胡志平，陸廷祥，韓忠耀，王傳明，劉 杰

(黔南民族醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，貴州 都勻 558013)

燈心草為燈心草科植物JuncuseffususL.的干燥莖髓[1-2]，主要分布于我國西南地區(qū)和長(zhǎng)江流域以北。前期查閱文獻(xiàn)[3-4]可知，燈心草中的菲類化合物具有較好的抗氧化、抗焦躁等活性。其中抗焦躁活性能夠很好地解釋燈心草靜心安神的傳統(tǒng)功效，加上貴州特色炮制方式拌朱砂衣，可以加強(qiáng)其鎮(zhèn)靜安神之功效，使得燈心草在小便不利、心煩失眠和口舌生瘡等疾病方面有良好的療效[5]。本研究對(duì)燈心草生品及其炮制品進(jìn)行性狀和薄層色譜的鑒別，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

LX-05多功能粉碎機(jī)(上海江信科技有限公司)；GoodSee-20E薄層色譜成像系統(tǒng)(上?？普苌萍加邢薰?；BSA224S電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)；TS-Ⅱ雙噴頭超細(xì)噴霧器(上海科哲生化科技有限公司)；SP-Ⅱ電動(dòng)點(diǎn)樣器(上海科哲生化科技有限公司)；GZX-9070電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)；SX-2.5-R型箱式電阻爐(天津市泰斯特儀器有限公司)；WFH-203B三用紫外分析儀(上海精科實(shí)業(yè)有限公司)；HH-6恒溫水浴鍋(常州澳華儀器有限公司)；燈心草對(duì)照藥材(貴州迪達(dá)生物科技，DZYC0228)；甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、環(huán)己烷、甲酸、乙酸、磷鉬酸等均為色譜純，無水乙醇為分析純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 燈心草及炮制品制備

燈心草：取原藥材，除去雜質(zhì)，切成約3 cm長(zhǎng)的節(jié)段。

朱燈心草：取凈燈心草段，用少量清水噴濕，分次撒入水飛朱砂并拌勻，晾干。每100 kg凈燈心草用水飛朱砂6 kg。

燈心草炭：取凈燈心草，扎成小把，置于煅鍋內(nèi)，上扣一口徑較小的鍋，接合處以濕宣紙密封并加蛤粉堆填，在蓋鍋上放數(shù)粒大米，以武火加熱，煅至大米呈焦黃色時(shí)熄火，待鍋涼透后，取出[4-5]。

2.2 飲片性狀鑒別

燈心草生品呈細(xì)圓柱形，長(zhǎng)達(dá)90 cm，直徑0.1～0.3 cm。表面白色或淡黃白色，有細(xì)縱紋。體輕，質(zhì)軟，略有彈性，易拉斷，斷面白色。氣微，味淡[4-5]。

朱燈心草形同燈心草，表面呈均勻的粉紅色。

燈心草炭形同燈心草，表面黑色，體輕松，質(zhì)脆易碎，氣微，味微澀。

2.3 薄層色譜鑒別

2.3.1 供試品溶液及對(duì)照藥材溶液制備 取本品粉末1 g，加甲醇100 mL，加熱回流1 h，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)靡颐? mL洗滌，棄去乙醚液，加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取燈心草對(duì)照藥材1 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。

2.3.2 燈心草TLC不同展開系統(tǒng)考察 現(xiàn)以燈心草對(duì)照藥材(貴州迪達(dá)生物科技，DZYC0228)作為對(duì)照品對(duì)其進(jìn)行薄層鑒別。參照2015年版薄層色譜法(《中國藥典》四部通則0502)，吸取供試品溶液3 μL、對(duì)照藥材溶液3 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，分別以環(huán)己烷-乙酸乙酯(10∶7)、二氯甲烷-甲醇-甲酸(10∶0.1∶0.2)作為展開劑，展開完成后取出，以10%磷鉬酸乙醇液作為顯色劑，于105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。通過比較分析發(fā)現(xiàn)，圖1與圖2中各成分主斑點(diǎn)未展開，經(jīng)調(diào)整后以二氯甲烷-甲醇-甲酸(10∶0.1∶0.5)為展開劑的薄層色譜圖斑點(diǎn)清晰，結(jié)果見圖3。故選擇二氯甲烷-甲醇-甲酸(10∶0.1∶0.5)為本次薄層實(shí)驗(yàn)的展開劑。

圖1 環(huán)己烷-乙酸乙酯(10∶7)

圖3 二氯甲烷-甲醇-甲酸(10∶0.1∶0.5)

2.3.3 燈心草TLC不同顯色劑考察 現(xiàn)以燈心草對(duì)照藥材(貴州迪達(dá)生物科技，DZYC0228)作為對(duì)照品對(duì)其進(jìn)行薄層鑒別。參照2015年版薄層色譜法(《中國藥典》四部通則0502)，吸取供試品溶液3 μL、對(duì)照藥材溶液3 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-甲醇-甲酸(10∶0.1∶0.5)作為展開劑，展開完全后，分別以10%硫酸乙醇、10%磷鉬酸乙醇液作為顯色劑，于105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。通過比較分析發(fā)現(xiàn)，圖4中主斑點(diǎn)清晰顯色明顯，可選為本次薄層實(shí)驗(yàn)的顯色劑；而圖5中各成分主斑點(diǎn)未完全顯示，故而不選擇。

圖4 10%磷鉬酸乙醇液

圖5 10%硫酸乙醇液

2.3.4 燈心草TLC不同硅膠板考察 現(xiàn)以燈心草對(duì)照藥材(貴州迪達(dá)生物科技，DZYC0228)作為對(duì)照品對(duì)其進(jìn)行薄層鑒別。按照2015年版薄層色譜法(《中國藥典》四部通則0502)，吸取供試品溶液3 μL、對(duì)照藥材溶液3 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，分別以硅膠G板、硅膠GF254板、硅膠H板作為固定相，以二氯甲烷-甲醇-甲酸(10∶0.1∶0.5)作為展開劑，展開完全后，以10%磷鉬酸乙醇液作為顯色劑，于105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。通過比較分析發(fā)現(xiàn)，圖6中各成分斑點(diǎn)顯示清晰，分離度高，故而可選為本次薄層實(shí)驗(yàn)的固定相。而圖7中各成分斑點(diǎn)未顯示，圖8中各成分主斑點(diǎn)拖尾嚴(yán)重，故而不選擇兩者。

圖6 硅膠G板青島海洋化工廠分廠(批號(hào)20160208)

圖7 硅膠GF254板青島海洋化工廠分廠(批號(hào)20170428)

圖8 硅膠H板青島海洋化工廠分廠(批號(hào)20181030)

綜上所述，本次薄層實(shí)驗(yàn)選用硅膠G板為固定相，二氯甲烷-甲醇-甲酸(10∶0.1∶0.5)為展開劑，10%磷鉬酸乙醇液為顯色劑。

2.3.5 薄層色譜結(jié)果 參照2015年版《中國藥典》四部(通則0502)薄層色譜法，吸取供試品溶液3 μL、對(duì)照藥材溶液3 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-甲醇-甲酸(10∶0.1∶0.5)為展開劑展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，于105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。燈心草生品、朱砂拌燈心草供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)，結(jié)果見圖9、圖10。燈心草炭供試品色譜在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，并未顯相同顏色的主斑點(diǎn)，見圖11。燈心草生品、燈心草炭及朱砂拌燈心草TLC見圖12。

1-重慶眾景；2-浙江；3-安順；4-福建；5-云南；6-江蘇；7-三橋批發(fā)市場(chǎng)；8-甘肅蘭州榆中；9-不明產(chǎn)地；10-李繼新學(xué)生；C-燈心草對(duì)照品藥材

1-重慶眾景；2-浙江；3-安順；4-福建；5-云南；6-江蘇；7-三橋批發(fā)市場(chǎng)；8-甘肅蘭州榆中；9-不明產(chǎn)地；10-李繼新學(xué)生；C-燈心草對(duì)照品藥材

1-重慶眾景；2-浙江；3-安順；4-福建；5-云南；6-江蘇；7-三橋批發(fā)市場(chǎng)；8-甘肅蘭州榆中；9-不明產(chǎn)地；10-李繼新學(xué)生；C-燈心草對(duì)照品藥材

1-燈心草生品(重慶眾景)；2-燈心草生品(浙江)；3-燈心草炭(重慶眾景)；4-燈心草炭(浙江)；5-朱砂拌燈心草(重慶眾景)；6-朱砂拌燈心草(浙江)；C-燈心草對(duì)照品藥材

3 討論

燈心草生品與朱砂拌燈心草的供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)，表明燈心草生品和朱砂拌燈心草中均含有與對(duì)照藥材相同的物質(zhì)。而燈心草炭的TLC色譜圖中，并未發(fā)現(xiàn)與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的主斑點(diǎn)，據(jù)此推測(cè)燈心草經(jīng)過高溫密閉的炮制環(huán)境，其內(nèi)在化學(xué)成分發(fā)生了變化，故在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上的主斑點(diǎn)消失[7-12]。

本實(shí)驗(yàn)通過綜合考察展開系統(tǒng)、顯色系統(tǒng)等因素，建立了燈心草及其炮制品的薄層色譜鑒別方法，為燈心草、煅燈心草及朱砂拌燈心草飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供了參考依據(jù)。