張茂明 顧 鑫 楊曉賀 姚亮亮 高雪冬 劉 偉 趙海紅 丁俊杰

（黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院佳木斯分院/佳木斯國家大豆產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系試驗(yàn)站，佳木斯 154007）

大豆灰斑病又稱蛙眼病，是一種由Cercospora sojinaHara 引起的世界性病害，也是中國東北春大豆主產(chǎn)區(qū)的重要病害，尤以黑龍江省危害嚴(yán)重[1]。該病能夠危害葉、莖、籽粒等大豆植株所有地上組織，在黑龍江省主要表現(xiàn)是危害葉片，在葉片上形成大量圓形病斑，發(fā)病嚴(yán)重時(shí)幾乎所有葉片長滿病斑，造成葉片過早脫落，受害豆田減產(chǎn)20%～30%，同時(shí)籽粒斑影響籽粒外觀，降低商品大豆品質(zhì)[2]。目前應(yīng)用抗病品種是最經(jīng)濟(jì)、有效的大豆灰斑病的防控方法[3]。通過大豆灰斑病人工接種和鑒定，明確黑龍江大豆新品系對(duì)大豆灰斑病的抗、感性，可為大豆品種審定提供大豆新品系在抗灰斑病方面的科學(xué)依據(jù)，對(duì)大豆新品種的審定和推廣具有重要的意義。同時(shí)為各育種單位了解大豆品系抗性，進(jìn)而及時(shí)調(diào)整育種方向提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試大豆材料黑龍江省大豆育種單位近幾年配制的雜交組合，共1305 個(gè)品系，分別由黑龍江省種子管理局、黑龍江省北大荒農(nóng)墾集團(tuán)、黑龍江省大豆育種聯(lián)合體提供。其中黑龍江省種子管理局提供的大豆材料分為傳統(tǒng)育種單位大豆和特用豆。

1.2 試驗(yàn)方法試驗(yàn)在黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院佳木斯分院大豆灰斑病病圃進(jìn)行。將供試材料在田間順序排列，每份材料播一個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積2.8m2，壟長4m，壟距70cm，人工單粒點(diǎn)播，株距5cm，1 次重復(fù)，5 月5 日播種，早熟品種9 月30 日收獲，晚熟品種10 月10 日收獲?？共?duì)照品種墾豐16 號(hào)，感病對(duì)照品種綏農(nóng)10 號(hào)。

1.3 供試菌種鑒定用灰斑病菌菌株由黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院佳木斯分院病理研究所提供。黑龍江省出現(xiàn)頻率較高的10 個(gè)生理小種，即15 號(hào)生理小種（出現(xiàn)頻率36%）；1 號(hào)生理小種（出現(xiàn)頻率20%）；7 號(hào)生理小種（出現(xiàn)頻率15%）；10 號(hào)生理小種（出現(xiàn)頻率9%）；2、3、4、5、11、12 號(hào)生理小種出現(xiàn)頻率各為3.3%。這些生理小種出現(xiàn)頻率為黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院佳木斯分院病理研究所每年監(jiān)測(cè)計(jì)算得到[4]。將10 個(gè)生理小種按出現(xiàn)頻率的比例進(jìn)行混合，用孢子懸浮液（每10×10 視野有孢子5～10 個(gè)）于大豆生育期R 3～R 4 階段，選擇陰天或傍晚無風(fēng)時(shí)人工噴霧接種孢子懸浮液2～3 次，時(shí)間間隔為7d。

1.4 抗性調(diào)查評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)病調(diào)查按葉、莖、莢、子實(shí)分別進(jìn)行。接種20d 后調(diào)查葉部發(fā)病情況，發(fā)病級(jí)別按0～5 級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。0 級(jí)：免疫，葉部無病斑；1 級(jí)：高抗，病斑面積1%以下，病情指數(shù)20 以下；2 級(jí)：抗病，病斑面積1%～5%，病情指數(shù)21～40；3 級(jí)：中抗，病斑面積6%～20%，病情指數(shù)41～60；4 級(jí)：感病，病斑面積21%～50%，病情指數(shù)61～80；5 級(jí)：高感，病斑面積51%以上，病情指數(shù)80 以上[5-6]。作為輔助調(diào)查，成熟期每份材料在行中間連續(xù)取15 株，分別記載莖、莢、子實(shí)的發(fā)病情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 品系抗性鑒定結(jié)果在供試的1305 份大豆材料中，共鑒定出49 份高抗大豆灰斑病的品系，占供試材料的3.8%。其中大豆育種聯(lián)合體中佳豆58、克豆66、圣豆52、墾豆87、龍北2 號(hào)、金豐7 號(hào)、金豐9號(hào)、賓豆3；特用豆中綏農(nóng)88、佳密豆9 號(hào)、龍達(dá)菜豆1 號(hào)；傳統(tǒng)育種單位中東升19、東農(nóng)90、喜農(nóng)1 號(hào)、金源802、合農(nóng)147、龍墾3430、鑫科10 號(hào)；農(nóng)墾集團(tuán)中墾農(nóng)71、龍墾3047、建農(nóng)22 等21 個(gè)品系抗性連續(xù)表現(xiàn)較好（表1）。表現(xiàn)為抗病的品系197 份，占供試材料的15.0%；879 個(gè)品系表現(xiàn)為中抗，占供試材料的67.4%；表現(xiàn)為感病的品系180 份，占供試材料的13.8%（表2）。從抗感比例看，中抗材料所占比例最高，達(dá)到67.4%；其次是抗病材料，比例為15.0%；感病材料的比例低于抗病材料，遠(yuǎn)低于中抗材料，說明2018-2019 年供試大豆品系整體抗性較好。

表1 21 個(gè)高抗大豆新品系抗性鑒定結(jié)果

2.2 不同來源品系抗性分析對(duì)參試的1305份品系的供種單位進(jìn)行分析，結(jié)果表明，供種單位提供的參試品系中表現(xiàn)高抗的品系所占比例由高到低依次為特用豆-育種聯(lián)合體-傳統(tǒng)育種單位-農(nóng)墾集團(tuán)；表現(xiàn)抗病的品系所占比例由高到低依次為育種聯(lián)合體-農(nóng)墾集團(tuán)-傳統(tǒng)育種單位-特用豆；表現(xiàn)中抗的品系所占比例由高到低依次為農(nóng)墾集團(tuán)-育種聯(lián)合體-傳統(tǒng)育種單位-特用豆；表現(xiàn)感病的品系所占比例由高到低依次為特用豆-傳統(tǒng)育種單位-農(nóng)墾集團(tuán)-育種聯(lián)合體（表2）。

根據(jù)供試品系4 個(gè)不同來源與用途劃分，育種聯(lián)合體的材料表現(xiàn)綜合抗病的比例最高，占供試材料的92.4%，并且抗病材料的比例分布均勻?？共∑废当壤旁诘? 位的是農(nóng)墾集團(tuán)提供的材料，比例為84.3%，但其高抗材料只有4 份，比例分布不合理，要引起育種者的注意。第3 位是傳統(tǒng)育種單位提供的材料，比例為83.9%。第4 位是特用豆品系，比例為78.9%，低于年平均值86.2%。特用豆屬于特種用途的綠大豆、黑大豆、納豆、青豆、芽豆等，但其種質(zhì)的抗性要引起育種者的重視，加強(qiáng)引進(jìn)和選育抗灰斑病的材料。

表2 2018-2019 年黑龍江省不同來源與用途的大豆新品系抗性鑒定

2.3 抗（感）病品系各項(xiàng)指標(biāo)分析統(tǒng)計(jì)了供試材料鑒定結(jié)果的各項(xiàng)指標(biāo)，如表3 所示，高抗品系的病情指數(shù)平均為15.8，病莢率平均為1.01%，病粒率平均為0.06%，莖斑數(shù)平均為0.9；抗病品系的病情指數(shù)平均為28.3，病莢率平均為2.29%，病粒率平均為0.44%，莖斑數(shù)平均為2.1；中抗品系的病情指數(shù)平均為53.9，病莢率平均為3.54%，病粒率平均為1.21%，莖斑數(shù)平均為2.8；感病和高感品系的病情指數(shù)平均為68.9，病莢率平均為7.20%，病粒率平均為1.67%，莖斑數(shù)平均為5.2。

表3 抗（感）病品系各項(xiàng)指標(biāo)分析

3 討論與結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，2018-2019 年黑龍江省新育成的大豆品系中，中抗以上品系占86.2%，感病和高感品系占13.8%。在供試品系中，抗性品系所占比例較大，這與近幾年大豆育種單位重視抗病親本的利用與選擇，后代人工接種鑒定選擇有直接關(guān)系。育種聯(lián)合體在品系抗性選擇方面所做的貢獻(xiàn)尤為突出。

鑒定出高抗材料49 份，其中大豆育種聯(lián)合體中的佳豆58、克豆66、圣豆52、墾豆87、龍北2 號(hào)、金豐7 號(hào)、金豐9 號(hào)、賓豆3；特用豆中綏農(nóng)88、佳密豆9 號(hào)、龍達(dá)菜豆1 號(hào)；傳統(tǒng)育種單位中東升19、東農(nóng)90、喜農(nóng)1 號(hào)、金源802、合農(nóng)147、龍墾3430、鑫科10 號(hào)；農(nóng)墾集團(tuán)中墾農(nóng)71、龍墾3047、建農(nóng)22 等21個(gè)品系連續(xù)抗性表現(xiàn)較好。高抗材料的鑒定，為育種單位選擇抗性親本提供了理論依據(jù)。

全省大豆品系抗病比例較高，與各育種單位在多年的抗病育種過程中重視抗源的利用密切相關(guān)。

本研究結(jié)果為2018-2019 年2 年的抗病鑒定結(jié)果。大豆灰斑病菌生理小種分化現(xiàn)象十分明顯，各生理小種存在此消彼長現(xiàn)象。大豆灰斑病的發(fā)生與氣象條件密切相關(guān)，在大豆灰斑病鑒定中常出現(xiàn)隔年不同級(jí)別的情況。因此綜合連續(xù)多年鑒定結(jié)果，結(jié)合溫室內(nèi)的灰斑病盆栽鑒定，可以減少氣候因素對(duì)鑒定結(jié)果的影響。選育推廣多年抗性鑒定中抗性良好的品種對(duì)黑龍江省的大豆安全生產(chǎn)至關(guān)重要，是一項(xiàng)長期且有意義的工作。