鍵酶基因位點(diǎn)的風(fēng)險(xiǎn)型MTHFR 677TT占比較高,尤其是漢族女性,葉酸利用能力偏低,這提示對(duì)育齡婦女進(jìn)行葉酸代謝障礙相關(guān)基因位點(diǎn)篩查,識(shí)別葉酸利用能力低下的人群,有助于指導(dǎo)相關(guān)人群科學(xué)增補(bǔ)葉酸營(yíng)養(yǎng),從而實(shí)現(xiàn)個(gè)性化保健。

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