王婕 張波 周發(fā) 王夢(mèng)澤 范俊峰

摘?要：研究一年生、兩年生、三年生和四年生5月份的枸杞葉（LL）中的營(yíng)養(yǎng)成分及生物活性成分，結(jié)果表明：LL中含有豐富的蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、B族維生素和?；撬?。其中，一年生的LL中碳水化合物（38.30 mg/100 g）、脂質(zhì)（0.25 g/100 g）、鈉（483.25 mg/100 g）、鉀（317.16 mg/100 g）、氨基酸（7.98 g/100 g）含量最高;四年生的LL中蛋白質(zhì)（34.42 g/100 g）、灰分（25.18 g/100 g）、鈣（385.82 mg/100 g）、甜菜堿（981.50 mg/100 g）、?；撬幔?81.02 mg/100 g）含量最高。本研究為L(zhǎng)L的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：枸杞葉;營(yíng)養(yǎng)成分;蛋白質(zhì);礦物質(zhì)

新鮮枸杞葉（LL）可作為蔬菜食用，在中國(guó)古代也可以作為草藥茶使用[1]。研究表明，LL的化學(xué)成分與枸杞子類(lèi)似，主要有多糖類(lèi)、多酚類(lèi)、甜菜堿、維生素及多種微量元素，有些含量甚至比枸杞子還要高[2]。同時(shí)，LL多糖有降糖降脂的作用[3]，LL提取物有抗氧化和抗DNA損傷的功效[4]。研究表明，5月份采收的LL具有較多的生物活性物質(zhì)[5-6]，但并未有人研究過(guò)不同采收年份對(duì)LL中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的影響。本研究比較不同采收年份的LL中的營(yíng)養(yǎng)成分和生物活性成分，為L(zhǎng)L的采收及深加工提供科學(xué)依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?材料與試劑

葉用枸杞專(zhuān)用品種于5月份在寧夏銀川收獲。收獲后，在60 ℃下烘干8 h，置于4 ℃冰箱貯藏，使用時(shí)粉碎成粉末后過(guò)60目篩。無(wú)水乙醇、濃硫酸、石油醚、鹽酸、氫氧化鈉，北京化工廠(chǎng);β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品、甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)品、?；撬針?biāo)準(zhǔn)品，天津市永大化學(xué)試劑有限公司。

1.2?儀器與設(shè)備

真空冷凍干燥機(jī)（LL-1500），賽默飛世爾科技有限公司;紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（T6新世紀(jì)），北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;臺(tái)式離心機(jī)（TD5A-WS），長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)有限公司;氨基酸分析儀（S433），賽卡姆（北京）科學(xué)儀器有限公司。

1.3?方法

1.3.1?基本組分的測(cè)定?對(duì)不同采收年份的LL的基本組分進(jìn)行了測(cè)定。水分含量的測(cè)定采用直接干燥法（GB 5009.3—2010第一法），蛋白質(zhì)含量的測(cè)定采用凱氏定氮法（GB 5009.5—2016第一法），脂質(zhì)含量的測(cè)定采用索氏抽提法（GB 5009.6—2016第一法），灰分的測(cè)定采用灼燒法（GB 5009.4—2010），碳水化合物的測(cè)定采用差值法[7]。

1.3.2?礦物質(zhì)的測(cè)定?采用火焰原子吸收光譜法對(duì)LL中的礦物質(zhì)進(jìn)行了測(cè)定。測(cè)定了鈣（GB 5009.92—2016第一法）、鐵（GB 5009.90—2016第一法）、鋅（GB 5009.14—2017第一法）、鉀和鈉（GB 5009.91—2017第一法）5種礦物質(zhì)的含量。

1.3.3?氨基酸組成?準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品5.0 g 于錐形瓶中，按照樣品和去離子水比例為1∶10加入去離子水，沸水浴提取1 h，每間隔15 min振搖1次。冷卻至室溫，過(guò)濾，將過(guò)濾后的提取液轉(zhuǎn)移至100 mL的容量瓶中，用去離子水洗滌濾渣2次，洗出液與提取液合并后定容至100 mL。取5.0 mL定容后的液體于15 mL離心管中，加入10% 磺基水楊酸溶液5.0 mL，離心15 min（8 000 r/min、4 ℃），取上清液過(guò)0.22 μ膜，利用全自動(dòng)氨基酸分析儀測(cè)定氨基酸種類(lèi)和含量[8]。

1.3.4?維生素的測(cè)定?對(duì)不同采收年份的LL中的維生素進(jìn)行了測(cè)定。分別測(cè)定了硫胺素（維生素B1）（GB/T 5009.84—2003）、核黃素（維生素B2）（GB/T 5009.85—2003第一法）、煙酸（維生素B3）（GB 5009.89—2016第二法）、葉酸（維生素B9）（GB 5009.211—2014）。

1.3.5?生物活性成分的測(cè)定?對(duì)于生物活性成分，分別測(cè)定了β-胡蘿卜素、甜菜堿、黃酮和?；撬岬暮俊＆?胡蘿卜素的含量根據(jù)GB 5009.83—2016進(jìn)行測(cè)定。甜菜堿的含量采用薄層掃描法進(jìn)行測(cè)定[9]。黃酮類(lèi)化合物采用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行測(cè)定[10]。?；撬岬暮坎捎梅止夤舛确y(cè)定[11]。

2?結(jié)果與分析

2.1?枸杞葉的基本組成

由表1可知，LL中富含蛋白質(zhì)、碳水化合物及礦物質(zhì)。隨著年份的增長(zhǎng)，蛋白質(zhì)和灰分呈上升趨勢(shì)，在第四年達(dá)到最大值;而碳水化合物和脂質(zhì)呈下降趨勢(shì)，在第一年達(dá)到最大值。但是總體來(lái)說(shuō)，這些組分并沒(méi)有明顯差異。值得注意的是，LL中的蛋白質(zhì)含量比常見(jiàn)的油菜、空心菜等綠葉蔬菜要高很多[12]，但是否能被利用還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。

2.2?礦物質(zhì)含量

由表2可知，LL富含礦物質(zhì)元素，其中礦物質(zhì)元素含量的高低順序?yàn)椋衡c>鉀>鈣>鋅>鐵。比較不同年份的LL中的礦物質(zhì)含量可以看出，四年生的LL中鈣含量較高，一年生的LL中鋅含量較高，兩年生的LL中鐵含量較高。由于西北地區(qū)海拔高，干旱，日照強(qiáng)烈，使LL富集許多次生代謝產(chǎn)物，以抵御惡劣的外部環(huán)境[13]。LL是高鈣、富含鐵和鋅的健康食品，每天食用50 g LL可以滿(mǎn)足90.9%、236%、86%、6.1%和31%的鈣、鐵、鋅、鉀和鈉的需求[14]，這說(shuō)明LL是一種很好的天然礦物質(zhì)補(bǔ)充劑。

2.3?氨基酸組成

由表3可知，LL含有18種氨基酸。在一年至四年的范圍內(nèi)，LL中必需氨基酸和總氨基酸含量隨年份增長(zhǎng)而下降。一年生的LL中必需氨基酸的含量為2.18 g/100 g，而四年生的LL中必需氨基酸含量?jī)H為一年生LL的63%;一年生的LL中總氨基酸的含量高達(dá)7.98 g/100 g，四年生的LL中總氨基酸的含量下降至5.23 g/100 g。然而總氨基酸含量?jī)H占蛋白質(zhì)含量的15%～25%，說(shuō)明LL中由凱氏定氮法測(cè)得的粗蛋白含量中較多為非蛋白氮，能被利用的蛋白質(zhì)較少。

2.4?B族維生素含量

B族維生素含量高低順序?yàn)椋壕S生素B3>維生素B2>維生素B1>維生素B9。由表4可知，在不同年份的LL中，三年生的LL的維生素B1、B2、B3含量最高，分別可以達(dá)到0.25、1.54、49.21 mg/100 g。維生素B1、B2、B3的膳食營(yíng)養(yǎng)素推薦攝入量（RNI）分別為1.4、1.4、14 mg/d[15]，因此，對(duì)于一個(gè)體重為60 kg的成年男性來(lái)說(shuō)，食用500 g新鮮LL可以滿(mǎn)足維生素B1、B2、B3的RNI的8.9%、55.0%、175.75%。這一結(jié)果表明，LL含有充足的維生素B1、B2、B3。一年生的LL中所含葉酸含量最高，達(dá)到了37.30 μg/100 g，而四年生的LL中葉酸含量最少，只有14.96 μg/100 g。前人研究表明，寧杞9號(hào)枸杞葉芽是B族維生素的良好來(lái)源[16]，這與我們的研究結(jié)果一致。

2.5?生物活性成分

不同年份的LL中，甜菜堿含量隨著生長(zhǎng)時(shí)間的變化而變化。由表5可知，四年生的LL所含甜菜堿含量最高，達(dá)到了981.50 mg/100 g，三年生的LL中甜菜堿含量最少，只有645.42 mg/100 g。兩年生的LL所含β-胡蘿卜素含量最高，達(dá)到了61.05 mg/100 g，其次是三年生的LL含量較高，為50.19 mg/100 g，而一年生的LL中β-胡蘿卜素含量較少，只有44.43 mg/100 g。黃酮和?；撬嵩贚L中的含量充足。四年生的LL所含?；撬岷孔罡撸_(dá)到了481.02 mg/100 g，而兩年生的LL中?；撬岷孔钌伲挥?05.32 mg/100 g。值得一提的是，?；撬釓V泛分布于動(dòng)物組織和細(xì)胞中，在植物中較為少見(jiàn)。但LL中牛磺酸含量極為豐富。雖然LL中的?；撬徇h(yuǎn)低于牡蠣（3.04 g/100 g）和烏賊（2.94 g/100 g）中的?；撬岷縖17-18]，但遠(yuǎn)高于大豆（0.31 mg/100 g）等大多數(shù)植物性食品[19]，這對(duì)LL的加工利用具有重要意義。一年生至三年生的LL中具有較高的黃酮含量，二年生能夠達(dá)到最大值1.97 g/100 g。天然植物的葉子是黃酮化合物的重要來(lái)源，研究表明，幼葉含有較多的生物活性物質(zhì)[20]，這與我們的試驗(yàn)結(jié)果相符。

3?結(jié)論

通過(guò)研究不同收獲年份的LL的營(yíng)養(yǎng)成分，發(fā)現(xiàn)LL富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，尤其是蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分以及B族維生素、?；撬岬壬锘钚猿煞?，具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。一年生的LL中鈉、鉀、氨基酸含量最高，三年生的LL中維生素B1、B2、B3含量最高，四年生的LL中蛋白質(zhì)、?；撬?、鈣含量最高。這為L(zhǎng)L采摘時(shí)間提供更精確的數(shù)據(jù)參考，為實(shí)際生產(chǎn)大規(guī)模、工業(yè)化地開(kāi)發(fā)LL產(chǎn)品提供科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]溫立香，劉功德，馮春梅，等.枸杞葉資源的研究進(jìn)展[J].大眾科技，2014，16（6）：146-149、154.

[2]陳雅林，譚芳，彭勇.枸杞葉的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2017，52（5）：358-361.

[3]項(xiàng)艷曾，等.桑葉及枸杞葉多糖的降糖降脂作用研究[J].長(zhǎng)治醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2018，32（6）：404-407.

[4]全娜，等.枸杞葉、果的抗氧化和抗DNA損傷活性研究[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2018，30（1）：134-140.

[5]汪高杰.菜用枸杞的露地栽培技術(shù)[J].林業(yè)實(shí)用技術(shù)，2002（8）：35.

[6]李強(qiáng).不同采收期枸杞葉片中類(lèi)黃酮含量的變化規(guī)律研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2016（22）：59-60.

[7]Braga M C，et al.Curcuma longa，L.Leaves：Characterization（bioactive and antinutritional compounds）for use in Human Food in Brazil[J].Food Chemistry，2018，265：308-315.

[8]李克劍，李伊姣，王儲(chǔ)，等.菜用枸杞葉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及營(yíng)養(yǎng)等級(jí)評(píng)價(jià)[J].中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng)，2016，22（4）：69-73.

[9]Hefni M E，Schaller F，WitthFt C M.Betaine，choline and folate content in different cereal genotypes[J].Journal of Cereal Science，2018（80）72-79.

[10]陳仕學(xué)，等.HPLC法測(cè)定梵凈山野生八角蓮中黃酮類(lèi)化合物的含量[J].山東化工，2018，47（18）：64-67.

[11]劉天紅，王穎，李紅艷，等.魁蚶加工副產(chǎn)物中?；撬岷繙y(cè)定方法的建立和優(yōu)化[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2018，9（8）：1865-1873.

[12]邵世勤，等.不同類(lèi)蔬菜品種營(yíng)養(yǎng)成分含量的研究（Ⅱ）[J].內(nèi)蒙古農(nóng)牧學(xué)院學(xué)報(bào)，1994（3）：42-46.

[13]Olatunji O J，Chen H，Zhou Y.Lycium chinense，leaves extract ameliorates diabetic nephropathy by suppressing hyperglycemia mediated renal oxidative stress and inflammation[J].Biomedicine & Pharmacotherapy，2018，102：1145-1151.

[14]馮月明，等.2010年某區(qū)城鄉(xiāng)居民膳食營(yíng)養(yǎng)狀況的分析[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2014，12（15）：48-49、51.

[15]周蔚，夏蒨，李香亭，等.上海市楊浦區(qū)居民不同季節(jié)膳食微量營(yíng)養(yǎng)素的攝入狀況[J].環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué)，2018，35（6）：511-515.

[16]王婭麗，劉思洋，邵千順，等.寧杞9號(hào)枸杞葉芽營(yíng)養(yǎng)成分分析[J].經(jīng)濟(jì)林研究，2015，33（4）：106-110.

[17]錢(qián)炳俊，等.干制牡蠣營(yíng)養(yǎng)成分分析及其提取工藝的建立[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，45（7）：152-156.

[18]邢德，等.5種頭足類(lèi)不同組織膽固醇和?；撬岷康臏y(cè)定和分析[J].海洋湖沼通報(bào)，2018（2）：125-130.

[19]Pasantes-Morales H，F(xiàn)lores R.Taurine content of Mexican beans[J].Journal of Food Composition and Analysis，1991，4（4）：322-328.

[20]張玥，周瑞蓮，梁慧敏，等.白三葉不同葉齡葉片對(duì)不同季節(jié)溫度適應(yīng)的生理調(diào)控機(jī)理[J].生態(tài)學(xué)雜志，2016，35（7）：1713-1720.