張建麗 薛夢薇 柳世萍 賈全(華北制藥河北華民藥業(yè)有限責(zé)任公司，河北 石家莊 052165)

0 引言

頭孢氨芐片是臨床上應(yīng)用非常普遍的一種抗菌藥[1]，且在國務(wù)院辦公廳發(fā)布的需開展仿制藥質(zhì)量與療效一致性評價(jià)的289個(gè)基藥口服固體制劑范圍內(nèi)[2]。對于普通口服固體制劑，可采用比較仿制制劑與參比制劑體外多條溶出曲線相似性的方法，評價(jià)仿制制劑的質(zhì)量，所以選擇適合的溶出曲線測定方法對于研究過程來說十分重要。中國藥典中收載的頭孢氨芐片溶出度檢測方法為籃法100轉(zhuǎn)，并未檢測溶出曲線[3]，日本橙皮書中采用槳法50轉(zhuǎn)對頭孢氨芐膠囊進(jìn)行溶出曲線的檢測，未涉及頭孢氨芐片[4]。本文主要對比籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)測定頭孢氨芐片參比制劑pH1.2鹽酸介質(zhì)，pH4.0醋酸介質(zhì)，pH6.8磷酸介質(zhì)以及水介質(zhì)中的溶出曲線結(jié)果并選出相對更適合頭孢氨芐片的溶出曲線測定方法。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

電子天平(XS105，梅特勒-托利多)全自動(dòng)溶出儀(RC12AD，天大天發(fā))，紫外分光光度儀(UV-2700，島津)

1.2 試劑

頭孢氨芐片(Flynn Pharma Ltd)，鹽酸(天津風(fēng)船)，氫氧化鈉(天津光復(fù))，磷酸二氫鉀(科密歐試劑)，乙酸鈉(天津光復(fù))，冰醋酸(天津永大)

2 溶出曲線的測定

2.1 溶出介質(zhì)配制[5]

pH1.2鹽酸介質(zhì)：取7.65mL的鹽酸，用水稀釋至1000mL，搖勻，即得。pH4.0醋酸介質(zhì)：取乙酸鈉1.22g和2mol/L的醋酸溶液(取冰醋酸120.0g(114mL)用水稀釋至1000mL，搖勻，即得)20.5mL用水溶解并稀釋至1000mL，搖勻，即得。pH6.8磷酸介質(zhì)：取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液(取磷酸二氫鉀27.22g，加水溶解并稀釋至1000mL)250mL與112.0mL的0.2mol/L氫氧化鈉溶液(取氫氧化鈉8.00g，加水溶解并稀釋至1000mL)混合，用水稀釋至1000mL，搖勻，即得。

2.2 溶出曲線測定

取本品12片，分別以水、鹽酸溶液(pH1.2)、醋酸鹽緩沖液(pH4.0)、磷酸鹽緩沖液(pH6.8)900mL為溶出介質(zhì)，依法操作(兩種方法，籃法，轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)和槳法，轉(zhuǎn)速50轉(zhuǎn))，在5min、10min、15min、20min、30min、45min、60min 時(shí)，分別取溶液5mL，濾過，并及時(shí)在操作容器中補(bǔ)充溶出介質(zhì)5mL，精密量取續(xù)濾液各適量，分別用溶出介質(zhì)定量稀釋制成每1mL中約含頭孢氨芐(按C16H17N3O4S計(jì))25μg的溶液，作為供試品溶液，照紫外-可見分光光度法[6]，在262nm的波長處測定吸光度；另精密稱取頭孢氨芐對照品適量，加溶出介質(zhì)溶解并定量稀釋制成每1mL中約含25μg的溶液，同法測定，計(jì)算每片在不同時(shí)間的溶出量。 以取樣時(shí)間點(diǎn)為橫坐標(biāo)，平均溶出量為縱坐標(biāo)，繪制該介質(zhì)的溶出曲線圖。

2.3 影響溶出數(shù)據(jù)的因素

除藥物制劑自身因素外，實(shí)驗(yàn)的儀器裝置，溶出介質(zhì)以及濾膜等均有可能對藥物的溶出數(shù)據(jù)產(chǎn)生影響[7]。

(1)不同設(shè)備檢測。分別使用天大天大和安捷倫溶出儀，采用籃法100轉(zhuǎn)的方法檢測頭孢氨芐片樣品的溶出數(shù)據(jù)，對比溶出曲線。

(2)溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。取頭孢氨芐片樣品，采用籃法100轉(zhuǎn)溶出曲線測定，分別在5min和45min時(shí)取溶液適量，濾過，精密量取續(xù)濾液適量，用溶出介質(zhì)定量稀釋制成每1mL中約含頭孢氨芐25μg 的溶液，將該溶液于室溫下放置3h，分別于0、1、2、3h測定溶液的吸光度，計(jì)算吸光度的RSD%。

(3)濾膜吸附實(shí)驗(yàn)。天大天大溶出儀使用天大天大系統(tǒng)保護(hù)過濾頭和濾膜，針對其過濾方式進(jìn)行濾膜吸附實(shí)驗(yàn)。配制相當(dāng)于主藥溶出度10%的溶液和相當(dāng)于主藥溶出度100%的溶液，這兩種溶液均分為兩份，一份過濾，一份不過濾。照紫外-可見光光度法在262nm波長處測定溶液的吸光度。

3 結(jié)果與討論

3.1 pH1.2鹽酸介質(zhì)溶出曲線的測定

在pH1.2鹽酸介質(zhì)中分別采用籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)對頭孢氨芐片的溶出曲線進(jìn)行檢測，得出各個(gè)時(shí)間點(diǎn)對應(yīng)的平均溶出量并繪制對應(yīng)的溶出曲線見圖1。

圖1 pH1.2鹽酸介質(zhì)中籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)的溶出曲線

圖1中的兩條溶出曲線基本重合，可知在pH1.2鹽酸介質(zhì)中采用兩種方法檢測結(jié)果差異不大。

3.2 pH4.0醋酸介質(zhì)溶出曲線的測定

在pH4.0醋酸介質(zhì)中分別采用籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)對頭孢氨芐片的溶出曲線進(jìn)行檢測，得出各個(gè)時(shí)間點(diǎn)對應(yīng)的平均溶出量，繪制對應(yīng)的溶出曲線見圖2。

圖2 pH4.0醋酸介質(zhì)中籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)的溶出曲線

從圖2可以看出前期溶出籃法100轉(zhuǎn)略高于槳法50轉(zhuǎn)，且籃法100轉(zhuǎn)檢測的數(shù)據(jù)繪制的曲線更平滑。終溶出量兩者相當(dāng)，且達(dá)到溶出平臺的時(shí)間兩種方法基本一樣。

3.3 pH6.8磷酸介質(zhì)溶出曲線的測定

在pH6.8磷酸介質(zhì)中分別采用籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)對頭孢氨芐片的溶出曲線進(jìn)行檢測，得出各個(gè)時(shí)間點(diǎn)對應(yīng)的平均溶出量，繪制對應(yīng)的溶出曲線見圖3。

圖3 pH6.8磷酸介質(zhì)中籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)的溶出曲線

圖3表明前期溶出籃法100轉(zhuǎn)略高于槳法50轉(zhuǎn)，終溶出量兩者相當(dāng)，且達(dá)到溶出平臺的時(shí)間兩種方法基本一樣。

3.4 水介質(zhì)溶出曲線的測定

在水介質(zhì)中分別采用籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)對頭孢氨芐片的溶出曲線進(jìn)行檢測，得出各個(gè)時(shí)間點(diǎn)對應(yīng)的平均溶出量，繪制對應(yīng)的溶出曲線見圖4。

圖4 水介質(zhì)中籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)的溶出曲線

圖4可以直觀地看出前期溶出籃法100轉(zhuǎn)略高于槳法50轉(zhuǎn)，但最終溶出水平相當(dāng)。

3.5 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象

實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，采用槳法50轉(zhuǎn)的溶出杯中發(fā)現(xiàn)有樣品粘在杯壁而非直接掉至杯底。各樣品掉落位置不同，樣品周圍介質(zhì)流速有一定區(qū)別，前期RSD值可能偏大。且投料時(shí)并非機(jī)器自動(dòng)投料，有一定微小的時(shí)間差，可能會(huì)在后期研究過程中測定其他樣品時(shí)出現(xiàn)RSD較高的情況出現(xiàn)。而籃法100轉(zhuǎn)相對可以減少非片劑本身因素造成的溶出數(shù)據(jù)差異。

3.6 各時(shí)間點(diǎn)RSD對比

采用籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)檢測頭孢氨芐片溶出曲線數(shù)據(jù)，各時(shí)間點(diǎn)RSD值見表1。

表1 籃法100轉(zhuǎn)和槳法50轉(zhuǎn)檢測各時(shí)間點(diǎn)RSD對比

從表1中數(shù)據(jù)可知，采用槳法50轉(zhuǎn)檢測溶出曲線數(shù)據(jù)，前期RSD值高于籃法100轉(zhuǎn)。結(jié)合實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，籃法100轉(zhuǎn)相比于槳法50轉(zhuǎn)有一定的優(yōu)勢。

3.7 其他因素

采用不同設(shè)備檢測頭孢氨芐片的溶出數(shù)據(jù)四種介質(zhì)中各時(shí)間點(diǎn)RSD均不超過5%。在1～3小時(shí)內(nèi)，四種介質(zhì)的5min和45min時(shí)間點(diǎn)溶出數(shù)據(jù)RSD均不大于2%，溶液穩(wěn)定。在天大天大系統(tǒng)保護(hù)濾頭和濾膜的過濾方式下，四種介質(zhì)回收率不低于98%，濾膜吸附不影響本品種的溶出測定。綜上，濾膜，設(shè)備，所選的溶出介質(zhì)這三個(gè)外在因素不影響頭孢氨芐片的溶出。

4 結(jié)語

頭孢氨芐片是一種高溶解性的藥物，對比槳法50轉(zhuǎn)和籃法100轉(zhuǎn)兩種溶出方法檢測溶出曲線的結(jié)果，均能夠反應(yīng)頭孢氨芐片制劑高溶解性的特點(diǎn)，區(qū)分力兩種方法接近。但是結(jié)合溶出杯中的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和各時(shí)間點(diǎn)RSD，籃法100轉(zhuǎn)優(yōu)于槳法50轉(zhuǎn)，該方法與《中國藥典》和《美國藥典》中頭孢氨芐片溶出度方法一致。綜合來看，頭孢氨芐片體外溶出試驗(yàn)方法選擇籃法100轉(zhuǎn)更為合適。