薛鳴 耿超

【摘 要】目的：探討胸苷激酶1在結腸癌患者血清中的表達，為患者診斷、治療提供參考。方法：2016年5月-2017年4月北大醫(yī)療魯中醫(yī)院初診結腸癌病人94例，設為觀察組。取相同時期入院的健康體檢者70例，設為對照組。采用化學發(fā)光聯(lián)合斑點雜交的技術檢測兩組TK1水平;對于觀察組患者中的遠處轉移患者給予化學治療，治療后再次完成TK1水平測定;對觀察組中的手術治療患者分析血清TK1與其病理的相關性。結果：觀察組TK1、CEA、CA199水平，均高于對照組（P<0.05）;遠處轉移患者血清TK1高于局部可手術患者（P<0.05）。不同腫瘤標志物聯(lián)合診斷優(yōu)于單一腫瘤標志物診斷。PR患者治療后TK1水平，均低于SD及PD患者，PR患者治療后TK1較化療前顯著降低（P<0.05）。提示TK1早于CEA、CA199提前預測腫瘤復發(fā)轉移。結論：TK1評估結腸癌患者化療療效顯著，建議聯(lián)合影像學檢查綜合判定;TK1可作為結腸癌患者手術效果的判定及復發(fā)轉移的預測指標之一。

【關鍵詞】胸苷激酶1;結腸癌;癌胚抗原

Abstract：Objective To investigate the expression of thymidine kinase 1 in serum of patients with colon cancer， and to provide a reference method for diagnosis and treatment of patients.Methods： 94 patients with colon cancer newly diagnosed in PKUCare Luzhong Hospital from May 2016 to April 2017 were set as observation group. 70 healthy patients admitted to the hospital in the same period were selected as the control group. The TK1 levels of the two groups were detected by chemiluminescence combined spot hybridization. Chemotherapy was given to patients with distant metastasis in the observation group， and TR1 level was measured again after treatment. The correlation between serum TK1 and pathology was analyzed in the observation group. Results： the levels of TK1， CEA and CA199 in the observation group were higher than those in the control group （P<0.05）. The serum TK1 of patients with distant metastasis was higher than that of patients with local surgery （P<0.05）， and the combined diagnosis of different tumor markers was better than that of single tumor marker. The TK1 level of PR patients after treatment was lower than that of SD patients and PD patients， and the TK1 level of PR patients after treatment was significantly lower than that before chemotherapy （P<0.05）， suggesting that TK1 was earlier than CEA and CA199 in predicting tumor recurrence and metastasis.Conclusion： TKL evaluation of colon cancer patients with significant curative effect of chemotherapy， it is recommended to combine imaging examination comprehensive judgment; TK1 can be used as a predictor of recurrence and metastasis in patients with colon cancer

Key words： thymidine kinase 1;colon cancer;cancer embryo antigen

隨著基因檢測及病理技術的進展，靶向藥物在結腸癌患者中得到應用，提高了治療的有效率。而腫瘤標志物在診斷和判斷預后，腫瘤分類以及制定最佳治療方案方面發(fā)揮重要作用[1]。胸苷激酶1（Thymidine Kinase，TK1）是人體內(nèi)重要的生物酶，能促進胸苷嘧啶磷酸化，參與DNA復制和細胞增殖。正常細胞分裂后體液中不存在TK1。多項大樣本臨床調(diào)查結果均顯示，癌癥患者血清TK1活性是明顯升高的[2]。通過觀察TK1水平變化，以早期篩查腫瘤，評價患者預后及監(jiān)控患者治療效果。

1 材料和方法

1.1 資料

2016年5月-2017年4月在北大醫(yī)療魯中醫(yī)院初診的結腸癌患者94例，年齡（60.74±10.91）歲，設為觀察組，其中21例因出現(xiàn)遠處轉移，未行手術治療。余73例患者均行結腸癌根治術。術后腫瘤TNM分期：I期5例，II期27例，III期41例。術后行規(guī)范輔助治療及定期復查，中位隨診時間1.5年，共隨訪70例患者。取同期入院健康體檢者70例，設為對照組，男42例，女28例，年齡（35-86）歲，平均（61.91±7.54）歲。

1.2 方法

對照組清晨空腹采集靜脈血6ml;觀察組術前、術后1月、術后3月均清晨空腹采集靜脈血6ml，注入一次性真空采血管中，靜置30分鐘后以3000r/min的速度離心20分鐘，血清置于-20°冰箱中保存?zhèn)溆?，檢測前2-8°解凍，嚴禁反復凍融。采用點印跡免疫酶化學法測定。血清CEA、CA199水平測定：采用全自動電化學發(fā)光免疫分析儀，配套試劑，采用電化學發(fā)光法。嚴格按規(guī)則執(zhí)行，該工作由我院檢驗科完成。

1.3 資料歸納整理

臨床資料主要包括患者性別、年齡（≥60歲及<60歲）、術后病理、是否遠處轉移、腫瘤形態(tài)、腫瘤大?。ā?cm及<4cm）、腫瘤分化程度、淋巴結轉移情況、HER-2及Ki67表達情況。觀察組與對照組腫瘤標志物水平。觀察TK1、CEA、CA199不同指標在結腸癌患者診斷中的特異性、敏感性。血清TK1濃度與術后病理特征及患者一般情況的關系。

1.4 統(tǒng)計分析

運用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學分析。

2 結果

2.1 臨床特征：94例結腸癌患者中男性56例，女性38例，平均年齡（60.74±10.91）歲，其中低分化腺癌51例，中高分化腺癌43例，I期5例，II期27例，III期41例，IV期21例。觀察組TK1、CEA、CA199水平，均高于對照組（P<0.05），觀察組中遠處轉患者的TK1、CEA、CA199水平均高于局部可手術患者（P<0.05）。

2.2 結腸癌根治術患者血清TK1水平與病理特征關系：結腸癌患者血清TK1水平與腫瘤直徑、淋巴結轉移情況、TNM分期、Ki67的表達、Her-2的表達有明顯相關性，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;而在性別、年齡、腫瘤形態(tài)、腫瘤分化程度方面差別無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。CEA與性別、年齡、腫瘤形態(tài)、淋巴結轉移、Ki67的表達、Her-2的表達均無關（P>0.05），而與腫瘤分化程度及TNM分期有關（P<0.05）。

3 討論

臨床研究證實TK1能夠作為惡性腫瘤的預測指標，結腸癌患者血清中均存在不同程度的TK1水平的升高。TK1水平與癌癥預后密切相關。本研究通過檢測結腸癌組、健康人血清TK1水平，結果證實結腸癌組患者TK1水平明顯高于健康對照組，差異具有統(tǒng)計學意義。本研究中，21例遠處轉移患者其TK1、CEA、CA199水平，均明顯高于可手術患者（P<0.05）。TK1為細胞增殖標志物，考慮與腫瘤臨床分期越晚，腫瘤細胞負荷越重有關。因此，臨床上結腸癌患者加強TK1水平測定能對患者的早期診斷提供幫助，對患者的病情變化給予正確評估，指導臨床合理的診斷和治療。

多項臨床研究證實血清TK1較其他腫瘤標志物在篩查惡性腫瘤方面更敏感，聯(lián)合檢測腫瘤標志物可提高診斷的敏感性及特異性。但目前單獨檢測TK1水平難以達到滿意效果，需要聯(lián)合其他檢查方法[3]。本研究也得出相同結論，與CEA、CA199相比較，TK1在結腸癌診斷中的敏感性最高，為86%，其次為CEA 68%，CA199為67%;CEA特異性最高為97%，其次為TK1 93%;三項聯(lián)合診斷實驗的敏感性和特異性最高，均為93%;不同腫瘤物聯(lián)合診斷優(yōu)于單一腫瘤標志物診斷。因此，血清TK1檢測聯(lián)合其他腫瘤標志物可以提高結腸癌的診斷。

結腸癌根治術為早期結腸癌首選的治療方法，然而術后的遠處轉移和復發(fā)嚴重影響著這類患者的預后。重要的原因之一是缺乏可靠的標志物預測遠處轉移或局部復發(fā)的發(fā)生。雖然超聲、CT等影像學檢查能夠評估腫瘤大小及淋巴結轉移情況，但是仍然無法發(fā)現(xiàn)血液中的微病灶，不能真實的反映出腫瘤的負荷情況。眾多學者致力于研究能夠?qū)ふ夷軌蝾A測復發(fā)的臨床指標，如CEA、CA199、CA242等，但是臨床使用中仍不十分準確。術前高血清TK1水平者復發(fā)或遠處轉移的風險更高。TK1能夠反映腫瘤細胞增殖情況，與全身腫瘤負荷具有相關性。我們在對比研究中發(fā)現(xiàn)，結腸癌根治術后患者TK1水平明顯下降。對相關病理特征進行單因素分析，發(fā)現(xiàn)TNM分期、淋巴結轉移情況、術前高TK1水平有統(tǒng)計學差異，其他指標無統(tǒng)計學差異。多因素分析，結果顯示術前TK1水平為獨立危險因素。

4 結論

TK1評估結腸癌患者化療療效顯著，聯(lián)合影像學檢查綜合判定病情發(fā)展更為準確。TK1可作為結腸癌患者手術效果的判定及復發(fā)轉移的預測指標之一。由于本研究時間較短，樣本量仍然較少，仍需多中心、大樣本進一步研究證實。

參考文獻

Xu Y，Shi QL，Ma H，et a1.High thymidine kinase l（TK1）expression is a predictor of poor survival in patients with pT1 of lung adenocarcinoma[J].Tumour Biol，2012，33（2）：475-483.

袁航，朱寶，吳翼偉，等.肺癌患者血清TK1檢測的臨床意義[J].放射免疫學雜志，2012，24（3）：301-302.

方輝，李學良，施瑞華.結腸癌患者血清細胞質(zhì)胸苷激酶的檢測及臨床意義[J].實用臨床醫(yī)藥，2013，33（13）：30-32.