□ 劉彥泓 大連市檢驗檢測認證技術服務中心

隨著人們生活水平的不斷提高，越來越多的肉類制品被擺上了餐桌。為了利益最大化，有不發(fā)商販摻假銷售，更有甚者把不可食用動物的肉添加到商品中出售，嚴重損害消費者利益。同時，動物源性飼料中違規(guī)摻雜禁用成分的情況也很嚴重。如果動物源性飼料細菌超標或者違法添加了禁用物質，就有可能使飼養(yǎng)的禽畜生病，甚至導致食用者患病。為了保障人們的食品安全，保障動物源性飼料的質量安全，對肉類食品及飼料進行動物源性鑒定是非常必要的。

1 動物源性成分檢測技術研究進展

有資料表明20世紀80年代，國外學者開始研究肉的種屬鑒定檢測，到目前為止國內外均由很多相關報道。其中國內外動物源性成分檢驗方法主要有兩種：核酸檢測和蛋白質檢測。核酸檢測方法主要包括普通PCR、實時熒光PCR、數(shù)字PCR、環(huán)介導等溫擴增（LAMP）、重組酶介導鏈替換核酸擴增法（RAA法）、試紙片法、基因芯片檢測、膜芯片法、液相芯片法、顯微鏡法與二代測序等。每一種檢測方法都有各自的特點及優(yōu)勢，可以從不同方面反映材料的真實情況。在實際檢測工作中，由于食品或原材料的加工方法不同，還應根據(jù)樣品的不同加工方式選擇適用的檢測方法進行檢測。眾多的研究資料表明最為快速準確的方法是PCR方法[1]，其中探針法實時熒光PCR檢測的準確性和便捷性在所有的檢測方法中最為突出，對檢測設備和檢測人員的要求也不高，容易掌握。目前現(xiàn)行有效的檢測方法中以實時熒光PCR方法最多。

2 現(xiàn)行動物源性成分檢測標準方法

目前，我國已發(fā)布的現(xiàn)行有效的動物源性成分檢測方法主要有：國家標準18項（表1），行業(yè)標準35項（表2），地方標準及其他標準20項（表3）。其中以PCR和實時熒光PCR檢測方法為主。這些標準方法可以檢測出不同種類的動物源性成分，適用范圍也各不相同，檢測人員可以根據(jù)需求自主選擇。目前頒布的這些標準方法基本涵蓋了常見的動物源性成分，可以檢測日常食品及飼料中可能會遇到的肉源性種類。

表1 動物源性成分檢測方法（國家標準）

表2 動物源性成分檢測方法（行業(yè)標準）

表3 動物源性成分檢測方法（地方標準及其他標準）

3 討論與建議

目前我國現(xiàn)行的動物源性成分的檢測方法以普通PCR方法和實時熒光PCR檢測方法為主。對于動物源性檢測，最常采用的就是PCR檢測方法。實時熒光PCR檢測的優(yōu)勢就是靈敏度高，能夠減少工作量、縮短檢測時間[2]，因此目前發(fā)布的檢測標準方法以實時熒光PCR檢測方法為主。由于食品及飼料在加工過程中可能經過高溫或油炸等處理，樣品的總DNA結構被破壞，因此檢測時一般選擇短片段進行鑒定檢測[3—4]。在日常檢測時，容易形成氣溶膠污染環(huán)境，導致實驗結果出現(xiàn)假陽性。為避免出現(xiàn)氣溶膠污染，需要檢測人員特別注意質量控制，做好陰性、陽性、空白對照。3種對照應該至少2個平行，并且空白對照應該包括樣品DNA提取空白對照和PCR過程空白對照，任何一個對照結果不正常均需要重新實驗。同時也要特別注意實驗室的日常清潔，有條件的實驗室可將擺放PCR擴增儀的房間設計成負壓實驗室，有效避免高濃度的氣溶膠泄漏。另外在實驗過程中實驗人員應時刻注意避免溶劑噴濺、氣溶膠等造成的污染。