續(xù)文棟 張鵬(小) 呂朋 鄭鍇 田彥超 張鵬

根據(jù)2018年全球癌癥調(diào)查，全球食管癌病人新增57.2萬例，死亡50.9萬例，分別占癌癥發(fā)病和死亡的3.2% 和5.3%，食管癌的發(fā)病率和死亡率分別位居第7位和第6位[1]。葉酸是調(diào)節(jié)DNA正常甲基化并維持其完整性的重要物質(zhì)，亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)是葉酸代謝的關(guān)鍵酶[2]。食管癌的發(fā)生與葉酸缺乏和代謝紊亂有關(guān)。有研究報(bào)道了MTHFR C677T和A1298C多態(tài)性在結(jié)直腸癌和胃癌的病因?qū)W中的作用，但其與食管癌的關(guān)系仍存在爭議[3-4]。識別食管癌遺傳因素的影響風(fēng)險(xiǎn)有助于促使早期干預(yù)[5]。MTHFR C677T多態(tài)性與前列腺癌、腸癌和賁門腺癌的關(guān)系已在高危人群中得到證實(shí)[6-8]。該研究的目的是確定MTHFR C677T和A1298C多態(tài)性與食管癌的相關(guān)性。

資料與方法

一、檢索策略

計(jì)算機(jī)檢索 PMedline(PubMed)，Embase，web of Science，Cochrane，wanted，CNKI，VIP并輔以手工檢索，收集國內(nèi)外發(fā)表的有關(guān) MTHFR 多態(tài)性與食管癌關(guān)系的病例對照或隊(duì)列研究，檢索日期截止 2019年9月30日。檢索關(guān)鍵詞：葉酸，MTHFR，食管癌，rs1801131以及rs1801133。

二、選擇標(biāo)準(zhǔn)

兩位作者獨(dú)立篩選標(biāo)題和摘要識別相關(guān)研究，納入當(dāng)前的Meta分析標(biāo)準(zhǔn)：(1)病例對照研究;(2)評估葉酸代謝遺傳變異(A1298C及C677T)與食管腫瘤的關(guān)系;(3)有足夠的資料評估或(和)95%CI，P值。排除標(biāo)準(zhǔn)為：病例報(bào)告、信函和綜述文章;只包括個(gè)案組;重復(fù)發(fā)表的文章。

三、數(shù)據(jù)提取

兩位作者從所有符合條件的研究中獨(dú)立提取數(shù)據(jù)：(1)第一作者姓名、出版日期、國家、種族和控制來源;(2)癌癥類型、病例和對照組的頻率、涉及的基因和對照組的HWE狀況。兩位作者之間的任何分歧都是通過討論和達(dá)成協(xié)議來解決的。

四、統(tǒng)計(jì)分析

所有分析由STATA 14.0(STATA Corp LP，College Station，TX，USA)進(jìn)行。計(jì)數(shù)資料以相對危險(xiǎn)度(relative risk，RR)及其95% CI表示。納入研究結(jié)果的異質(zhì)性采用χ2檢驗(yàn)。異質(zhì)性檢驗(yàn)(P>0.05，I2<50%)時(shí)采用固定效應(yīng)模型[9]，否則采用隨機(jī)效應(yīng)模型[10]。敏感性分析通過每次去除每個(gè)合格的研究來估計(jì)結(jié)果的穩(wěn)定性。潛在的發(fā)表偏倚通過Egger's和Begg's檢驗(yàn)進(jìn)行評估，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[11-12]。

表1 納入本Meta分析的19項(xiàng)研究的基本資料

結(jié) 果

1.納入文獻(xiàn)的特點(diǎn)：通過PubMed、EMBASE、web of Science、Cochrane、Wanfang、CNKI和VIP對論文摘要、標(biāo)題或內(nèi)容進(jìn)行了篩選，篩選出281篇可能相關(guān)的研究，最終納入19篇已發(fā)表的研究，研究選擇的流程見圖1。所有納入的研究均為病例對照研究，其中MTHFR C677T基因多態(tài)性有15篇，研究MTHFR A1298C基因多態(tài)性有7篇。食管癌病例組2011例，對照組2661例。Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗(yàn)分析樣本具有群體代表性(P>0.001)。所納入研究的特點(diǎn)見表1。

圖1 文獻(xiàn)檢索及篩選流程圖

2.C677T多態(tài)性與食管癌易感性的關(guān)系：2641例病人和3747例對照組C677T多態(tài)性的薈萃分析顯示C677T與食管癌風(fēng)險(xiǎn)之間無顯著相關(guān)性(T vs.C：OR=1.16，95%CI=0.98～1.38;CT vs.CC：OR=1.18，95%CI=0.97～1.43;TT vs.CC：OR=1.32，95%CI=0.95～1.84;TT+CT vs.CC：OR=1.21，95%CI=0.98～1.50;TT vs.CC+CT：OR=1.21，95%CI=0.93～1.57)。見圖2，表2。

表2 C677T多態(tài)性與食管癌易感性關(guān)系的Meta分析

圖2 等位基因模型中C677T(rs 1801133)與食管癌易感性關(guān)系的森林圖

3.A1298C多態(tài)性與食管癌易感性的關(guān)系：A1298C與食管癌風(fēng)險(xiǎn)之間存在顯著相關(guān)性(C vs.A：OR=1.14，95%CI=1.01～1.29;AC vs.AA：OR=1.18，95%CI=1.04～1.33;CC+AC vs.AA：OR=1.26，95%CI=0.44～2.23)。然后我們根據(jù)種族進(jìn)行亞組分析，發(fā)現(xiàn)A1298C與亞洲人食管癌風(fēng)險(xiǎn)之間存在顯著的相關(guān)性(C vs.A：OR=1.16，95%CI=0.99～1.34;AC vs.AA：OR=1.17，95%CI=1.01～1.35;CC+AC vs.AA：OR=1.24，95%CI=1.02～1.52)。然而，在任何遺傳模型下，白種人患食管癌的風(fēng)險(xiǎn)沒有顯著的相關(guān)性。見圖3，表3。

4.異質(zhì)性和敏感性分析：研究間異質(zhì)性采用Q統(tǒng)計(jì)進(jìn)行計(jì)算。異質(zhì)性檢驗(yàn)P>0.05時(shí)采用固定效應(yīng)模型[9];另采用隨機(jī)效應(yīng)模型[10]。敏感性分析是通過每次省略每個(gè)合適的研究來進(jìn)行的。A66G和A1298C對食管癌風(fēng)險(xiǎn)影響的匯總表明，該研究的結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)上是穩(wěn)定的(圖4)。

5.發(fā)表偏倚：Begg和Egger的檢驗(yàn)均被用于評估研究的發(fā)表偏倚[11-12]。結(jié)果表明，總體上沒有明顯的發(fā)表偏倚。

表3 A1298C多態(tài)性與食管癌易感性關(guān)系的Meta分析

圖3 等位基因模型中A1298C(rs 1801131)與食管癌易感性關(guān)系的森林圖

圖4 等位基因模型中Meta分析發(fā)表偏倚檢驗(yàn)的Begg漏斗圖

討 論

葉酸可以為細(xì)胞中正常的DNA甲基化和核苷酸從頭合成提供甲基基團(tuán)，但它必須在體內(nèi)正常細(xì)胞中代謝才能發(fā)揮這一生物學(xué)功能。葉酸缺乏或代謝紊亂可能會(huì)影響細(xì)胞DNA的合成和完整性，導(dǎo)致在復(fù)制過程中DNA突變率增加[13]。MTHFR基因突變可降低MTHFR活性，導(dǎo)致血漿同型半胱氨酸濃度升高和葉酸代謝異常，干擾DNA合成和DNA損傷修復(fù)[14]。MTHFR基因是多態(tài)的，最常見的是C677T和A1298C多態(tài)。MTHFR基因上這兩個(gè)位點(diǎn)的改變會(huì)顯著降低其所編碼酶的活性，從而影響葉酸的代謝，導(dǎo)致體內(nèi)葉酸代謝紊亂。

葉酸代謝基因變異與多種癌癥的風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，包括頭頸部、肺、乳腺和結(jié)直腸癌[15]。MTHFR基因C677T和A1298C多態(tài)性在食管癌的發(fā)生中起著重要的作用。陳康等[16]研究顯示，MTHFR基因C677T和A1298C基因型分布和等位基因頻率比較觀察組與對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，MTHFR基因C677T和A1298C多態(tài)性與食管癌的發(fā)生無關(guān)，不是導(dǎo)致食管癌發(fā)生的原因，食管癌的發(fā)生可能與哈薩克族居民的飲食和生活習(xí)慣有關(guān)。王秀梅等卻在研究中得出結(jié)論，MTHFR基因C677T多態(tài)性是哈薩克族食管癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素[17]。Mazzuca等[18]研究認(rèn)為，MTHFR C677T基因多態(tài)性與食管癌的發(fā)生有關(guān)，攜帶 TT 等位基因的個(gè)體有更高的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。黃桂玲等[19]的研究認(rèn)為，MTHFR C677T基因多態(tài)性可能與食管癌易感性無關(guān)，但與食管癌癌前病變易感性存在關(guān)聯(lián)性，攜帶MTHFR C677TT基因型和 TT 等位基因的個(gè)體發(fā)生食管癌癌前病變的危險(xiǎn)性較高。劉靜等[20]的一項(xiàng)Meta分析探討了MTHFR基因多態(tài)性與中國人群食管癌易感性的關(guān)系，結(jié)果顯示，中國人群MTHFR基因C677T多態(tài)性與食管癌易感性有關(guān)，MTHFR基因A1298C多態(tài)性與食管癌易感性無關(guān)。Tan等[21]Meta分析認(rèn)為，MTHFR基因A1298C多態(tài)性與食管癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)，可能是食管癌的危險(xiǎn)因素。有關(guān)MTHFR基因C677T和A1298C多態(tài)性與食管癌發(fā)病關(guān)系的結(jié)論，仍存在較大的差異。

該研究顯示A1298C變異顯著增加食管癌的發(fā)病幾率。當(dāng)前的研究結(jié)果應(yīng)該謹(jǐn)慎解釋。本研究納入的對象以亞裔為主，可能存在不同種群食管癌發(fā)病類型不同，食管鱗癌、腺癌發(fā)生機(jī)制的不同產(chǎn)生的結(jié)論差異。因此，未來的研究應(yīng)納入更多不同種族的研究對象，并對食管癌病理分型進(jìn)行細(xì)化。某些亞組的受試者人數(shù)相對較少。由于缺乏原始資料，我們無法根據(jù)性別、年齡、生活方式等危險(xiǎn)因素對食管癌易感性進(jìn)行估計(jì)。食管癌發(fā)生可能是多基因聯(lián)合造成的，需對更多基因進(jìn)行聯(lián)合檢測[22]。需要來自大規(guī)模多中心研究的數(shù)據(jù)來驗(yàn)證葉酸代謝遺傳變異(A1298C和C677T)與食管癌易感性之間的關(guān)系，才能得出更準(zhǔn)確、更具代表性的結(jié)果。