彭忠異 阮 萍 張錫流

(1 廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院病理科，廣西南寧市 530011；2 廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科，廣西南寧市 530023)

【提要】 肝細(xì)胞肝癌(HCC)的傳統(tǒng)治療方法對(duì)晚期肝癌、轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)患者的療效較差，而腫瘤干細(xì)胞(CSCs)為肝癌的預(yù)后、診斷和靶向治療提供了新的思路。識(shí)別CSCs及其相關(guān)的治療靶點(diǎn)，對(duì)于提高HCC的治療效果有重要意義。

肝癌是人類最常見(jiàn)的癌癥之一。目前，肝細(xì)胞肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)的傳統(tǒng)治療方法有外科治療、放療、化療、射頻消融、肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)、肝移植和中醫(yī)治療等，但這些治療方法對(duì)晚期肝癌、轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)患者的療效較差。隨著靶向治療的興起，腫瘤干細(xì)胞(cancer stem cells，CSCs)為肝癌的預(yù)后、診斷和治療提供了新的思路。目前，人們普遍認(rèn)為CSCs參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的過(guò)程[1]，因此，識(shí)別CSCs及其相關(guān)的治療靶點(diǎn)對(duì)于提高HCC的治療效果有重要意義。本文對(duì)近年來(lái)肝癌腫瘤干細(xì)胞的標(biāo)志物以及這些標(biāo)志物在肝癌中治療意義的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)志物

自從在急性髓系白血病中發(fā)現(xiàn)CSCs的第一個(gè)證據(jù)以來(lái)[2]，許多腫瘤(包括肝癌)中CSCs的存在和CSCs表面標(biāo)志物的鑒定已經(jīng)通過(guò)免疫原性、致瘤性或功能特征的分析進(jìn)行了研究[3]。以下一些細(xì)胞表面蛋白已被鑒定為肝臟CSCs標(biāo)志物。

1.1 CD133 CD133是一種五跨膜單鏈糖蛋白，分別含有兩個(gè)小的細(xì)胞內(nèi)環(huán)和兩個(gè)大的細(xì)胞外環(huán)，屬于重要蛋白家族，是造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞和肝干/祖細(xì)胞的原始標(biāo)記物[4]。CD133作為CSCs標(biāo)志物在胃癌、肺癌、肝癌等多種腫瘤組織中的作用已被證實(shí)[5]。CD133+肝癌細(xì)胞具有很強(qiáng)的增殖、分化和自我更新能力，成為研究腫瘤干細(xì)胞的重要靶向分子之一。CD133+腫瘤細(xì)胞在人類腫瘤細(xì)胞中僅占一小部分，但其臨床意義重大。研究表明，與低CD133表達(dá)的患者相比，高CD133表達(dá)的患者總體存活率較低，復(fù)發(fā)率較高[5]。Lin等[6]發(fā)現(xiàn)熊果酸查爾酮以劑量和時(shí)間依賴性地抑制PLC/PRF/5和Huh7肝癌細(xì)胞CD133+的表達(dá)，使其自我更新能力降低，對(duì)阿霉素和長(zhǎng)春新堿的敏感性增強(qiáng)，有望成為肝癌CSCs靶向分化的有效治療劑。Li等[7]研究發(fā)現(xiàn)，異鳥(niǎo)嘌呤衍生物可抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)，特別是在CD133+亞群中，可使肝癌細(xì)胞對(duì)索拉非尼的治療更敏感。這些結(jié)果強(qiáng)調(diào)了靶向沉默CD133+肝CSCs以改善HCC治療結(jié)果的重要性。綜上所述，CD133作為肝癌重要的CSCs標(biāo)志物之一，在肝癌等多種腫瘤中具有較強(qiáng)的增殖、自我更新能力，對(duì)CSCs靶向藥物的治療研究有一定的意義。

1.2 CD90 CD90(Thy-1)是卵圓細(xì)胞的表面標(biāo)志，是一種分子量為25～37 kDa的糖基磷脂酰肌醇錨定糖蛋白，表達(dá)于T細(xì)胞、胸腺細(xì)胞、神經(jīng)元、內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞類型。近年來(lái)，CD90作為CSCs標(biāo)志物在包括肝癌CSCs在內(nèi)的多種腫瘤細(xì)胞中也受到關(guān)注。Yang等[8-9]發(fā)現(xiàn)CD90+肝癌細(xì)胞顯示出致瘤和轉(zhuǎn)移潛能，肝癌細(xì)胞系來(lái)源的CD90+細(xì)胞和肝癌患者組織/血液來(lái)源的CD45-CD90+細(xì)胞都會(huì)在免疫缺陷小鼠中產(chǎn)生腫瘤結(jié)節(jié)，從CD90+細(xì)胞衍生的異種移植在第二批和隨后的第三批免疫缺陷小鼠中均可產(chǎn)生腫瘤結(jié)節(jié)，這些結(jié)果也提示血液中存在循環(huán)中的CSCs。Yang等[9]認(rèn)為，顯示出致瘤能力的是肝癌細(xì)胞株CD90+細(xì)胞而不是CD90-細(xì)胞。陳本棟等[10]也認(rèn)為，CD90+細(xì)胞具有較強(qiáng)的侵襲能力，CD90+CSCs的潛在相互作用和離散特性對(duì)分子靶向治療具有特異性的化療敏感性和基因表達(dá)模式。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究表明，CD90的下調(diào)可能是肝癌治療的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。Liu等[11]研究發(fā)現(xiàn)，CD90對(duì)HCC的特異性為91.9%，對(duì)預(yù)測(cè)低分化的敏感性為48.2%，這表明CD90對(duì)HCC的是一個(gè)有前途的靶點(diǎn)。

1.3 CD44 CD44是介導(dǎo)細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)之間的黏附分子家族成員，作為一種細(xì)胞表面血凝素結(jié)合糖蛋白，其位于細(xì)胞表面，與細(xì)胞骨架蛋白相互作用。CD44對(duì)組織重塑、細(xì)胞基質(zhì)黏附和細(xì)胞遷移具有重要作用，已被用作實(shí)體瘤干細(xì)胞的重要標(biāo)志物。CD44現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于多種實(shí)體瘤中CSCs與其他細(xì)胞表面標(biāo)志物的聯(lián)合鑒定。具有代表性的是，在人類乳腺癌中分離出CD44+CD24-CSCs/低細(xì)胞群體，這是在實(shí)體腫瘤中首次發(fā)現(xiàn)的[12]。在HCC方面，CD44為CD133+或CD90+CSCs群體提供了獨(dú)特的細(xì)胞特征。Zhu等[13]研究表明，與CD133+CD44-腫瘤細(xì)胞相比，CD133+CD44+腫瘤細(xì)胞具有更多的干細(xì)胞特性，包括廣泛的增殖、自我更新和產(chǎn)生分化后代的能力，并且能夠以非常低的細(xì)胞數(shù)量在NOD/SCID小鼠體內(nèi)啟動(dòng)腫瘤生長(zhǎng)。CD44可能是更有效的治療和加深對(duì)HCC進(jìn)展和啟動(dòng)理解的特異性靶點(diǎn)。Williams等[14]強(qiáng)調(diào)CD44調(diào)節(jié)干細(xì)胞在腫瘤進(jìn)展和細(xì)胞遷移過(guò)程中的行為，除信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞-基質(zhì)相互作用外，還包括分化和自我更新。用OSKM法(OCT4、SOX2、KLF4和c-MYC)建立了C3A來(lái)源的肝癌干細(xì)胞，命名為C3A誘導(dǎo)的CSCs；而肝癌干細(xì)胞中維持干細(xì)胞狀態(tài)的高度惡性和低分化的腫瘤細(xì)胞歸因于CD44。

1.4 上皮細(xì)胞黏附分子 上皮細(xì)胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)作為黏附分子家族中的單一跨膜糖蛋白，也被稱為CD326，其由一個(gè)大的N-末端胞外區(qū)和一個(gè)短的C-末端片段通過(guò)單個(gè)跨膜區(qū)連接而成，已被認(rèn)為是分離肝干細(xì)胞的最具代表性和最成功的標(biāo)志物之一[15]。EpCAM最初被確定為HCC的早期生物標(biāo)記物[16]。根據(jù)對(duì)一組HCC樣本的轉(zhuǎn)錄組分析，EpCAM+肝癌顯示出肝祖細(xì)胞特征明顯的分子特征，包括存在已知的干/祖細(xì)胞標(biāo)記，而EpCAM-肝癌表達(dá)的基因具有成熟肝細(xì)胞的特征[17]。此外，EpCAM+HCC表現(xiàn)出類似肝癌干細(xì)胞的特征，包括自我更新和分化，并且具有高侵襲性和致瘤性[18]，通過(guò)EpCAM+細(xì)胞亞集描述HCC的發(fā)展和侵襲性，為通過(guò)靶向β-catenin或Wnt信號(hào)成分(如EpCAM)根除HCC癌細(xì)胞開(kāi)辟了一條新的途徑。進(jìn)一步的研究顯示，與CD90+HCC相比，EpCAM+HCC與低分化、高血清甲胎蛋白水平和低遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移發(fā)生率高度相關(guān)[19]。從機(jī)制上講，EpCAM作為Wnt-β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的靶基因[20]，可能通過(guò)促進(jìn)Wnt-β-catenin信號(hào)拮抗劑對(duì)患者的藥理反應(yīng)來(lái)改善HCC的預(yù)后。同時(shí)，EpCAM還通過(guò)調(diào)節(jié)膜內(nèi)蛋白水解介導(dǎo)C-末端片段釋放來(lái)激活Wnt/β-catenin信號(hào)[21]。

1.5 CD13 CD13也被稱為氨基肽酶N，是一種分子量150 kDa的膜表面糖蛋白，具有CSCs特性，在腫瘤的侵襲、血管生成和細(xì)胞增殖等過(guò)程中起重要作用，在腫瘤進(jìn)展中發(fā)揮重要作用，如細(xì)胞增殖、癌灶內(nèi)細(xì)胞簇的形成以及治療過(guò)程中的生存能力[22]。最近在人肝癌細(xì)胞系和臨床標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)CD13是一種新的細(xì)胞表面標(biāo)志物，CD13+CSCs與臨床肝癌標(biāo)本中的缺氧標(biāo)志有關(guān)。這提示CD13+CSCs在HCC的腫瘤增殖和抗腫瘤治療中起主導(dǎo)作用[23]。Haraguchi等[24]采用Hoechst染料排斥法，發(fā)現(xiàn)CD13在人肝細(xì)胞癌中以半液態(tài)CSCs亞群的形式表達(dá)。CD13+細(xì)胞在NOD/SCID小鼠體內(nèi)具有較高的致瘤潛能，并對(duì)化療藥物阿霉素和5-氟尿嘧啶表現(xiàn)出耐藥性。CD13抑制劑烏苯美司可降低G0/G1期細(xì)胞比例，烏苯美司通過(guò)提高細(xì)胞內(nèi)活性氧水平，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，提高5-氟尿嘧啶、順鉑和DXR的治療效果[25]。Martin-Padura等[26]通過(guò)原位注射表達(dá)人甲胎蛋白和/或熒光素酶的肝癌細(xì)胞系和原代肝癌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)CD13+細(xì)胞處于微小殘留病狀態(tài)，這也表明靶向處于休眠狀態(tài)的CSCs是治療成功的關(guān)鍵。

1.6 CD24 CD24編碼唾液酸糖蛋白并在成熟的粒細(xì)胞和B細(xì)胞中表達(dá)，同時(shí)調(diào)節(jié)這些細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化信號(hào)。CD24在人類各種癌癥中也經(jīng)常過(guò)度表達(dá)，并與不良預(yù)后相關(guān)。CD24是一種高度糖基化的小黏蛋白樣細(xì)胞表面糖蛋白，在祖細(xì)胞或干細(xì)胞中表達(dá)。CD24+肝癌細(xì)胞對(duì)患者的臨床預(yù)后有很大影響，在腫瘤的自我更新、分化、維持和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[27]。Liu等[28]證實(shí)CD24作為肝癌干細(xì)胞的功能性標(biāo)志物，利用STAT3介導(dǎo)的NANOG調(diào)控來(lái)推動(dòng)肝癌干細(xì)胞的形成。 Twist2作為高度保守的螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子，對(duì)以CD24為基礎(chǔ)的增強(qiáng)型肝癌干細(xì)胞的自我更新具有重要意義。Twist2-CD24-STAT3-NANOG通路可能在肝癌干細(xì)胞自我更新調(diào)控中起關(guān)鍵作用。近年來(lái)，靶向CD24已成為改善肝癌患者預(yù)后的一種新的靶向治療方法。Zheng等[29]發(fā)現(xiàn)NDRG2(N-Myc下游調(diào)節(jié)基因2)通過(guò)調(diào)節(jié)CD24發(fā)揮抗癌活性。在肝癌細(xì)胞中，通過(guò)劑量和時(shí)間依賴的方式發(fā)現(xiàn)黃芩素可顯著降低c-Myc的表達(dá)，而c-Myc是細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡和細(xì)胞轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。Han等[30]研究證實(shí)了黃芩素對(duì)肝癌細(xì)胞的有效抗腫瘤作用，提示黃芩素通過(guò)下調(diào)CD24來(lái)抑制細(xì)胞增殖和細(xì)胞存活。

2 腫瘤干細(xì)胞其他標(biāo)志物

2.1 細(xì)胞質(zhì)中的標(biāo)記

2.1.1 OV6 肝卵圓細(xì)胞為位于肝臟門脈區(qū)域的肝干/祖細(xì)胞，具有雙潛能，可分化為肝細(xì)胞和膽管細(xì)胞[31]。OV6是一種肝臟祖細(xì)胞/干細(xì)胞標(biāo)記物，最近被確認(rèn)為CSCs的推定標(biāo)記物[32]。研究證實(shí)OV6+肝癌細(xì)胞在NOD/SCID小鼠體內(nèi)具有較高的成瘤能力和對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化療的耐藥性[33]。此外，激活Wnt通路可增加OV6+細(xì)胞水平，抑制β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)會(huì)導(dǎo)致OV6+細(xì)胞比例下降。CD133+在OV6+細(xì)胞中的表達(dá)明顯富集，表明OV6+是一個(gè)潛在的CSCs標(biāo)記物。Yang等[34]提出了利用磁珠分離方法從肝癌細(xì)胞系SMMC7721和Huh7中分離出OV6+細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)這些OV6+肝癌細(xì)胞不僅在體外具有較強(qiáng)的自我更新能力和致瘤性，在NOD/SCID小鼠體內(nèi)移植的OV6+肝癌細(xì)胞在體內(nèi)外均表現(xiàn)出較強(qiáng)的侵襲力和轉(zhuǎn)移潛能。此外，OV6+腫瘤細(xì)胞高表達(dá)與侵襲性臨床病理特征及預(yù)后不良有關(guān)，在OV6+細(xì)胞中，CXCR4過(guò)表達(dá)，SDF1上調(diào)可導(dǎo)致OV6+HCC細(xì)胞數(shù)量增加，特異性CXCR4抑制劑(AMD3100)或針對(duì)CXCR4的siRNA轉(zhuǎn)染可阻斷SDF1的作用。提示OV6+肝癌細(xì)胞具有自我更新能力、致瘤性和侵襲性，腫瘤內(nèi)OV6的表達(dá)受Wnt/β-catenin和SDF1/CXCR4信號(hào)通路的調(diào)控。由此提示，OV6+細(xì)胞在HCC的轉(zhuǎn)移和進(jìn)展中起重要作用。此外，CXCR4/SDF1軸提供了消除肝臟致瘤的治療靶點(diǎn)。

2.1.2 乙醛脫氫酶 在人體的腎、肝細(xì)胞中，乙醛脫氫酶(aldehyde dehydrogenase，ALDH)作為一種解毒酶，可促進(jìn)乙醛和乙醇代謝。ALDH是一種普遍存在的胞內(nèi)酶，可催化多種細(xì)胞醛類的不可逆氧化。ALDH+細(xì)胞在乳腺癌、肝癌和急性髓系白血病等腫瘤組織中已被檢測(cè)到，根據(jù)其增殖率、遷移和黏附能力而被認(rèn)為是CSCs。ALDH+細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能高于ALDH-細(xì)胞，同時(shí)還促進(jìn)了癌癥的化療耐藥和氧化應(yīng)激反應(yīng)[35]。流式細(xì)胞儀測(cè)定高水平的ALDH可能是正常肝臟中的肝祖/干細(xì)胞和肝癌中CSCs的一個(gè)標(biāo)志物[36]。Ma等[37]分析了幾種不同的ALDH亞型在肝細(xì)胞系中的表達(dá)和ALDH酶活性，他們通過(guò)雙色流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)ALDH與CD133的表達(dá)呈正相關(guān)，且大多數(shù)ALDH+肝癌細(xì)胞表現(xiàn)出CD133+，但并不是所有的CD133+HCC細(xì)胞都是ALDH+，而CD133+ALDH+細(xì)胞明顯比其他細(xì)胞更具致瘤性。這些數(shù)據(jù)表明，ALDH結(jié)合CD133可以更特異地標(biāo)記致瘤CSCs。最近，Chiba等[38]通過(guò)激活ROS-p38MAPK通路，提示ALDH的小分子抑制劑可下調(diào)CSCs標(biāo)志物的數(shù)量，抑制肝癌細(xì)胞的自我更新能力。此外，最近發(fā)現(xiàn)ALDH1A1的作用在HCC中得到了表現(xiàn)，其屬于ALDH1家族的一個(gè)成員，由視黃烯合成視黃酸(retinoic acid，RA)，是RA信號(hào)通路的重要調(diào)節(jié)因子[39]。RA誘導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄，從而調(diào)節(jié)多種生物學(xué)過(guò)程，如細(xì)胞增殖、分化、細(xì)胞周期停滯和凋亡[40]。由于這些“莖性”的特征，ALDH1家族被認(rèn)為是干細(xì)胞標(biāo)記物[41]。

2.1.3 CK19 細(xì)胞角蛋白是一種典型的上皮細(xì)胞標(biāo)記物， CK19是膽管細(xì)胞、肝祖細(xì)胞和早期肝母細(xì)胞的標(biāo)志物，在正常人肝膽管細(xì)胞中表達(dá)，也散布于肝硬化和肝癌實(shí)質(zhì)中[42]。CK19是HCC侵襲性強(qiáng)、預(yù)后差的標(biāo)志物，與CK19陰性的HCC相比，CK19常與預(yù)后不良以及mRNA和上皮-間葉轉(zhuǎn)換(epithelial mesenchymal transition，EMT)相關(guān)蛋白有關(guān)，CK19陽(yáng)性的HCC顯示出更頻繁的主要血管侵犯[43]。CK19+在HCC中是一種干細(xì)胞性標(biāo)志物，與侵襲力、腫瘤大小、腫瘤分化、轉(zhuǎn)移和微血管浸潤(rùn)相關(guān)性強(qiáng)，是預(yù)測(cè)預(yù)后、患者生存和腫瘤復(fù)發(fā)的重要因素[43]。在CK19+肝癌細(xì)胞中，EMT相關(guān)蛋白表達(dá)增加，在腫瘤細(xì)胞侵襲過(guò)程中起主導(dǎo)作用[43]。研究還發(fā)現(xiàn)，超過(guò)90%的CK19+HCC細(xì)胞表達(dá)至少一個(gè)其他與干細(xì)胞相關(guān)的標(biāo)記物，相比而言，EpCAM、c-kit和CD133單獨(dú)表達(dá)的頻率更高，這意味著CK19可能比其他標(biāo)記物更“特異”地與干細(xì)胞相關(guān)。Kawai等[44]研究結(jié)果表明，CK19+細(xì)胞在體外具有較高的增殖能力和5-氟尿嘧啶抗性，提示CK19+細(xì)胞參與了Smad/TGFb信號(hào)和EMT的激活，這些特性可被TGFBR1抑制劑或CK19基因敲除所抑制。作為一個(gè)與Smad/TGFb信號(hào)和EMT相關(guān)的新的CSCs標(biāo)記物，CK19被認(rèn)為是抑制TGFBR1的良好治療靶點(diǎn)。

2.2 細(xì)胞核中的標(biāo)記

2.2.1 Nanog Nanog基因是DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子同源盒家族中的一員，最近在多能性促進(jìn)基因的篩選中被發(fā)現(xiàn)。越來(lái)越多的證據(jù)表明，Nanog在腫瘤發(fā)生中起著至關(guān)重要的作用。功能喪失的相關(guān)研究表明，Nanog對(duì)上皮性惡性腫瘤的數(shù)量至關(guān)重要，部分原因是通過(guò)調(diào)節(jié)CSCs數(shù)量[45]。Nanog在實(shí)體瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用，其在乳腺癌、卵巢癌、結(jié)直腸癌、胃癌、頭頸部鱗狀細(xì)胞、肝細(xì)胞癌、肺癌及前列腺癌中的表達(dá)水平均上調(diào)[46-47]，提示Nanog可能在腫瘤發(fā)生中發(fā)揮潛在作用。肝癌細(xì)胞中的Nanog通過(guò)激活Nodal/Smad3信號(hào)通路促進(jìn)EMT和細(xì)胞侵襲，高表達(dá)的Nanog會(huì)導(dǎo)致低表達(dá)的Huh7肝癌細(xì)胞的細(xì)胞侵襲力增加，并誘導(dǎo)具有Vimentin+/ Ecadherin-特征的EMT出現(xiàn)[48]。通過(guò)HepG2細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)，Zhou等[49]發(fā)現(xiàn)HCV核心蛋白誘導(dǎo)Nanog表達(dá)后，磷酸化的STAT3蛋白表達(dá)增強(qiáng)，這種作用可通過(guò)抑制STAT3磷酸化而減弱。Yin等[50]研究提示Oct4和Nanog的共同表達(dá)與HCC的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、預(yù)后和耐藥密切相關(guān)，隨后的分子機(jī)制研究揭示了Oct4/Nanog調(diào)控的EMT通過(guò)STAT3依賴的Snail激活而改變。此外，STAT3的下調(diào)還抑制了Oct4/Nanog介導(dǎo)的EMT在HCC中的變化和侵襲/轉(zhuǎn)移。這些發(fā)現(xiàn)為治療具有CSCs樣信號(hào)和EMT表型的HCC的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移提供了一個(gè)新的治療靶點(diǎn)。

2.2.2 SOX9 SOX9是SRY基因超家族的成員，是一些惡性腫瘤的原癌基因，如乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌、卵巢癌、腸癌和胃癌[51-52]。通過(guò)上調(diào)Oct4，SOX9參與了癌癥干細(xì)胞樣特性的維持，包括自我更新、化療耐藥和致瘤性[53]。Guo等[54]首先分析了SOX9蛋白和mRNA在人肝癌組織中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)SOX9與患者的臨床預(yù)后有關(guān)。SOX9在腫瘤分期越高、無(wú)瘤生存期越短、總生存期越短的腫瘤組織中表達(dá)越強(qiáng)。進(jìn)一步研究表明SOX9指導(dǎo)的調(diào)節(jié)子miR101是潛在HCC的腫瘤抑制因子miRNA[55]，他們還發(fā)現(xiàn)靶標(biāo)miR-101下調(diào)了SOX9的水平，這也得到了基因分析的證實(shí)，表明miRNA-101直接針對(duì)HCC組織中的SOX9。siRNA增強(qiáng)miR-101的表達(dá)和抑制SOX9的表達(dá)，不僅抑制了肝癌細(xì)胞的增殖，而且抑制了肝癌細(xì)胞的體外致瘤性。

3 肝癌腫瘤干細(xì)胞的靶向治療

肝癌是一種高度惡性的腫瘤，在侵襲性、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移上呈現(xiàn)較強(qiáng)的能力，發(fā)展到中晚期往往預(yù)后不良。傳統(tǒng)治療方法如外科手術(shù)、內(nèi)科化療、放療及中醫(yī)療法對(duì)晚期、復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的肝癌患者效果較差，這可能與肝臟CSCs的存在有關(guān)，去除肝癌CSCs則為治療肝癌的新路徑。目前基于肝癌腫瘤干細(xì)胞的靶向治療顯示出巨大潛力，靶向藥物研究有一定的意義和成效，但大多仍然停留在科研及實(shí)驗(yàn)階段。在實(shí)際靶點(diǎn)治療肝癌中，仍不能徹底消滅癌細(xì)胞，未能阻止肝癌的發(fā)展、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移。所以，在實(shí)際臨床治療方面還存在下述等待解決的問(wèn)題：(1)肝癌CSCs的各種生物學(xué)特性有待不斷闡明；(2)肝癌CSCs與正常干細(xì)胞存在許多相似性，如何提高靶向治療的特異性，是需要解決的問(wèn)題。

4 小結(jié)與展望

肝癌CSCs標(biāo)志物除上述[CD133、CD90、CD44、EpCAM(CD326)、CD13、CD24、OV6、ALDH1、CK19、Nanog、SOX9]標(biāo)志物外，仍有Nestin、CD47、GST-P等多個(gè)肝癌CSCs標(biāo)志物被報(bào)道。肝癌CSCs標(biāo)志物是研究肝癌CSCs的切入點(diǎn)，肝癌CSCs標(biāo)志物的研究可為肝癌的靶向治療開(kāi)辟新的道路。雖然目前尚停留在初級(jí)階段，隨著研究的深入以及各項(xiàng)瓶頸的突破，比如肝癌CSCs生物學(xué)特性的不斷闡明，可研發(fā)出針對(duì)肝癌CSCs特異性靶點(diǎn)的藥物，在消除肝癌CSCs的同時(shí)，對(duì)正常細(xì)胞無(wú)不良影響, 使明顯提高肝癌的治療效果成為可能。