王英華 ， 王 翠 ， 靳 冬 ， 楊海波 ， 劉 敏 ， 方先珍 ， 閆若潛

(河南省動物疫病預(yù)防控制中心 ， 河南 鄭州 450008)

當(dāng)前重大動物疫情形勢復(fù)雜，基層防疫能力薄弱，通過開展種豬場主要動物疫病凈化工作，可有效減少父母代場、商品場等養(yǎng)殖場的疫病隱患，緩解動物疫病防控壓力；可有效改善養(yǎng)殖場的防疫條件、生物安全和管理水平，提高綜合防治能力；可有效保障養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展和公共衛(wèi)生安全。自2013年以來，河南省將豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病和口蹄疫定為種豬場主要凈化病種，省動物疫病預(yù)防控制中心和18個省轄市、10個直管縣動物疫病預(yù)防控制中心等29個監(jiān)測單位常年對種豬場進行豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病和口蹄疫凈化方案指導(dǎo)和監(jiān)測、淘汰、凈化工作。

1 材料與方法

1.1 主要試劑 豬瘟病毒野毒株實時熒光RT-PCR檢測試劑盒，購自北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司；豬繁殖與呼吸綜合征病原檢測試劑盒(高致病性與經(jīng)典株鑒別熒光RT-PCR)，購自洛陽萊普生生物技術(shù)有限公司；豬瘟病毒抗體檢測試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬病gI抗體檢測試劑盒和豬偽狂犬病gB抗體檢測試劑盒，均購自美國艾德士生物技術(shù)有限公司；口蹄疫3ABC抗體檢測試劑盒，購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.2 樣品采集及處理 2013-2017年每年度在河南18個省轄市和10個直管縣所有種豬場采集育肥豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、種公豬的扁桃體或精液及對應(yīng)的血清樣品30～50份/場，進行病原學(xué)(感染抗體)和抗體檢測。扁桃體樣品用專用采樣器進行采樣，樣品裝入無菌離心管，-20 ℃保存。用無菌離心管取種豬精液2～3 mL，-20 ℃保存。用一次性采血器采集豬只前腔靜脈血，溫箱37 ℃放置1～2 h后，以4 000 r/min離心5 min，取上清液轉(zhuǎn)入新的無菌離心管，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 病原學(xué)檢測 豬瘟病毒檢測按照豬瘟病毒野毒株實時熒光RT-PCR檢測試劑盒說明書進行；豬繁殖與呼吸綜合征毒按照豬繁殖與呼吸綜合征病病原檢測試劑盒(高致病性與經(jīng)典株鑒別熒光RT-PCR)說明書進行。

1.4 血清學(xué)檢測 豬瘟抗體按照豬瘟病毒抗體檢測試劑盒說明書進行；豬繁殖與呼吸綜合征抗體按照豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測試劑盒說明書進行；豬偽狂犬病豬gI、gB抗體分別按照豬偽狂犬病gI抗體檢測試劑盒和豬偽狂犬病gB抗體檢測試劑盒說明書進行。

2 結(jié)果

2.1 病原學(xué)(或感染抗體)檢測結(jié)果 2013-2017年河南省種豬場豬瘟病原學(xué)個體陽性率分別為5.07%、1.19%、0.18%、0和0，群體陽性率分別為9.43%、2.13%、0.67%、0和0，自2013年河南全省種豬場開展豬瘟凈化至今，種豬場豬瘟病原的檢出率呈逐年下降趨勢，2016年和2017年連續(xù)兩年全省種豬場豬瘟病原未檢出。

2013-2017年河南省種豬場豬偽狂犬病gE抗體個體陽性率分別為45.39%、44.97%、37.65%、24.92%和25.19%，自2013年河南全省種豬場開展豬偽狂犬病凈化工作，至2016年種豬場豬偽狂犬病gE抗體陽性率呈逐年下降趨勢，2017年豬偽狂犬病gE抗體陽性率比2016年稍高。

2013-2017年河南省種豬場豬繁殖與呼吸綜合征病原學(xué)個體陽性率分別為3.9%、0.85%、1.87%、2.48%和0.78%，群體陽性率分別為7.02%、4.35%、7.86%、11.64%和4.94%，自2013年河南全省種豬場開展豬繁殖與呼吸綜合征凈化至今，種豬場豬繁殖與呼吸綜合征病原陽性率先下降又升高又下降的趨勢，具有反復(fù)性。

2013-2017年河南省種豬場口蹄疫3ABC個體陽性率分別為0、1.68%、26.85%、12.85%和3.73%，群體陽性率分別為0、14.41%、35.35%、42.37%和27.98%(見表1、2)。

表1 2013-2017年種豬場主要凈化豬病病原學(xué)(或感染抗體)監(jiān)測情況統(tǒng)計

表2 2014-2017年種豬場主要凈化豬病病原學(xué)(或感染抗體)陽性率 (%)

2.2 血清學(xué)(免疫效果)檢測結(jié)果 2013-2017年豬瘟免疫抗體合格率分別為85.76%、85.85%、87.84%、87.55%和87.99%，呈逐年小幅上升趨勢；豬繁殖與呼吸綜合征抗體陽性率分別為88.63%、85.89%、86.13%、86.49%和85.37%，5年來均保持在85%以上；豬偽狂犬病免疫抗體合格率分別為85.24%、90.21%、87.74%和94.19%，免疫抗體合格率不穩(wěn)定，呈升升降降趨勢；口蹄疫免疫抗體合格率分別為86.08%、84.45%、86.76%、84.14%和85.82%，5年來維持在84%以上(見表3、4)。

表3 2014-2017年種豬場主要凈化豬病免疫效果監(jiān)測情況統(tǒng)計

表4 2013-2017年種豬場主要凈化豬病平均免疫抗體合格率

3 討論

3.1 2013-2017年河南省種豬場豬瘟、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸綜合征和口蹄疫平均抗體合格率均保持在84%以上，超過了國家規(guī)定的70%的標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 自2013年開展種豬場主要疫病凈化工作5年來，豬瘟免疫抗體合格率呈逐年升高趨勢，2017年種豬場豬瘟平均免疫抗體合格率上升至87.99%，豬瘟病原連續(xù)2年檢測陰性，基本達到了免疫凈化階段，河南種豬場豬瘟凈化取得了一定成效。豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸綜合征和口蹄疫由于病毒自身的特點，易變異，病原陽性率和免疫抗體合格率時高時低，使得凈化難度加大。這與中國動物疫病預(yù)防控制中心主任陳偉生的觀點契合：動物疫病凈化具有長期性、反復(fù)性[1]。

3.3 自2013年河南省對全省種豬場主要疫病開展進化工作以來，除了種豬場外，河南省其他豬場(包括散養(yǎng)戶)，豬瘟病原個體陽性率呈逐年下降趨勢，群體陽性率也呈逐年下降趨勢。2013年河南所有監(jiān)測豬群豬瘟病原個體陽性率為0.86%，2017年降至0.15%，比2013年下降0.71個百分點；群體陽性率2013年為3.01%，2017年降至0.92%，比2013年下降2.09個百分點。由此可見種豬場的豬瘟凈化減少了下游豬場的疫病隱患，緩解了動物疫病防控壓力。種畜禽疫病凈化是凈化工作的重中之重[2-3]。

3.4 河南種豬場主要疫病凈化工作雖然取得了一定成效，但是疫病復(fù)雜，比如豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病和口蹄疫病毒變異較快，因此疫病凈化工作任重而道遠，我們需要繼續(xù)探索更加有效的動物疫病凈化的長效機制[4]。