阿不拉江·托合提 程秀琴 阿布利克木·依明 卡衣賽爾·卡哈爾

（新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院耳鼻咽喉科 新疆 烏魯木齊 830001）

慢性化膿性中耳炎、中耳膽脂瘤屬于常見(jiàn)慢性炎性疾病，與病毒、細(xì)菌等感染具有密切聯(lián)系，對(duì)患者生活質(zhì)量造成一定影響[1]。研究表示，中耳黏膜具有一定免疫系統(tǒng)，可引起炎癥反應(yīng)，且中耳炎的發(fā)生與機(jī)體免疫調(diào)節(jié)不平衡相關(guān)。Toll 樣受體2（TLR2）及Toll 樣受體4（TLR4）與中耳免疫調(diào)節(jié)具有一定關(guān)系，其可維持中耳正常功能，當(dāng)基因突變可能加重中耳炎癥狀[2]。研究表示，明確TLR2、TLR4 在中耳炎及中耳膽脂瘤中的表達(dá)，可為臨床診治提供重要基礎(chǔ)，但目前臨床對(duì)其研究并不多見(jiàn)。本研究旨在探討TLR2 及TLR4 在慢性化膿性中耳炎與中耳膽脂瘤中的表達(dá)差異。

1.資料與方法

1.1 一般資料

回顧性收集2018 年1 月—2019 年6 月本院接收的45 例慢性化膿性中耳炎患者、37 例中耳膽脂瘤患者，分為將其設(shè)為中耳炎組、中耳膽脂瘤組；另收集同期本院體檢中心接收的43 例健康體檢者，將其設(shè)為對(duì)照組?；颊吲R床資料均完整。3 組一般資料，差異無(wú)顯著意義（P＞0.05）。

1.2 免疫組化染色定位分析法

同一醫(yī)師鉗取所有受檢者肉芽組織，將所取標(biāo)本液氮冷凍，手術(shù)結(jié)束后放入冰箱中備用。取標(biāo)本組織進(jìn)行固定，常規(guī)石蠟包埋及切片，進(jìn)行常規(guī)脫蠟及水化，采用枸櫞酸鈉緩沖液修復(fù)抗原，用0.01mol/L PBS 漂洗3 次，3min/次；滴加一抗，30～40uL/片，孵育過(guò)夜；取出濕盒，于室溫放置30min；滴加二抗，30 ～40uL/片，維持30min，吸去封閉液。陰性對(duì)照加同種型抗人酶結(jié)合物（IgG），檢測(cè)切片分別滴加兔抗人TLR2抗體、兔抗人TLR4 抗體，孵育過(guò)夜，PBS 漂洗3 次。免疫組化試劑盒均由武漢博士德公司提供；任選5 個(gè)200 倍視野，計(jì)數(shù)TLR2 與TLR4 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。對(duì)比TLR2、TLR4 在三組受檢者中耳肉芽組織中的表達(dá)差異。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，三組間比較采用單因素方差分析檢驗(yàn)，兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

三組標(biāo)本中TLR2、TLR4 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)對(duì)比 三組中中耳膽脂瘤組TLR2、TLR4 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)最高，其次是中耳炎組，對(duì)照組最低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 三組標(biāo)本中TLR2、TLR4 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)（±s，個(gè)/200 倍視野）

表1 三組標(biāo)本中TLR2、TLR4 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)（±s，個(gè)/200 倍視野）

注：與對(duì)照組比，aP ＜0.05；與中耳炎組比，bP ＜0.05。

組別 例數(shù) TLR2 TLR4中耳炎組 45 110.12±11.32a 98.14±11.01a中耳膽脂瘤組 37 158.64±18.65ab 116.01±7.42ab對(duì)照組 43 22.31±7.13 16.29±3.50 P 0.000 0.000

3.討論

中耳膽脂瘤及肉芽組織是慢性化膿性中耳炎的兩種病理變化，具有較高致殘率及致死率[3-4]，可能會(huì)發(fā)生顳骨溶骨性破壞等嚴(yán)重并發(fā)癥；膽脂瘤主要病理特征為中耳腔存在大量鱗狀上皮及程序性角化細(xì)胞凋亡等，其發(fā)病機(jī)制尚不明確[5]。研究表明，分析TLR2 與TLR4 在膽脂瘤及慢性化膿性中耳炎肉芽組織中的表達(dá)，可為臨床診治提供參考，但目前對(duì)其研究甚少。

T o l l 樣受體主要分布在免疫細(xì)胞以及與外界相通的上皮細(xì)胞，且在巨噬細(xì)胞等專職抗原細(xì)胞表面十分豐富，其通過(guò)識(shí)別病原體相關(guān)分子模式，將相應(yīng)信號(hào)轉(zhuǎn)至細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)而促進(jìn)炎性細(xì)胞的合成及釋放，最終引起免疫反應(yīng)。中耳炎及中耳膽脂瘤均屬于慢性炎癥疾病，肉芽組織的形成是其最為顯著特征，研究表示，在這兩種疾病肉芽組織中TLR2、TLR4表達(dá)均顯著高于健康人群，相關(guān)學(xué)者分析其原因可能為，TLR2、TLR4 信號(hào)通路處于一種過(guò)度活化的狀態(tài)，進(jìn)而易導(dǎo)致過(guò)度炎性反應(yīng)，產(chǎn)生炎性損害。研究表明，TLR4 在啟動(dòng)機(jī)體炎性反應(yīng)中起到至關(guān)重要作用；TLR2 在促進(jìn)慢性炎癥的炎性細(xì)胞消除中起到一定作用。本研究結(jié)果顯示，三組中中耳膽脂瘤組T L R2、T L R4 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)最高，其次是中耳炎組，對(duì)照組最低，分析其原因在于，慢性化膿性中耳炎及中耳膽脂瘤均屬于慢性炎癥疾病，且中耳膽脂瘤肉芽組織存在更多的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，具有較強(qiáng)炎癥反應(yīng)，故T L R2、T L R4 具有較高表達(dá)。

綜上所述，TLR2 與TLR4 在慢性化膿性中耳炎與中耳膽脂瘤中均有較高表達(dá)，且在中耳膽脂瘤中表達(dá)更高，可為臨床診治提供參考。