杜云鶴
2020年新冠肺炎就如同一場沒有硝煙的戰(zhàn)爭在全球蔓延,對全人類的生活造成了極大影響。假期小劉去青島旅游,但是在旅游結(jié)束后卻聽到當?shù)赜行鹿诜窝滓咔槌霈F(xiàn),于是小劉很快就做好防護,到當?shù)氐尼t(yī)院進行檢測,但是聽說新冠病毒實驗室檢測有病毒核酸和血清抗體兩種檢測方法,到底是要檢測哪一個?還是都要檢測呢?有什么區(qū)別和聯(lián)系嗎?對于這個問題,就讓我們一起來認識一下新冠病毒實驗室檢測方法吧!
1新型冠狀病毒核酸檢測
在已知生命體中,核酸是十分重要的組成部分,核酸的工作是對遺傳信息的攜帶,脫氧核糖核酸(DNA)與核糖核酸(RNA)是兩個主要類型。RNA是新型冠狀病毒攜帶的核酸物質(zhì),類似于病毒的“指紋”,而且分子排列比較獨特。用特用的技術(shù)可以對新冠進行核酸檢測,然后可以在RNA的尋找下,確定病毒是否存在。實時熒光RT-PCR方法因為出結(jié)果較快(4~6 h),是目前常用的新冠病毒核酸檢測技術(shù),檢測過程主要分為三步:
1.1 提取病毒的 RNA
病毒RNA的提取,較為常見的方式就是咽拭子、鼻拭子等,通過對標本的采集,然后將核酸提取試劑加進去,對病毒的外殼進行破壞,殼內(nèi)的RNA核酸得以釋放。
1.2 把病毒 RNA“反轉(zhuǎn)錄”成 cDNA
這個步驟其實也不復雜,在反轉(zhuǎn)錄技術(shù)(RT)的應用下,可以實現(xiàn)單鏈 RNA的配對,然后就可以組成雙鏈 DNA——cDNA。這是由于病毒 RNA的結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,極易碎掉,所以為了讓其更加穩(wěn)定,能為后期的檢測提供支持,就要轉(zhuǎn)化結(jié)構(gòu)。
1.3 進行病毒 cDNA 的擴增與檢測
cDNA可以在 PCR 技術(shù)的應用下進行大量的復制。所以 cDNA 的雙鏈與衣服的拉鏈類似,拉開拉鏈的過程其實就是PCR 的過程, cDNA分為兩個拉鏈,雙鏈需要經(jīng)過配對才能使用。兩條拉鏈不斷復制的過程,其實就是新冠病毒 cDNA增長的過程,試劑盒中熒光探針在cDNA擴增期間,也開始工作,這時熒光信號被釋放,cDNA的每次增長,就會讓信號增強,熒光信號的增加Ct值也就可以通過PCR檢測儀記錄,然后就可以通過Ct值的分析,得出對應的結(jié)果。
核酸檢測在實際應用中,其實是對病原體的指紋進行檢測,具有較高的精準性,核酸也是病毒入侵后最先產(chǎn)生的,所以在診斷期間,核酸檢測發(fā)揮著積極作用。但是就檢測來看,不可避免誤差。如果檢測出來的結(jié)果為陰性,這時也難以排除受檢者是否患有新冠,需要對假陰性的因素進行排除如當樣本質(zhì)量不好時,樣本沒有提取到病毒感染部位,或者樣本中沒有病毒等,也會出現(xiàn)假陰性的可能。還有受到檢測技術(shù)、運輸?shù)雀鞣N因素的影響,也會出現(xiàn)假陰性的情況。
2新型冠狀病毒血清抗體檢測
人體在受到病毒入侵后,機體就會進行自我調(diào)節(jié),對病原體進行抵抗,然后產(chǎn)生特異性抗體。在新冠病毒的檢測上,可以通過血液樣本的檢測,來對患者是否有新冠病毒的特異性抗體進行判斷,這樣就有為新冠的確證提供了依據(jù)。
新冠病毒血清特異性抗體檢測主要有IgM、Igg兩種,IgM是近期感染的標志,在確診后的4 d以內(nèi)就可以檢出IgM抗體,而且峰值在15 d左右達到頂峰;Igg抗體檢出則需要7 d,而且隨著時間延長檢出率持續(xù)上升。在新冠病毒的助診斷中,血清Igg和IgM抗體是比較有效的診斷方法,Igg和IgM聯(lián)合檢測可提高診斷敏感性,同時也可以檢測感染者體內(nèi)特異性抗體的變化情況、人群的易感狀況等,有助于疾病的防治和疫苗研發(fā)。常用的檢測方法有膠體金、磁微?;瘜W發(fā)光、ELISA,操作起來較核酸檢測簡便、快捷、成本低等優(yōu)勢。
就血清學檢測來看,在實際應用中依然存在有一定不足,就算抗體出現(xiàn)的再早,要想到達一定對檢測水平,也需要一段時間,所以在初期的檢測期間,結(jié)果極有可能是假陰性。而且檢測用的標準抗原相互作用的抗體可能會存在于血液中,也就是說會發(fā)生交叉反應,從而在假陽性的誤導下,讓醫(yī)務(wù)人員出現(xiàn)誤診。
3小結(jié)
通過以上了解,我們知道兩種檢測方法各有利弊,應客觀對待其不同,合理應用,兩種方法的聯(lián)合使用,則可以更有效發(fā)現(xiàn)病毒,讓病毒無處遁形。同時在選擇上,我們更應根據(jù)當?shù)氐姆酪吖ぷ饕箝_展檢測,像小劉這種剛剛從疫區(qū)回來人員,為防止再傳播及提高檢測準確性,還應集中隔離使用多種方法多次檢測。總之,疫情防控期間大家要積極配合醫(yī)務(wù)人員的建議與指導,及時發(fā)現(xiàn)感染病例,維護自身和全社會的公共衛(wèi)生安全。