李飛艷 趙月珍 劉群群

摘要：目的 研究利膽排石片、金錢草片中金錢草替以廣金錢草或聚花過路黃后對大鼠尿液、膽汁排出量的影響。方法 以廣金錢草、聚花過路黃替代利膽排石片、金錢草片中的金錢草，制備成相應的藥物，給大鼠一次性灌胃給藥，采用大鼠代謝籠法，分別記錄給藥后動物在1、2、3、4、5、6 h的尿液量及6 h內尿液總量;采用膽汁引流法，于動物一次性灌胃給藥后，每30 min收集并記錄1次膽汁排出量，連續(xù)收集3 h，采用t檢驗，比較各組間尿液與膽汁排出量的差異性。結果 與空白組比較，各藥物組在6 h內排出的尿液總量明顯增加（P<0.01），但尿液明顯增加的具體時間各異;與LDPS組比較，LDPS-G組、LDPS-JH組在6 h內尿液總量無明顯變化，LDPS-G組尿液量第1 h明顯減少（P<0.01），第5、6 h明顯增加（P<0.05）;與JQC組比較，GJQC組、JHGLH組在6 h內尿液總量無明顯變化，GJQC組在第1 h尿液排出量明顯增加、第5 h尿液排出量明顯減少（P<0.01）。與空白組比較，各藥物組在用藥30 min后至3 h內的各時間段膽汁排出量都有明顯增加（P<0.05或P<0.01）;與LDPS組比較，LDPS-G組在給藥后的第5、6個30 min膽汁排出量明顯減少（P<0.05）;與JQC組比較，JHGLH組在給藥后30 min內膽汁排出量明顯增加（P<0.05）。結論 利膽排石片、金錢草片及其組方中金錢草替以廣金錢草與聚花過路黃后都呈現(xiàn)出明顯的利尿、利膽作用;以金錢草為君藥，以防治膽石癥為主要療效的復方中，以廣金錢草代替金錢草會降低其療效，但是以防治尿石癥為主要療效的，用廣金錢草替代后可能通過促進尿液的排出增強其療效;廣金錢草利尿作用顯效較快，但維持時間較短;聚花過路黃利尿、利膽作用與金錢草類似，可以進一步在臨床開展小范圍的對照研究，為后期開發(fā)提供臨床資料。

關鍵詞：金錢草;廣金錢草;聚花過路黃;利膽排石片;金錢草片;尿液;膽汁;大鼠

【Abstract】Objective：To study the effects of Herba lysimachiae substituting Desmodium tyracifolium or Lysimachia congestiflora in Didan Paishi Tablets and Jinqiancao Tablets on the urine and bile excretion in rats. Methods：The corresponding drugs were prepared by Herba lysimachiae in Didan Paishi Tablets and Jinqiancao Tablets and given to rats by intragastric administration at one time. The rat metabolizable cage method was used to record the urine volume of the animals at 1，2，3，4，5，and 6 hours after administration and the total urine volume within 6 hours. The bile drainage method was used to collect and record the amount of the bile excretion once every 30 minutes for 3 continuous hours after the animals were administered. The differences in the urine and bile excretion between the groups were compared by t test. Results：Compared with that of the blank group，the total amount of the urine excretion in each drug group increased significantly within 6 hours（P<0.01），but the specific time of significant increase in urine was different. Compared with the LDPS group，there was no significant change in the total urine volume within 6 hours in the LDPS-G group and LDPS-JH group. The urine volume of the LDPS-G group decreased significantly at the first hour（P<0.01），and increased significantly at the 5th and 6th hours（P <0.05）. Compared with the JQC group，there was no significant change in the total amount of urine within 6 hours in the GJQC group and the JHGLH group，and the urine output increased significantly at the first hour and the urine output decreased significantly in the GJQC group at the 5th hour（P<0.01）. Compared with that in the blank group，the bile output of each drug group increased significantly in each period of time from 30 minutes to 3 hours（P<0.05 or P<0.01）. Compared with that in the LDPS group，the bile discharge significantly reduced in the LDPS-G group and the LDPS-JH group at the 5th and 6th 30min（P<0.05）. Compared with that in the JQC group，the bile discharge in the JHGLH group significantly increased within 30min after the administration（P<0.05）. Conclusion：Herba lysimachiae substituting Desmodium tyracifolium or Lysimachia congestiflora in Didan Paishi Tablets and Jinqiancao Tablets shows obvious diuretic and choleretic effects. In the prescription of Jinqqiancao as a monarch drug to prevent gallstones，the Desmodium tyracifolium substituted will reduce its effect，but for the prevention and treatment of urolithiasis，the curative effect of the Desmodium tyracifolium substituted may be enhanced by promoting the excretion of urine. The diuretic effect of Desmodium tyracifolium is faster，but the maintenance time is shorter. The diuretic and choleretic effects of Lysimachia congestiflora are similar to those of Herba lysimachiae，which can further be conducted in small-scale controlled studies in the clinic and provide clinical data for later development.

【Key words】Herba lysimachiae，Desmodium tyracifolium，Lysimachia congestiflora，Lidan Paishi tablets，Jinqiancaoo tablets，urine，bile，rats

利膽排石片與金錢草片收載于2015年版《中國藥典》[1]，兩者均以金錢草為君藥。利膽排石片由金錢草、茵陳、黃芩等10味藥組成，用于濕熱蘊毒、腑氣不通所致的脅痛、膽脹，癥見脅肋脹痛、發(fā)熱、尿黃、大便不通;膽囊炎、膽石癥見上述證候者，臨床廣泛用于膽道結石的治療[2～4];金錢草片以單味金錢草成方，用于濕熱下注所致小便頻數(shù)短澀，淋瀝疼痛，尿色赤黃，腰腹疼痛，甚至尿挾砂石，臨床常用于治療尿路結石[5]。

金錢草為報春花科植物過路黃Lysimachia christinae Hance的干燥全草，具有利濕退黃、利尿通淋、解毒消腫的功效[1]，臨床廣泛用于濕熱黃疸、肝膽結石和泌尿道結石等的治療[6～10];廣金錢草與金錢草因一字之差，以及地方用藥習慣，在湖南等地常混作金錢草使用[11]，實則兩者來源于不同科屬，廣金錢草來源于豆科植物廣金錢草Desmodium styracifolium（Osb.）Merr.的地上部分，具有利濕退黃、利尿通淋的功效[1]，主要用于治療泌尿系統(tǒng)結石、減輕泌尿系統(tǒng)結石患者疼痛[12～13];聚花過路黃為報春花科植物聚花過路黃Lysimachia congestiflora Hemsl.的干燥全草，與金錢草為同科同屬，因其形態(tài)相似，常被當作金錢草誤采誤收，加之經(jīng)營、使用單位質量把關不夠嚴謹，導致了現(xiàn)今臨床上常見聚花過路黃誤做金錢草使用的現(xiàn)象[11]。

基于金錢草在臨床上廣泛用于膽石癥、尿石癥的治療，而促進膽汁、尿液排出分別是防止膽結石、腎結石形成及幫助結石排出的主要機制，以及金錢草、廣金錢草、聚花過路黃三者在臨床混用的現(xiàn)象[14～16]，本文研究防治結石的兩個法定方藥利膽排石片、金錢草片中金錢草被其他兩混用品種替代后對大鼠尿液、膽汁排出量的影響。

1 材料

1.1 受試藥物

1.1.1 中藥材

1.1.1.1 利膽排石片組成中藥 金錢草，產(chǎn)地四川，批號1711012;木香，產(chǎn)地云南，批號1711008;大黃，產(chǎn)地甘肅，批號1712011;麩炒枳實，產(chǎn)地江西，批號1710008;姜厚樸，產(chǎn)地浙江，批號1711009，均由江西樟樹天齊堂中藥飲片有限公司提供。芒硝，產(chǎn)地陜西，批號2016070606，湖南三湘中藥飲片公司提供;檳榔、茵陳、黃芩、郁金均購于湖南邵東廉橋藥材市場，經(jīng)本單位鑒定專家鑒定為正品。

1.1.1.2 金錢草片組成中藥 金錢草，批號同利膽排石片中金錢草。

1.1.1.3 廣金錢草 產(chǎn)地廣西，批號1710006，江西樟樹天齊堂中藥飲片有限公司提供。

1.1.1.4 聚花過路黃 購于湖南邵東廉橋中藥材市場，經(jīng)專家鑒定為報春花科聚花過路黃的全草[17]。

1.1.2 中藥制劑

1.1.2.1 利膽排石片（簡稱“LDPS”） 因動物給藥途徑為灌胃給藥，用藥時利膽排石片尚需粉碎、加水溶解成混懸液，配置成適當濃度，因此制備過程中省去了加輔料、制粒、壓片的過程，其余均按照2015年《中國藥典》[1]中利膽排石片制劑工藝操作，其中木香、大黃、芒硝粉碎成細粉，金錢草、茵陳等7味藥加冷水浸泡1 h，加水量至液面超過藥材3～5 cm，煎煮2次，水沸后計時，分別煎煮30 min、25 min，合并2次濾液，旋轉蒸發(fā)儀減壓濃縮至濃度為0.5 g/mL的藥液備用。臨用前將木香、大黃、芒硝3藥細粉加入煎液中，加純化水稀釋成所需濃度。

1.1.2.2 廣金錢草替代金錢草的利膽排石片（簡稱“LDPS-G”） 除了金錢草用廣金錢草替代外，其余操作同利膽排石片。

1.2.2.3 聚花過路黃替代金錢草的利膽排石片（以下簡稱“LDPS-JH”） 除了金錢草用聚花過路黃替代外，其余操作同利膽排石片。

1.1.2.4 金錢草片（簡稱“JQC”） 依照2015年版《中國藥典》[1]，金錢草片制備工藝為金錢草加水煎煮3次，每次1 h，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.4～1.5的稠膏，加輔料，制粒，干燥，壓片。實際操作中濾液濃縮至濃度為0.5 g/mL的藥液備用，省去了加輔料及以后的制粒、壓片操作。

1.1.2.5 廣金錢草替代金錢草的金錢草片（簡稱“GJQC”） 將金錢草片中金錢草以廣金錢草替代，其余操作同金錢草片，稱之為“廣金錢草片”。

1.1.2.6 聚花過路黃替代金錢草的金錢草片（簡稱“JHGLH”） 將金錢草片中金錢草以聚花過路黃替代，其余操作同金錢草片，稱之為“聚花過路黃片”。

1.2 實驗動物 SD雄性大鼠70只，SPF級，體重180～200g，湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供，質量合格證號43004700042552，許可證號SCXK（湘）2016-0002，飼養(yǎng)于湖南中醫(yī)藥大學實驗動物中心，許可證號SYXK（湘）2013-0005，使用證明編號00086740。

1.3 試劑與器材 氨基甲酸乙酯（烏拉坦），上海展云化工有限公司，批號160510。大鼠代謝籠，淮北正華生物儀器設備公司;摩爾超純水機，動物型50，上海摩勒科學儀器公司提供;5號1次性靜脈輸液針，湖南康利來醫(yī)療器械公司提供。

2 方法

2.1 分組及給藥 動物按體重隨機分為7組，即利膽排石片（LDPS）組、廣金錢草替代金錢草的利膽排石片（LDPS-G）組、聚花過路黃替代金錢草的利膽排石片（LDPS-JH）組、金錢草片（JQC）組、廣金錢草片（GJQC）組、聚花過路黃片（JHGLH）組、空白組，每組8只。

大鼠給藥以人和動物按體表面積折算的臨床等效劑量給藥，大鼠劑量換算系數(shù)為0.018。利膽排石片臨床用量1次6～10片，1日2次，1天劑量折合生藥量為13.2 g～22 g，大鼠用藥劑量即為（1.2～2.0）g/kg，本研究采用1.5 g/kg的劑量給藥;金錢草片臨床用量1次4～8片，1日3次，1天劑量折合生藥量為24 g～48 g，大鼠劑量即為（2.2～4.3）g/kg，本研究采用3.0 g/kg的劑量給藥。

2.2 對大鼠尿液排出量的影響 采用大鼠代謝籠法[18]。大鼠適應性喂養(yǎng)1周，實驗前禁食（正常飲水）18 h，每只大鼠按20 mL/kg灌服純化水，收集2 h尿液，選用尿量達灌服量的40%以上水負荷者為合格動物。篩選出水負荷量合格的56只動物，隨機分成7組，即空白組、LDPS組、LDPS-G組、LDPS-JH組、JQC組、GJQC組、JHGLH組，每組8只，模型篩選完30 min后，藥物組按20 mL/kg體重分別灌胃相應劑量的藥液，空白組以相同容量的純化水灌胃，給藥后立即放入代謝籠內（每籠1只）。連續(xù)收集6 h尿液，分別記錄第1、2、3、4、5、6 h尿量（mL），分析各時間段組間尿液排出量的差異性。

2.3 對大鼠膽汁排出量的影響 大鼠排尿量實驗結束后，繼續(xù)喂養(yǎng)1周，進行膽汁排出量實驗，分組同2.2對大鼠尿液排出量的影響。手術前動物禁食不禁水18 h，腹腔注射濃度為25%的烏拉坦溶液麻醉大鼠，給藥體積為0.5 mL/100g（體重），固定大鼠，于胸骨劍突下，腹部橫切開口約3 cm，找到胃幽門處，翻轉十二指腸，找到連接肝臟的一條靜脈，與靜脈并行的一條約1 mm粗細淺黃色管道，即為膽管，分離膽管旁的系膜及脂肪組織，在近十二指腸端用解剖針挑起膽管，用5號靜脈輸液針向肝端膽管插入，待膽汁流出順暢后，用動脈夾固定針頭，用生理鹽水濕潤的紗布覆蓋腹部，引流的靜脈輸液管留取約6 cm長，1 mL EP管收集膽汁，膽汁流量穩(wěn)定后，計時，收集30 min內膽汁，用1 mL注射器抽取膽汁讀數(shù)，即為給藥前膽汁流量;30 min后，各藥物組于十二指腸處以相應的藥物注射給藥1次，空白組以純化水注射給水1次，給藥、給水體積按10 mL/kg體重計，收集膽汁，連續(xù)收集給藥3 h內的膽汁，每30 min讀數(shù)1次，記錄數(shù)據(jù)。比較動物給藥前后各時間段各組間膽汁排出量的差異性。

2.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析，用獨立樣本t檢驗，計量資料均以（x±s）表示，P<0.05表示有顯著性差異，P<0.01表示有非常顯著性差異。

3 結果

3.1 對大鼠尿液排出量的影響 與空白組比較，各藥物組在6 h內排出的尿液量明顯增加，有非常顯著性差異（P<0.01）;LDPS組在第1 h內尿液排出量明顯增加（P<0.01），在第3、4 h尿液排出增加明顯（P<0.05），其他各時間段內尿液排出量均無明顯差異;LDPS-G組在第4、5 h尿液排出增加明顯（P<0.05），其他各時間段內尿液排出量均無明顯差異;LDPS-JH組在第1 h尿液排出量明顯增加（P<0.01），其他各時間段內尿液排出量均無明顯差異;JQC組在第3、5 h尿液排出量明顯增加（P<0.01），其他各時間段內尿液排出量均無明顯差異;GJQC草組在第1、4 h尿液排出量明顯增加（P<0.01），在第3 h尿液排出量明顯增加（P<0.05），其他各時間段內尿液排出量均無明顯差異;JHGLH組在第2、3 h尿液排出量明顯增加（P<0.05），在第4、5 h尿液排出量明顯增加（P<0.01），其他各時間段內尿液排出量均無明顯差異。結果見表1。

與LDPS組比較，LDPS-G組在第1 h尿液排出量明顯減少，在第5、6 h尿液排出量明顯增加（P<0.05），其他各時間段內尿液排出量均無明顯差異;LDPS-JH組在第3 h尿液排出量明顯減少（P<0.05），其他各時間段內尿液排出量均無明顯差異。結果見表1。

與JQC組比較，GJQC組在第1 h尿液排出量明顯增加、第5 h尿液排出量明顯減少（P<0.01），其他各時間段內尿液排出量均無明顯差異;JHGLH組在各時間段內尿液排出量均無明顯差異。結果見表1。

與LDPS組比較，LDPS-G組在給藥后的3 h內的第5、6個30 min膽汁排出量明顯減少，有顯著性差異（P<0.05），在第1、2、3、4個30 min膽汁排出量無明顯差異;LDPS-JH組在給藥后的3 h內的6個30 min內膽汁排出量均無明顯差異。結果見表2。

與JQC組比較，GJQC組在給藥后3 h內的6個30 min內膽汁排出量均無明顯差異;JHGLH組在給藥后3 h內的第1個30 min內膽汁排出量明顯增加（P<0.05），在第2、3、4、5、6個30 min膽汁排出量無明顯變化。結果見表2。

4 討論

排尿量實驗結果顯示，LDPS、LDPS-G、LDPS-JH、JQC、GJQC、JHGLH都有明顯利尿作用，但各藥起效時間有所差異，其中LDPS、LDPS-JH、GJQC顯效較快，1 h內即見明顯利尿作用，除LDPS-JH外，各藥均在用藥后3～5 h有較強利尿作用顯現(xiàn)。

利膽排石片（LDPS）、金錢草片（JQC）中金錢草替以廣金錢草或聚花過路黃后對兩種制劑的總利尿效果并無影響。但根據(jù)GJQC與LDPS-G在6 h內各時間段的尿液排出情況得出，GJQC從明顯增加到明顯減少，推斷廣金錢草起效快，維持時間較短，LDPS-G是從明顯減少到明顯增加，兩者都含廣金錢草，但利尿效果快慢卻有明顯差異，分析其原因可能是GJQC為單方制劑，無其他藥材的相互作用，其利尿作用即是廣金錢草呈現(xiàn)出的效果，而LDPS-G為復方制劑，廣金錢草的利尿效果會受到組方中其他9味藥的影響，其影響機制有待進一步研究。

膽汁排出量實驗結果表示，LDPS、LDPS-G、LDPS-JH、JQC、GJQC、JHGLH在3 h內都有明顯促進膽汁排出作用，即均有利膽作用，其中LDPS、LDPS-G、LDPS-JH、JHGLH顯效快，用藥30 min內膽汁排出就有明顯增加，JQC、GJQC顯效相對較慢，在30 min后顯示出明顯利膽作用。LDPS中金錢草替以廣金錢草后，利膽作用在2～3 h明顯降低，替以聚花過路黃后，利膽作用無明顯變化。JQC中金錢草替以廣金錢草后，利膽作用無明顯差異，替以聚花過路黃后，膽汁排出量在30 min內增加明顯，30 min后增加效果不明顯。

綜上所述，可以得出利膽排石片（LDPS）中金錢草被廣金錢草取代后，利膽作用在2 h后有明顯降低，而利尿作用卻自3 h始有增加趨勢，至5 h增加明顯，因此，項目組成員認為以金錢草為君藥、以防治膽石癥為主要療效的中藥復方，不能以廣金錢草替代配方，但是以防治尿石癥為主要療效的，用廣金錢草替代后可能通過促進尿液的排出增強復方的療效，此結果與已有報道金錢草與廣金錢草在防治結石方面的選擇性作用相吻合[10，19]。金錢草片（JQC）中金錢草被廣金錢草取代后，利尿作用起效較快，維持時間短，臨床上可以用于比較急的狀況，通過增加服用次數(shù)來達到較為滿意的療效。LDPS、JQC中金錢草替以聚花過路黃后，對大鼠尿液、膽汁的排出量均無明顯變化，該結果可以解釋現(xiàn)今臨床上金錢草、聚花過路黃2個品種混用于抗結石藥方中，而又能取得較好療效的現(xiàn)象。

另外，聚花過路黃原本是1味民間草藥，據(jù)俞冰[20]等考證，該藥最早記載于清朝趙學楷所撰的《百草鏡》，名為“地蜈蚣”;2006年版《中藥大辭典》以“風寒草”收載，曰：“能祛風散寒、化痰止咳、解毒利濕、消積排石，用于風寒頭痛、咳嗽痰多、黃疸、膽道結石、尿路結石等的治療”[21];2010年版《四川省中藥材標準》以“風寒草”收載[22]，有祛風散寒，化痰止咳，解毒利濕，消積排石的功效，用于風寒頭痛、咳嗽痰多、尿路結石等的治療?，F(xiàn)今，中醫(yī)臨床少有以“風寒草”等為名以聚花過路黃全草入藥治療結石，卻常被發(fā)現(xiàn)以“金錢草”的混偽品身份出現(xiàn)[11，14]，本文結果表明，聚花過路黃在促進動物尿液、膽汁排出方面有明顯作用，與金錢草相似，且其植株常生于路旁、溪邊、荒山坡等處，極富密集性，繁殖容易，綠色持續(xù)期較長，常被用作優(yōu)良野生地被植物資源[23]，資源豐富，因而建議在臨床做相關對照研究，嘗試在有明確臨床療效基礎上，為“聚花過路黃”正名，進一步推廣臨床應用，恢復其在醫(yī)療中的地位，而不是以金錢草的混偽品出現(xiàn)于市場或臨床，又因各本草記載的功效有別，其究竟具有哪些方面的療效，也有待進一步研究。

項目組成員后續(xù)將就利膽排石片（LDPS）、金錢草片（JQC）中金錢草被廣金錢草或聚花過路黃取代后，對結石模型動物的結石形成影響做進一步研究。

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