張寶龍 曲 木 趙子續(xù) 劉昕陽 唐子鵬 翟勝利

天津市晨輝飼料有限公司/ 天津市水族動(dòng)物功能性飼料企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津301800

小球藻（Chorella vulgaris）為單細(xì)胞綠藻，屬于綠藻門（Chlorophyta）、綠藻綱（Chlorophyceae）、小球藻科（Chorella vulgarisceae）[1]。小球藻富含藻多糖、脂肪酸、糖蛋白和維生素等營養(yǎng)成分，具有降血壓、降血脂、增強(qiáng)免疫力的功能[2]，小球藻的蛋白含量很高，優(yōu)于其他植物蛋白源，廣泛應(yīng)用在食品、飼料等行業(yè)[3]，小球藻分布廣，且營養(yǎng)方式具有多樣性，還能有效利用CO2，產(chǎn)生氧氣[4]。小球藻能增加水體中的營養(yǎng)物質(zhì)，含有豐富的葉綠素。近年來，小球藻的發(fā)展逐漸被重視起來。萬壽菊（Tagetes erecta L.）屬菊科的一種草本植物，在萬壽菊的鮮花中提取葉黃素已廣泛用于醫(yī)藥、飼料行業(yè)[5]。葉黃素是一類重要的類胡蘿卜素，具有抗氧化性，青貯的芳香氣味，呈橘紅或橙黃[6]。魚類自身可以合成黑色素，但不能合成類胡蘿卜素，因此萬壽菊粉作為天然的著色劑添加在飼料中。

錦鯉（Cyprinus carpio）以其絢麗的色彩和華麗的斑紋而享譽(yù)世界，黃金鯉屬錦鯉的一個(gè)類別，黃金鯉全身呈金黃色，于1969年出現(xiàn)，與其他品種錦鯉雜交可以產(chǎn)出皮光鯉[7]。錦鯉由鯉突變體系經(jīng)人工選育而形成，錦鯉的體色是錦鯉價(jià)值的體現(xiàn)，因此本文探究了基礎(chǔ)飼料中添加萬壽菊粉及小球藻對(duì)黃金鯉生長及體色的影響，以期為研究黃金鯉飼料增色劑提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚與養(yǎng)殖管理

本試驗(yàn)在天津市晨輝飼料有限公司循環(huán)水養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，試驗(yàn)魚黃金鯉購自天津萬國水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司。購置的魚經(jīng)過消毒后在養(yǎng)殖池中暫養(yǎng)14 d，暫養(yǎng)結(jié)束后挑選無病及規(guī)格一致的黃金鯉900尾，隨機(jī)分成10 個(gè)處理（其中不添加組為對(duì)照組），每個(gè)梯度3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30 尾。養(yǎng)殖周期為56 d，日投喂量為體重的2%～4%（視試驗(yàn)魚吃食情況調(diào)整），投喂時(shí)間為每天08:30、15:30。養(yǎng)殖過程中定期檢測水質(zhì)，每天記錄水溫、死亡條數(shù)及投餌量。

1.2 試驗(yàn)飼料

選用萬壽菊粉（葉黃素有效含量2%）、小球藻粉（有效含量100%）為添加劑，以魚粉、豆粕、谷朊粉為蛋白源，以豆油、魚油為脂肪源，用雙因素（3×3 因子）試驗(yàn)設(shè)計(jì)9 種飼料，各設(shè)3 個(gè)梯度，分別為萬壽菊粉（400、800、1 600 mg/kg；葉黃素有效含量為8、16、32 mg/kg）、小球藻（50、100、150 mg/kg），依次記為D1，D2，D3，D4，D5，D6，D7，D8，D9，以不添加萬壽菊粉和小球藻粉的基礎(chǔ)飼料為對(duì)照組（表1-表2）。

1.3 指標(biāo)測定

1）生長指標(biāo)測定。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后禁食48 h，每個(gè)平行選取10 尾黃金鯉，測定其體重、體長、全長、體高、體寬等指標(biāo)，用于生長指標(biāo)的計(jì)算。

增重率（WGR，%）=100×（Wt-W0）/W0；

特定生長率（SGR，%/d）)=100×（lnWt-lnW0）/t；

餌料系數(shù)（FCR）=F/（Wt-W0）；

蛋白質(zhì)效率（PER）=（Wt-W0）/（F×CP）；

肥滿度（CF，%）=100×Wt/Lt3；

肝體指數(shù)（HSI，%）=100×Wg/Wt；

式中：Wt 為終末體重（g）；W0 為初始體重（g）；Lt 為終末體長（cm）；t為試驗(yàn)天數(shù)（d）；F為飼料攝入量干重（g）；Wg 為肝胰臟重（g）；CP 為飼料粗蛋白質(zhì)含量。

2）體表L*、a*、b*值測定。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)平行隨機(jī)選取10 尾黃金鯉用色差儀（CR400）測定背部及鰭條基部L*、a*、b*值。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)結(jié)果均用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行分析（平均值±標(biāo)準(zhǔn)差），用Duncan’s 多重比較分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)黃金鯉生長性能和飼料利用的影響

投喂不同水平萬壽菊粉和小球藻飼料56 d后，對(duì)黃金鯉生長指標(biāo)進(jìn)行檢測。通過統(tǒng)計(jì)分析可知，在增重率、特定生長率和餌料系數(shù)方面：試驗(yàn)組與對(duì)照組差異顯著（P<0.05），試驗(yàn)組中D2 和D9 2組較為明顯。蛋白質(zhì)效率方面：試驗(yàn)組中D2 和D9 2 組與對(duì)照組差異顯著（P<0.05），其余組與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05）（表3）。

2.2 對(duì)黃金鯉形體指標(biāo)的影響

在肥滿度方面：除試驗(yàn)組中D9 外，其余組均與對(duì)照組有顯著差異（P<0.05），D1 和D4 2 組較為明顯，肝體指數(shù)方面試驗(yàn)組與對(duì)照組無顯著差異（P>0.05）。飼料萬壽菊粉水平對(duì)魚體肥滿度有顯著影響（P<0.05），與0.16%萬壽菊粉水平相比，0.04%和0.08%萬壽菊粉組魚體肥滿度分別降低了7.06%和6.89%（P<0.05）；與0.16%萬壽菊粉水平相比，0.04%萬壽菊粉組肝體指數(shù)降低了2.57%（P<0.05），0.08%萬壽菊粉組肝體指數(shù)差異不顯著（P>0.05）。小球藻水平對(duì)魚體生長指標(biāo)無顯著影響（P>0.05），萬壽菊粉和小球藻的交互作用對(duì)魚體生長指標(biāo)無顯著影響（P>0.05）（表4）。

表1 飼料配方表 %

表2 飼料營養(yǎng)成分表 %

2.3 對(duì)黃金鯉體色變化的影響

在養(yǎng)殖的各個(gè)階段用色差儀測定黃金鯉背肌部分及鰓蓋部分的色度值（L*亮度，+L*代表樣品偏亮白，-L*代表偏暗黑；a*紅度，+a*代表樣品偏紅，-a*代表樣品偏綠；b*黃度，+b*代表樣品偏黃，-b*代表樣品偏藍(lán)），結(jié)果如下：隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長，黃金鯉背肌亮度值總體呈上升趨勢，第2 組和第9 組呈現(xiàn)出較快的增長速度，在養(yǎng)殖的各個(gè)取樣點(diǎn)背肌L*值都顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05）；在養(yǎng)殖末期，第9組黃金鯉背肌L*的增長量最大，且顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05）（表5）。

隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長，黃金鯉背肌紅度值總體呈下降趨勢，第2 組和第9 組下降較快，在養(yǎng)殖的各個(gè)取樣點(diǎn)背肌a*值都顯著低于其他試驗(yàn)組（P<0.05）；在養(yǎng)殖末期，第2 組、第9 組黃金鯉背肌a*值降低量最大，且顯著低于其他試驗(yàn)組（P<0.05）（表6）。

隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長，黃金鯉背肌黃度值總體呈上升趨勢，第2 組和第9 組上升較快，在養(yǎng)殖的各個(gè)取樣點(diǎn)背肌b*值都顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05）；在養(yǎng)殖末期，第2 組、第9 組黃金鯉背肌b*值增長量最大，且顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05）（表7）。

隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長，黃金鯉鰓亮度值總體呈上升趨勢，第2 組和第9 組上升較快，在養(yǎng)殖的各個(gè)取樣點(diǎn)鰓L*值都顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05）；在養(yǎng)殖末期，第2 組、第9 組黃金鯉鰓L*值增長量最大，且顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05）（表8）。

隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長，黃金鯉鰓紅度值總體呈下降趨勢，第2 組和第9 組下降較快，在養(yǎng)殖的各個(gè)取樣點(diǎn)鰓a*值都顯著低于其他試驗(yàn)組（P<0.05）；在養(yǎng)殖末期，第2 組、第9 組黃金鯉鰓a*值降低量最大，且顯著低于其他試驗(yàn)組（P<0.05）（表9）。

隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長，黃金鯉鰓黃度值總體呈上升趨勢，第2 組和第9 組上升較快，在養(yǎng)殖的各個(gè)取樣點(diǎn)鰓b*值都顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05）；在養(yǎng)殖末期，第2 組、第9 組黃金鯉鰓b*值增加量最大，且顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05）（表10）。

表3 各組飼料對(duì)黃金鯉增重率、特定生長率、餌料系數(shù)及蛋白質(zhì)效率的影響

3 討 論

3.1 飼料中添加萬壽菊粉、小球藻對(duì)黃金鯉生長的影響

小球藻生長旺盛并成為優(yōu)勢種是良好水質(zhì)的重要標(biāo)志，容易被魚類等消化吸收，在飼料中添加小球藻可顯著提高養(yǎng)殖對(duì)象的增重率[8-9]。萬壽菊粉對(duì)黃金鯉生長有顯著的促進(jìn)作用，當(dāng)其單一添加量為4%時(shí)，作用顯著[10]。在基礎(chǔ)餌料中添加不同梯度小球藻后，各組黃金鯉的增重率等呈上升的趨勢，D2 和D9 處理組增重率高于對(duì)照組。崔培等[11]用添加了1%的小球藻飼喂非洲王子魚，發(fā)現(xiàn)其生長無顯著差異，這種差異可能是由于研究對(duì)象的不同而產(chǎn)生的，也有可能是由于本試驗(yàn)是將萬壽菊粉與小球藻同時(shí)添加到飼料中，二者對(duì)各自的促生長性能起到了一定的協(xié)同促進(jìn)作用。肝指數(shù)的數(shù)值低時(shí)可使魚體的負(fù)荷達(dá)到自身可調(diào)節(jié)范圍內(nèi)。丁小峰[12]研究表明，將金黃素、金橘黃以及加麗素紅添加在黃顙魚的餌料中，內(nèi)臟比和肝體比沒有出現(xiàn)升高或降低。本試驗(yàn)添加不同梯度的小球藻和萬壽菊粉在黃金鯉的餌料中，內(nèi)臟比和肝體比也表現(xiàn)出相同的趨勢。

表4 各組飼料對(duì)黃金鯉形體指標(biāo)的影響 %

表5 各組飼料對(duì)黃金鯉背肌的L*值的影響

3.2 飼料中添加萬壽菊粉、小球藻對(duì)黃金鯉體色的影響

萬壽菊粉是提取葉黃素后的副產(chǎn)物，具有青貯的芳香氣味，從而有效改善動(dòng)物體色。孫建民等[7]得出，以源自萬壽菊粉的葉黃素76.25 mg/kg 投喂黃顙魚，黃顙魚皮膚著色最佳；冷向軍等[13]在飼料中添加150 mg/kg 葉黃素，發(fā)現(xiàn)可以顯著改善金魚體色。宋雪璐等[14]在飼料中添加葉黃素可有效改善七彩神仙魚的體表黃色。張寶龍等[15]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中萬壽菊粉添加量為6%時(shí)，黃顙魚腹部皮膚著色較好，呈鮮艷的黃色。本試驗(yàn)通過投喂黃金鯉不同梯度的小球藻和萬壽菊粉餌料，餌料中添加萬壽菊粉（0.04%）和小球藻（0.02%）對(duì)黃金鯉增色最佳，色度值在15～56 d 之間處于不斷上升變化，0～15 d 增色較緩，30～56 d 增色呈上升的趨勢，餌料中萬壽菊粉與小球藻共同作用使黃金鯉體色增加更快。

表6 各組飼料對(duì)黃金鯉背肌的a*值的影響

表8 各組飼料對(duì)黃金鯉鰓的L*值的影響

表9 各組飼料對(duì)黃金鯉鰓的a*值的影響

表10 各組飼料對(duì)黃金鯉鰓的b 值（黃度）的影響

4 結(jié) 論

萬壽菊粉與小球藻共同促進(jìn)黃金鯉的生長，使體色著色更佳。為考慮經(jīng)濟(jì)效益，建議萬壽菊粉添加量為0.04%、小球藻添加量為0.02%較為適宜。