譚華偉

胃癌是消化系統(tǒng)中最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病機(jī)制尚不明確。研究表明，胃癌的發(fā)生和發(fā)展與癌前發(fā)生的病變密切相關(guān)[1]。胃癌術(shù)前CT檢查為可對(duì)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況進(jìn)行分期，但是判斷標(biāo)準(zhǔn)及準(zhǔn)確性仍有爭(zhēng)議，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的判斷標(biāo)準(zhǔn)目前尚未統(tǒng)一[2]。研究表明[3]，胃癌的發(fā)生和發(fā)展是1個(gè)多階段、多步驟的過程，涉及多種原癌基因的激活，腫瘤抑制基因的缺失或分子生物學(xué)發(fā)生異常。關(guān)于胃癌中內(nèi)皮抑素抑癌基因endostatin的研究很少，胃癌的新生血管形成是其發(fā)展和侵襲的重要基礎(chǔ)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖中與腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移中起重要作用[4-5]。本研究以胃癌患者為研究對(duì)象，觀察胃癌患者的CT征象、癌組織和癌旁組織及抑癌基因陽性表達(dá)的差異，分析影響胃癌患者癌組織VEGF及endostatin表達(dá)的因素。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年2月至2018年8月在我院接受治療的胃癌患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18周歲；②病理檢查確診為胃癌者；③無其他原發(fā)性腫瘤疾病者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不全者；②不愿參與本項(xiàng)研究者。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)共納入病例數(shù)100例，其中男性65例，女性35例，年齡48～70歲，平均(59.35±4.11)歲。臨床分期：Ⅱ期40例，Ⅲ期35例，Ⅳ期25例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例。本項(xiàng)研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)評(píng)審?fù)ㄟ^。

1.2 研究方法

采用GEPropeedAi，螺旋CT機(jī)。受試者禁食超過8小時(shí)。試驗(yàn)前，向肌肉注入20 mg山莨菪堿，在檢查床前取500 ml水，選擇最佳位置。從前靜脈壓注射器給予100 ml碘伏，注射速度分別為3 ml/s。在注射開始后25 s，65 s和2～3 min收集圖像。局部胃壁組織超過5 mm，伴隨著多層結(jié)構(gòu)的消失或異常增強(qiáng)，作為診斷胃癌的基礎(chǔ)。淋巴結(jié)直徑<10 mm時(shí)可觀察到顯著增強(qiáng)；或淋巴結(jié)直徑> 9 mm，CT值> 100 HU，短軸與長(zhǎng)軸比>0.7，確診為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[6]。通過CT鑒別患者的病理特征。胃癌所在層面在常規(guī)連續(xù)觀察后，確定最大病變累及范圍的層面，測(cè)量腫瘤的長(zhǎng)徑。

進(jìn)行常規(guī)HE染色和免疫組織化學(xué)檢測(cè)VEGF、endostatin：VEGF試劑盒購自北京中賓金橋生物科技有限公司，endostatin多克隆抗體購自美國santa cruz生物技術(shù)公司，都由同一病理醫(yī)師進(jìn)行，標(biāo)準(zhǔn)化嚴(yán)格控制。VEGF、endostatin陽性率的評(píng)價(jià)方法：用細(xì)胞質(zhì)染成棕色顆粒正，隨機(jī)選擇10個(gè)倍視野，計(jì)算陽性細(xì)胞的百分比并取其，陽性細(xì)胞數(shù)≥25%為陽性，陰性為<25%[7]。

將單因素分析有意義的因素作為因變量，將胃癌患者血管生成相關(guān)因子及抑癌基因陽性表達(dá)作為自變量進(jìn)行回歸分析，分析影響胃癌患者血管生成相關(guān)因子及抑癌基因陽性表達(dá)的因素。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

觀察胃癌患者的CT征象、癌組織和癌旁組織血管生成相關(guān)因子及抑癌基因陽性表達(dá)的差異，分析影響胃癌患者癌組織血管生成相關(guān)因子及抑癌基因表達(dá)的因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用Excel錄入后，應(yīng)用SPSS 11.5軟件分析。計(jì)數(shù)和計(jì)量資料分別采用例和均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)、卡方檢驗(yàn)和回歸分析法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 胃癌患者CT征象觀察

胃癌患者經(jīng)CT檢查效果良好，通過CT可明顯鑒別患者的病理特征：T3期患者病灶漿膜面光整，周圍脂肪間隙清晰；T4期患者病灶漿膜面毛躁，局部外突表現(xiàn)，周圍脂肪間隙密度增高，部分條索狀改變。

2.2 癌組織和癌旁組織血管生成相關(guān)因子及抑癌基因陽性表達(dá)的比較

癌組織中VEGF陽性率為85%，高于癌旁組織的12%，endostatin陽性率為10%，低于癌旁組織的95%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=106.676、144.862，P<0.001)。

2.3 不同特征胃癌患者血管生成相關(guān)因子及抑癌基因陽性表達(dá)的比較

由表1顯示，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期為Ⅳ、腫瘤直徑≥5 cm、CT最大徑線≥55 mm的胃癌患者VEGF陽性率較高，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑≥5 cm、CT最大徑線≥55 mm的胃癌患者endostatin陽性率較低。

表1 不同特征胃癌患者血管生成相關(guān)因子及抑癌基因陽性表達(dá)的比較/例

2.4 影響胃癌患者血管生成相關(guān)因子及抑癌基因陽性表達(dá)的因素分析

將單因素分析有意義的因素作為因變量，將胃癌患者血管生成相關(guān)因子及抑癌基因陽性表達(dá)作為自變量進(jìn)行回歸分析，結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、CT最大徑線是影響胃癌患者血管生成相關(guān)因子及抑癌基因陽性表達(dá)的因素。見表2。

表2 影響胃癌患者血管生成相關(guān)因子及抑癌基因陽性表達(dá)的因素分析

3 討論

胃癌的CT檢查已在臨床實(shí)踐中廣泛使用，并且CT增強(qiáng)特征被普遍認(rèn)可。

用于局部胃壁增厚超過5 mm，同時(shí)消除了正常胃壁的多層結(jié)構(gòu)的消失或顯著的異常增強(qiáng)是胃癌的CT診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]。本文主要關(guān)注CT強(qiáng)血管生成與胃癌血管生成，VEGF在腫瘤中新血管的形成起促進(jìn)作用。研究表明[9]，endostatin及其類似物可抑制內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移，顯著縮小和抑制體內(nèi)原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移瘤的生長(zhǎng)，并下調(diào)腫瘤細(xì)胞和蛋白質(zhì)的表達(dá)。最近幾年，關(guān)于胃癌血管生成因子的報(bào)道很多，其與胃癌的分期，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)，血管生成抑制因子的報(bào)道很少見。endostatin在小鼠和人神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的蛋白質(zhì)表達(dá)，在不同細(xì)胞類型的腫瘤中顯示不同的表達(dá)水平[10-11]。本次研究了胃癌患者癌組織VEGF及endostatin表達(dá)的表達(dá)情況及其影響因素，并探討了其臨床價(jià)值。

良好的CT圖像可以準(zhǔn)確預(yù)先分期胃癌，這可以為胃癌術(shù)前手術(shù)切除提供更準(zhǔn)確的評(píng)估，也可以為胃癌患者選擇最佳治療提供可靠的指導(dǎo)。避免盲目手術(shù)探查[12]。

本研究結(jié)果顯示：胃癌患者經(jīng)CT檢查效果良好，TN分期較顯著。癌組織中VEGF陽性率高于癌旁組織，endostatin陽性率低于癌旁組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明具有較高染色強(qiáng)度的癌細(xì)胞大多位于浸潤前部和局部壞死組織周圍，一些血管內(nèi)皮細(xì)胞顯示弱陽性染色，表明該表達(dá)與血管生成位點(diǎn)一致。endostatin陽性物質(zhì)可出現(xiàn)在腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和浸潤淋巴樣細(xì)胞中[13]。因此，在細(xì)胞質(zhì)中，被抗體染色的細(xì)胞不一定產(chǎn)生endostatin，endostatin蛋白可能來自血液循環(huán)，然后再與這些細(xì)胞結(jié)合。有研究發(fā)現(xiàn)[14]組織壞死的某些區(qū)域有強(qiáng)烈的陽性染色，在一些間質(zhì)中也發(fā)現(xiàn)陽性染色，這與我們結(jié)果一致。表明在腫瘤局部組織中存在有血管生成的調(diào)節(jié)機(jī)制。

本研究表明：有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期為Ⅳ、腫瘤直徑≥5 cm、CT最大徑線≥55 mm的胃癌患者VEGF陽性率較高，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑≥5 cm、CT最大徑線≥55 mm的胃癌患者endostatin陽性率較低。胃癌組織endostatin表達(dá)下調(diào)與胃癌病理分期及轉(zhuǎn)移有關(guān)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)胃癌旁組織endostatin顯著高于胃癌組織，而臨床分期為Ⅳ、腫瘤直徑≥5 cm、CT最大徑線≥55 mm的胃癌患者endostatin的陽性率低，提示基因及其編碼的endostatin蛋白在胃癌發(fā)生及演進(jìn)過程中具有重要作用，這與徐步遠(yuǎn)等得到的結(jié)果一致[15]。同時(shí)實(shí)驗(yàn)顯示胃癌組織基因編碼蛋白表達(dá)情況與胃癌淋巴道轉(zhuǎn)移和局部的脈管浸潤密切相關(guān)。在胃癌患者中，伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移endostatin蛋白陽性率較低，提示endostatin的失活或降低表達(dá)可能促進(jìn)胃癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，推測(cè)其與胃癌的發(fā)生轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。腫瘤抑制基因的突變和或缺失可通過上調(diào)VEGF和下調(diào)endostatin表達(dá)而引起胃癌的局部血管刺激因子和抑制因子的減少從而促進(jìn)腫瘤血管生成，表明腫瘤血管生成受腫瘤細(xì)胞基因水平的調(diào)節(jié)。

CT的術(shù)前判斷具有重要的臨床價(jià)值，CT圖像能準(zhǔn)確反映胃壁增厚程度，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和器官轉(zhuǎn)移情況，為臨床評(píng)估患者病情提供參考依據(jù)。CT增強(qiáng)值與VEGF表達(dá)陽性率和endostatin表達(dá)密切相關(guān)。檢測(cè)VEGF和endostatin對(duì)判斷患者預(yù)后有重要價(jià)值，為臨床治療提供了重要依據(jù)。

將有意義的因素作為因變量，將胃癌患者VEGF及endostatin陽性表達(dá)作為自變量進(jìn)行回歸分析，結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、CT最大徑線是影響胃癌患者VEGF及endostatin陽性表達(dá)的因素。因此我們認(rèn)為聯(lián)合檢測(cè)胃癌組織中VEGF、endostatin的表達(dá)狀況，有助于明確胃癌的生物學(xué)行為，可作為預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后的指標(biāo)。

本研究雖然取得了理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，但也存在不足之處，本研究納入病例數(shù)較少，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能存在一定程度的偏倚，在接下來的研究中需要更大的樣本數(shù)來支持。

綜上所述，胃癌患者癌組織血管生成相關(guān)因子陽性表達(dá)率較高，抑癌基因陽性表達(dá)率較低，且與患者CT最大徑線和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。