（深圳市計量質(zhì)量檢測研究院，深圳市，518000） 鐘 杰

2015 版《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》要求對于微生物檢測主要是細(xì)菌總數(shù)與霉菌和酵母菌總數(shù)，在總數(shù)控制于標(biāo)準(zhǔn)以下的前提下,不得檢測出耐熱大腸菌群、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌。

醫(yī)用敷料和藥妝因其成分簡單，標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格得到了越來越多人的信賴。化妝品被致病菌污染后，不但會影響到產(chǎn)品的良好品牌形象，對公司的經(jīng)濟(jì)造成致命性打擊，同時還會對客戶的身體造成嚴(yán)重的危害。所以，不管是哪個國家，對于化妝品的質(zhì)量安全，都非常的關(guān)注，世界上各個國家或者地區(qū)都推行了屬于自己國家的化妝品微生物含量標(biāo)準(zhǔn)，對微生物的含量進(jìn)行了明確的規(guī)定，這樣就能夠最大程度減少微生物產(chǎn)生的病毒對化妝品產(chǎn)生的污染現(xiàn)象，不但能夠提升其質(zhì)量安全，同時還能夠保護(hù)消費(fèi)者的身體健康。

1 致病菌與化妝品關(guān)系

1.1 微生物基本特征

微生物體積微小基本肉眼不可見，不過種類非常多元化，并且分布的區(qū)域比較寬泛，當(dāng)處于比較合適的環(huán)境當(dāng)中，就會開始迅速的繁殖。微生物并不是全部都是壞的，也有好的，不過一些致病菌會危害人體的健康。

1.2 兩者關(guān)系

化妝品每增加一個功能，它的原料成分就也會增加，原料環(huán)境會成為這些致病菌繁衍的優(yōu)質(zhì)發(fā)展搖籃，這是因?yàn)檫@些原料當(dāng)中具備了碳源等多種營養(yǎng)成分。并且化妝品基本上都是由水分構(gòu)成的，潮濕的環(huán)境利于致病菌的生長和繁殖。此外化妝品的酸堿度為PH4-7之間，儲藏溫度20～30℃，這些均與細(xì)菌霉菌等致病菌的生長條件接近。以上因素都為致病菌在化妝品中生存和繁衍提供了條件，在劣質(zhì)化妝品中致病菌超標(biāo)或保存過程中顏色變化氣味霉變將會使使用者不同程度患病感染，因此檢測控制化妝品中的微生物極為重要。

2 材料與方法

2.1 樣品來源

隨機(jī)抽樣市面上常見的化妝品，水乳護(hù)膚類10份、洗發(fā)水10份和口紅彩妝類各抽取15份，共計65份樣品。

2.2 方法

新頒布的《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（2015）規(guī)定進(jìn)行微生物指標(biāo)安全性評價（見表1）。不得檢出耐熱大腸菌群/g（或ml）、金黃色葡萄球菌/g（或ml）和銅綠假單胞菌/g（或ml）。

表1 微生物部分安全性指標(biāo)

3 實(shí)驗(yàn)過程

3.1 菌落總數(shù)及霉菌和酵母菌數(shù)

菌落總數(shù)是指1g(或1mL)檢樣中所含菌落的總數(shù)。通過跟化妝品的安全標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對比，看樣本的各項(xiàng)指標(biāo)符不符合，如果指標(biāo)不符合，會對樣品造成多大的污染。

按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（2015）利用標(biāo)準(zhǔn)的檢測手段，對六十五份樣品的菌落情況進(jìn)行觀察并作出記錄，按照霉菌跟酵母菌正常生長狀況，在孟加拉紅培養(yǎng)基上，放入28℃±2℃培養(yǎng)。所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表2。

表2 菌落總數(shù)及霉菌和酵母菌數(shù)不合格件數(shù)

3.2 耐熱大腸菌群檢驗(yàn)

耐熱大腸桿菌系指一群革蘭氏陰性無芽孢桿菌，這種菌會對人的腸道造成傷害，在對化妝品進(jìn)行質(zhì)檢的時候，一定要針對其含量進(jìn)行試驗(yàn)檢測。

制備10g/ml 的樣品，加90ml 滅菌生理鹽水，從中取10mL稀釋液，加到10mL雙倍乳糖膽鹽的培養(yǎng)基中，置44℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至48h，不會出現(xiàn)酸性氣質(zhì)，也不會出現(xiàn)氣體的時候，就為耐熱大腸菌群陰性。即所選取的這幾類化妝品均不含耐熱大腸桿菌，統(tǒng)計數(shù)據(jù)見表3。

3.3 金黃葡萄球菌檢驗(yàn)

金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌，呈葡萄狀排列，無芽胞和莢膜。這種菌會讓人身體出現(xiàn)問題，嚴(yán)重的時候還會出現(xiàn)敗血癥的病狀，危急人的身體健康。能分解甘露醇，血漿凝固酶陽性。

取10ml稀釋的樣品接種到90mLSCDLP液體培養(yǎng)基中，置36℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)至24h，上述形態(tài)特征疑似菌落接種到甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)基液面上加入2mm～3mm 的滅菌液體石蠟，置36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)至24h，沒有出現(xiàn)產(chǎn)酸現(xiàn)象，則報告無金黃葡萄球菌。所選取的這幾類化妝品均不含金黃葡萄球菌，統(tǒng)計數(shù)據(jù)見表3。

表3 檢出三種致病菌的件數(shù)

3.4 銅綠假單胞菌檢驗(yàn)

銅綠假單胞菌屬于假單胞菌屬為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶陽性，能產(chǎn)生綠膿菌素。這種菌類會讓人的傷口出現(xiàn)化膿現(xiàn)象，病情加重。

取10ml樣品稀釋液接種到90mLSCDLP液體培養(yǎng)基中，置36℃培養(yǎng)基18h～24h，無薄膜出現(xiàn)。對可疑菌落氧化酶實(shí)驗(yàn)，滴加一滴1%二甲基對苯二胺試液，在15s～30s 之內(nèi)，不變色，則為氧化酶試驗(yàn)陰性，則報告為銅綠假單胞菌陰性。即所選取的這幾類化妝品均不含銅綠假單胞菌，統(tǒng)計數(shù)據(jù)見表3。

4 分析討論

按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（2015）規(guī)定方法檢測，如果在質(zhì)量檢測的過程當(dāng)中，化妝品當(dāng)中的微生物含量只有一種是不符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的，那么就會影響到化妝品整個的質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)得出，眼唇類中，檢出1件口紅不合格，其余口紅和全部睫毛膏符合要求；其他類的化妝品中，檢出1件洗發(fā)水，2件粉底液不合格，檢測的水乳符合要求。檢測的化妝品中沒有不符合標(biāo)準(zhǔn)含量的霉菌和酵母菌（CFU/g 或CFU/ml）。所以得出結(jié)論，控制菌的含量是完全合格的。

本次檢驗(yàn)隨機(jī)抽取的化妝品均為未拆封，市面上常見的化妝品生產(chǎn)廠家均按照規(guī)定控制了微生物的含量，生產(chǎn)的均為達(dá)標(biāo)產(chǎn)品。化妝品中均添加了在規(guī)定范圍內(nèi)的防腐劑，但要注意購買化妝品后在使用過程中要注意衛(wèi)生，在限定使用日期內(nèi)用，減少因過期儲藏使病菌繁殖帶來二次污染。

通過本實(shí)驗(yàn)的研究討論希望為化妝品微生物檢測提供支持和幫助。

5 展望

現(xiàn)如今化妝品行業(yè)越來越成為暴利行業(yè)，微商和不知名商家經(jīng)過低成本的加工就可以獲取極大的利潤。但是因其生產(chǎn)條件不符合標(biāo)準(zhǔn)，微生物含量可能超標(biāo)，這可能對消費(fèi)者構(gòu)成潛在的健康風(fēng)險，給使用者帶去難以想象的傷害。隨著打假行動的開展，黑作坊生產(chǎn)的假冒偽劣產(chǎn)品被曝光了出來，不合標(biāo)準(zhǔn)的美容院也都關(guān)門倒閉，化妝品的安全質(zhì)量受到了更多的關(guān)注。

由于世界各個國家之間的聯(lián)系越來越密切，國內(nèi)的化妝品市場同樣也受到國際市場的沖擊。在市場出現(xiàn)的化妝品，來自世界各個國家，比如韓國、日本等等，進(jìn)出口貿(mào)易的發(fā)展，使得化妝品幾經(jīng)轉(zhuǎn)手，才到消費(fèi)者的手中，而在轉(zhuǎn)手的過程當(dāng)中，其微生物的檢測實(shí)際操作性比較的困難，盡管加大了檢測的力度，化妝品的合格率也在不斷的提高，不過微生物含量超出標(biāo)準(zhǔn)依舊是當(dāng)前難以監(jiān)管的主要內(nèi)容之一，不凡有貪圖便宜的消費(fèi)者過敏、冒痘出現(xiàn)。將不合格化妝品攔截在上市之前，降低經(jīng)濟(jì)損失，微生物指標(biāo)的檢測就顯得十分重要。我國化妝品的微生物檢測技術(shù)還處于發(fā)展時期，亟待嚴(yán)格的制度規(guī)范。有關(guān)監(jiān)督部門應(yīng)當(dāng)對化妝品的微生物檢測重視起來，對于制度標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該設(shè)計的更加嚴(yán)格，借助先進(jìn)的技術(shù)手段，對其微生物含量展開嚴(yán)格的檢測跟評估，研究出來高效無害的防腐試劑，更好推動化妝品行業(yè)的健康、快速高質(zhì)量的發(fā)展。