位詩棋， 房 雪， 丁東玲， 劉慧敏， 龔澤慧， 鄭 艷

(1.安徽師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，安徽 蕪湖 241000；2.安徽師范大學(xué) 中藥資源研究所，安徽 蕪湖 241000；3.安徽省中藥日化產(chǎn)品工程技術(shù)研究中心，安徽 蕪湖 241000)

電梯作為流動(dòng)頻繁的重要場(chǎng)所，其按鈕攜帶各類細(xì)菌，清潔問題備受關(guān)注。目前，我國市面上的電梯按鈕清洗產(chǎn)品分為兩大類，第一類產(chǎn)品通過物理機(jī)制如沖洗、摩擦的方法對(duì)按鈕進(jìn)行表面清潔，紫外線照射[1]破壞微生物細(xì)胞核酸結(jié)構(gòu)進(jìn)行殺菌消毒；第二類產(chǎn)品采用化學(xué)試劑以酸洗[2]、堿洗和溶劑清洗三種方式最為常見。但物理清潔無法做到長時(shí)間抑菌，化學(xué)清潔會(huì)對(duì)按鈕造成不小的損傷且會(huì)對(duì)環(huán)境造成不可逆的破壞。中草藥及其組合物對(duì)電梯按鈕無腐蝕，且具備去污清潔、除菌抑菌的功效，因而被用于按鈕清潔劑的研究開發(fā)中。

1 材料與方法

1.1 材料

中草藥組合物：中藥浸提液a是將黃連、黃芩、金銀花、苦參、紫蘇、丹皮中的一種或幾種按比例混合后，加入5～20倍的去離子水浸泡12h～48h，一定條件下熬制得到中藥浸提初液，濃縮至0.5～3.0g/mL得到，中藥浸提液b是將姜、桔、山蒼子、柚、橙、檸檬中的部分或全部按比例混合，然后加入混合物質(zhì)量份的5～10倍1%～95%浸提液，浸泡4h～36h后提取得到，由安徽省中藥日化產(chǎn)品工程技術(shù)研究中心提供(專利申請(qǐng)?zhí)枺?01811183366.1)，其中藥材原料由安徽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院中藥資源研究所/安徽省中藥日化產(chǎn)品工程技術(shù)研究中心鄭艷教授鑒定；供試菌株：大腸桿菌(Escherichiacoli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、綠膿桿菌(Pseudomonasaeruginosa)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)，由安徽師范大學(xué)中藥資源研究所微生物資源庫提供；轎廂電梯按鈕菌懸液：用無菌棉簽擦拭電梯按鈕，然后將棉簽的頭部用無菌剪刀剪入無菌水中，震蕩，制備菌懸液，取自安徽師范大學(xué)圖書館轎廂電梯；人工油污以及標(biāo)準(zhǔn)溶液的具體制備方法參見GB/T 9985-2000《手洗餐具用洗滌劑》；試片的制備方法參見GB/T 27728-2011《濕巾》附錄C。電子天平，上海浦春計(jì)量儀器有限公司；數(shù)顯恒溫水浴鍋，上海葉拓儀器儀表有限公司；立式壓力蒸汽滅菌器，上海申安醫(yī)療器械廠。

1.2 方法

1.2.1 無腐蝕性的測(cè)定 取金屬試片18組，每組5個(gè)金屬片。其中9組浸泡在自來水中，另9組浸泡在等量的實(shí)驗(yàn)溶液中，同時(shí)標(biāo)記4h/12h/24h三個(gè)時(shí)間組，每3組為一平行。實(shí)驗(yàn)操作前，用電子天平稱取每組金屬片的質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)操作后,分別在4h、12h、24h記錄每組金屬試片的質(zhì)量。

1.2.2 去污率的測(cè)定 將盛有300mL試驗(yàn)溶液稀釋液的燒杯放置于30℃恒溫水浴中，將試片浸入試驗(yàn)溶液稀釋液中3min，擺洗3min，然后再浸入400mL蒸餾水(30℃)擺洗30s。之后掛晾烘干、稱重。同樣以標(biāo)準(zhǔn)溶液、蒸餾水為對(duì)照組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2.3 抑菌效果的測(cè)定 采用牛津杯法:在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上分別均勻涂布200μL大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、枯草芽孢桿菌菌懸液。等距離放置無菌牛津杯，并在杯內(nèi)分別注入200μL中草藥組合物，每組做3個(gè)平行。蒸餾水作空白對(duì)照。于37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h后，測(cè)量各組的抑菌圈直徑，取其平均值。采用涂布平板法:將滅菌的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，待凝固后均勻涂布200μL轎廂電梯按鈕菌懸液，制成帶菌平板。然后向其中加入200μL中草藥組合物均勻涂布。加入等量蒸餾水作對(duì)照組。待培養(yǎng)皿表面干燥后，于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并觀察。每組做三個(gè)平行實(shí)驗(yàn)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

1.3.1 無腐蝕性測(cè)定 電子天平稱取每組金屬片的質(zhì)量，記錄每組金屬試片的質(zhì)量變化。

1.3.2 去污率實(shí)驗(yàn) 試驗(yàn)溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液、蒸餾水分別測(cè)定3組金屬試片，按下式分別計(jì)算試驗(yàn)溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液的去污率。去污率X，以%表示，按下式計(jì)算：

X=(m1-m2)/(m1-m0)*100%

(1)

其中：m0——涂污前金屬試片的質(zhì)量，單位為g；

m1——涂污后金屬試片的質(zhì)量，單位為g；

m2——洗滌后金屬試片的質(zhì)量，單位為g。

以3個(gè)試片去污率的平均值表示結(jié)果，在3個(gè)試片的平行試驗(yàn)所得去油率值中，至少應(yīng)有兩個(gè)數(shù)值之差不超過3%，否則應(yīng)重新測(cè)定。采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件和Excel處理數(shù)據(jù)，進(jìn)行平均值和方差的計(jì)算，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析,以P<0.05為顯著性差異。

1.3.3 抑菌實(shí)驗(yàn) 將菌培養(yǎng)48h后，在第一塊平板上均勻畫取2cm×2cm的正方形區(qū)域3塊，計(jì)數(shù)正方形里的菌落數(shù)。在第二塊平板上均勻畫取4塊1cm×1cm的正方形，計(jì)數(shù)其中的菌落數(shù)。

將菌培養(yǎng)48h后，用直尺測(cè)量每個(gè)平板的抑菌圈直徑，求出平均值。

2 結(jié)果

2.1 中草藥組合物對(duì)電梯按鈕無腐蝕性測(cè)定

通過觀察，中草藥組合物處理前后，試片表面無明顯腐蝕點(diǎn)、無明顯變色，質(zhì)量變化均小于0.3mg(表1)。

表1 各樣品實(shí)驗(yàn)前后金屬片質(zhì)量變化及結(jié)論

2.2 中草藥組合物的去污作用

試驗(yàn)溶液以及蒸餾水的去污力分別為26.36%、10.08%,本次實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)溶液的去污力為15.19%(表2)。試驗(yàn)溶液較標(biāo)準(zhǔn)溶液及蒸餾水去污率高。

表2 各樣品油污去除率

2.3 中草藥組合物的抑菌作用

2.3.1 中草藥組合物對(duì)菌落生長的抑制情況 使用中草藥組合物前后，菌落數(shù)目有明顯減少，除菌率=(446-2)/446×100%=99.55%(表3、4)。

表3 蒸餾水對(duì)照組菌落生長情況

表4 中草藥組合物實(shí)驗(yàn)組菌落生長情況

2.3.2 中草藥組合物對(duì)四種常見病原菌的抑制作用 中草藥組合物對(duì)四種常見的病原菌：綠膿桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌都有強(qiáng)抑制作用，抑菌圈均達(dá)到了20.0mm以上，其中對(duì)大腸桿菌的抑菌效果最強(qiáng)，抑菌圈達(dá)到了28.5mm(表5)。

表5 中草藥組合物對(duì)四種常見病原菌的抑菌圈大小

3 討論

根據(jù)GBT 27728-2011《濕巾》中附錄C可知，實(shí)驗(yàn)前后金屬試片的質(zhì)量變化不大于2.0mg，試片表面無明顯腐蝕點(diǎn)、無明顯變色，則為合格。分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知：自來水組實(shí)驗(yàn)前后金屬片質(zhì)量變化均小于0.9mg；使用該中草藥組合物在實(shí)驗(yàn)前后金屬片質(zhì)量變化均小于0.3mg，且表面無腐蝕點(diǎn)、無變色，即對(duì)電梯按鈕無腐蝕性。隨時(shí)間增加，金屬試片的質(zhì)量損失有減小趨勢(shì)，分析原因可能為樣品中部分物質(zhì)附著于金屬試片，使得質(zhì)量損失減小。

以試驗(yàn)溶液(中草藥組合物)、標(biāo)準(zhǔn)溶液和蒸餾水為對(duì)照組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。試驗(yàn)溶液以及蒸餾水的去污力分別為26.36%、10.08%，本次實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)溶液的去污力為15.19%，去污實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明中草藥組合物的去污力高于標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑的去污力，而蒸餾水的去污力低于標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑的去污力。因此，中草藥組合物在去污力方面具有較好的效果，并且優(yōu)于標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑(P<0.05)，且中草藥組合物的去污力與蒸餾水對(duì)照組相比，差異極顯著(P<0.01)。

抑菌試驗(yàn)結(jié)果顯示使用中草藥組合物后，菌落數(shù)目明顯減少，除菌率達(dá)到99.55%。此外，在牛津杯抑菌實(shí)驗(yàn)中，中草藥組合物對(duì)綠膿桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌四種常見病原菌的抑菌圈均達(dá)到20.00mm以上，抑制作用較強(qiáng)，其中，對(duì)大腸桿菌的抑菌圈達(dá)到了28.50mm。

本研究基于大量文獻(xiàn)查詢及前期研究工作，篩選出對(duì)綠膿桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌具有較強(qiáng)抑菌效果的中草藥[3-6]，將其組合經(jīng)安全的生產(chǎn)工藝優(yōu)化處理后，制得環(huán)境友好型的中草藥組合物清潔劑。根據(jù)相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明其對(duì)金屬無腐蝕性，具有較強(qiáng)的去污和抑菌能力。同時(shí)，本文中的實(shí)驗(yàn)方法操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確性較高，可以對(duì)清潔其它金屬類型的產(chǎn)品提供參考。目前，筆者尚未見針對(duì)轎廂電梯按鈕清潔工作的國家標(biāo)準(zhǔn)，近年來醫(yī)院、學(xué)校、居住商務(wù)樓等高層建筑的拔地而起帶動(dòng)了電梯行業(yè)的快速發(fā)展，醫(yī)院電梯上下樓層按鈕污染尤為嚴(yán)重[8-9]，電梯日常維修保養(yǎng)的定義中把清潔放在了第一位，由此可見，清潔工作在日常維修保養(yǎng)中具有舉足輕重的地位，并不是無關(guān)緊要的工作[10]。中草藥組合物可作為良好的轎廂電梯按鈕清洗劑，具有一定的應(yīng)用價(jià)值，值得進(jìn)一步推廣和進(jìn)行相關(guān)產(chǎn)品的深度研究開發(fā)。