王萬良，師海娜，曾本和，王金林，張慶漁

( 1.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院 水產(chǎn)科學(xué)研究所，西藏 拉薩 850000； 2.慶陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，甘肅 慶陽 745000； 3.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院 黑龍江水產(chǎn)研究所，黑龍江 哈爾濱 150000 )

蛋白質(zhì)是組成魚體一切細(xì)胞、組織的重要成分，具有完成機(jī)體生理生化功能和調(diào)控基因表達(dá)的作用[1]。與畜禽相比，魚類對(duì)飼料中蛋白質(zhì)的需求水平較高，它們通過攝取外界食物，維持正常的組織機(jī)能，補(bǔ)充損耗組織和促進(jìn)生長(zhǎng)[2]。然而，飼料中蛋白質(zhì)水平過高或過低，均對(duì)魚類生長(zhǎng)不利，對(duì)健康產(chǎn)生負(fù)面影響，合適的蛋白質(zhì)水平對(duì)優(yōu)化飼料成本、保持魚類良好的生長(zhǎng)和提高飼料蛋白質(zhì)利用率十分重要[3]。食性差異決定了魚類對(duì)蛋白質(zhì)需求不同，即使同種魚類，不同生長(zhǎng)階段對(duì)蛋白質(zhì)的需要也會(huì)不同，通常幼魚階段蛋白需求高于成魚階段。因此，設(shè)定飼料合理的蛋白質(zhì)水平是人工養(yǎng)殖產(chǎn)生良好經(jīng)濟(jì)效益的必要條件[4]。

東方高原鰍(Triplophysaorientalis)，屬鯉形目、鰍科、高原鰍屬，主要分布于雅魯藏布江水系、甘肅黃河水系、青海通天河及附屬水體，在高原鰍中屬于個(gè)體較大的種類，具有較大的開發(fā)利用價(jià)值[5-8]。我國是世界上最大的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)國[9]，研究者已經(jīng)確定了鳙魚(Aristichthysnobilis)[10]、青魚(Mylopharyngodonpiceus)[11]、黃鱔(Monopterusalbus)[12]和虹鱒(Oncorhynchusmykiss)[13]、眼斑雙鋸魚(Amphiprionocellaris)[14]等魚類對(duì)蛋白質(zhì)的需求量，包括鰍科魚類中泥鰍(Misgurnusanguillicaudatus)[15]和臺(tái)灣泥鰍(Paramisgumusdabryanusssp. Taiwan)[16]。對(duì)于東方高原鰍的研究，主要集中在個(gè)體發(fā)育學(xué)、年齡與生長(zhǎng)特性、消化道組織結(jié)構(gòu)和繁殖生物學(xué)等方面[17-22]，有關(guān)其飼料營養(yǎng)需求的研究，目前尚未見報(bào)道。筆者通過研究東方高原鰍對(duì)飼料蛋白的最適需求量，探討不同蛋白水平對(duì)東方高原鰍生長(zhǎng)性能、飼料利用率及形體指標(biāo)的影響，為東方高原鰍優(yōu)化全人工配合飼料的科學(xué)配置提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

以白魚粉、酪蛋白、南極磷蝦粉為蛋白源，以魚油為脂肪源，玉米淀粉、糊化淀粉為糖源。設(shè)計(jì)出蛋白質(zhì)水平分別為20%、25%、30%、35%、40%、45%的6種等脂等能試驗(yàn)飼料。飼料原料從河南中偌生物科技有限公司購買，經(jīng)粉碎后過60目篩，按照配比稱量質(zhì)量，采用逐級(jí)混勻法混合均勻，制粒機(jī)做成直徑2 mm飼料，置于冰箱中-4 ℃保存?zhèn)溆谩；A(chǔ)試驗(yàn)飼料組成見表1。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)東方高原鰍為2017年于拉薩河下游墨竹工卡河段捕獲的野生種，在4.0 m×3.0 m×0.6 m水泥池中馴養(yǎng)60 d。待東方高原鰍搶食正常后，選擇規(guī)格一致、健康、無傷病，體質(zhì)量為(18.36±0.91) g的東方高原鰍540尾，隨機(jī)分為6個(gè)組，每組3個(gè)平行，每個(gè)平行30尾魚，并分別放入18個(gè)0.6 m×0.5 m×0.4 m水族缸中，分別投喂蛋白質(zhì)水平不同的6種試驗(yàn)飼料，每日按試驗(yàn)魚體質(zhì)量3%～5%表觀飽食投喂3次(7:00，12:00，17:00)，投餌1 h后將殘餌撈出烘干稱量質(zhì)量并記錄，整個(gè)試驗(yàn)持續(xù)60 d。試驗(yàn)用水為曝氣后的井水，試驗(yàn)水族缸內(nèi)水24 h循環(huán)，循環(huán)量為120 L/h，水溫12.0～13.0 ℃，pH 8.0～8.5，溶解氧≥6.0 mg/L，氨氮≤0.01 mg/L，亞硝態(tài)氮≤0.02 mg/L。

1.3 樣品采集及指標(biāo)測(cè)定方法

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)試驗(yàn)魚饑餓24 h，然后對(duì)每個(gè)平行組進(jìn)行計(jì)數(shù)、稱量質(zhì)量。分別在各平行組中隨機(jī)取10尾試驗(yàn)魚用50 mg/L的間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽溶液麻醉，分別測(cè)定其體質(zhì)量后解剖取出內(nèi)臟、肝臟，分別稱量質(zhì)量用于計(jì)算臟體比、肝體比。

1.4 計(jì)算公式：

質(zhì)量增加率/%=(mt-m0)/m0×100%

特定生長(zhǎng)率/%·d-1=(lnmt-lnm0)/t×100%

攝食率/%=2×mf/[(mt+m0)×t]×100%

飼料系數(shù)=mf/(mt-m0)

蛋白質(zhì)效率=(mt-m0)/(mf×P)

成活率/%=nf/ni×100%

肥滿度=100mt/L3

臟體比/%=mv/mt×100%

肝體比/%=mh/mt×100%

式中，m0、mt分別為試驗(yàn)魚的初始體質(zhì)量和終末體質(zhì)量(g)，t為養(yǎng)殖時(shí)間(d)，mf為飼料攝入量(g)，P為飼料粗蛋白質(zhì)含量(%)，nf、ni分別為試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)試驗(yàn)魚的數(shù)量(尾)，L為體長(zhǎng)(cm)，mv、mh分別為試驗(yàn)魚內(nèi)臟團(tuán)、肝臟的質(zhì)量(g)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因子方差分析，若差異顯著，則進(jìn)行Duncan′s多重比較，差異顯著水平為0.05。

回歸曲線均用Excel 2010制作。

2 結(jié) 果

2.1 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)東方高原鰍攝食和生長(zhǎng)的影響

飼料蛋白水平對(duì)東方高原鰍生長(zhǎng)性能的影響見表2。隨著飼料蛋白水平的增加，東方高原鰍攝食率呈先升高后趨于穩(wěn)定的變化趨勢(shì)，且在飼料蛋白水平為40%時(shí)最大，為2.14%，顯著高于20%飼料蛋白組(P<0.05)，與其他試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)，以二次曲線來擬合飼料蛋白水平(x)與攝食率(y)的關(guān)系，得到回歸方程y=-4.2857x2+3.4943x+1.3883(r2=0.8869)(圖1)，東方高原鰍最佳攝食率的飼料蛋白水平為40.77%。質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率隨著蛋白水平的增加呈先升高后趨于穩(wěn)定的趨勢(shì)，折線模擬結(jié)果(圖2、圖3)表明，飼料蛋白水平分別高于32.48%和33.64%后，東方高原鰍質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率不再顯著升高。飼料蛋白水平為40%時(shí)，東方高原鰍成活率最高，為67.22%，但各試驗(yàn)組成活率差異不顯著(P>0.05)。

圖3 飼料蛋白水平對(duì)東方高原鰍特定生長(zhǎng)率的影響

圖2 飼料蛋白水平對(duì)東方高原鰍質(zhì)量增加率的影響

圖1 飼料蛋白水平對(duì)東方高原鰍攝食的影響

表2 飼料蛋白水平對(duì)東方高原鰍攝食和生長(zhǎng)的影響

2.2 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)東方高原鰍形體指標(biāo)的影響

飼料蛋白水平對(duì)東方高原鰍形體指標(biāo)的影響見表3。飼料蛋白水平為35%時(shí)，東方高原鰍肥滿度最低，為0.97，但與其他試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)。飼料蛋白水平為20%時(shí)，東方高原鰍臟體比和肝體比均最低，分別為22.11%和2.08%，與其他試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)。

表3 飼料蛋白水平對(duì)東方高原鰍形體指標(biāo)的影響

2.3 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)高原鰍飼料利用的影響

飼料蛋白水平對(duì)東方高原鰍飼料利用的影響見表4。隨著飼料蛋白水平的增加，東方高原鰍氮攝入量和絕對(duì)氮攝入量均逐漸增加(圖4)，通過線性回歸得出，飼料蛋白水平(x)與氮攝入量(y)回歸方程分別為：y=4.9714x-0.229(r2=0.993)。飼料蛋白水平由20%增至45%，蛋白質(zhì)效率呈先升后降趨勢(shì)，以二次曲線來模擬飼料蛋白水平與蛋白質(zhì)效率的關(guān)系(圖5)，得到回歸方程：y=-17.571x2+9.5471x-0.0887(r2=0.9282)，則蛋白質(zhì)效率最高時(shí)的飼料蛋白水平為27.17%。餌料系數(shù)隨著蛋白質(zhì)水平的增加，呈先降低后逐漸趨于穩(wěn)定的變化趨勢(shì)，基于折線模擬結(jié)果(圖6)，飼料蛋白水平高于29.37%后，東方高原鰍餌料系數(shù)不再顯著降低。

表4 飼料蛋白水平對(duì)高原鰍飼料利用的影響

圖4 飼料蛋白水平對(duì)高原鰍氮攝入水平的影響

圖5 飼料蛋白水平對(duì)高原鰍蛋白質(zhì)效率的影響

圖6 飼料蛋白水平對(duì)高原鰍飼料系數(shù)的影響

3 討 論

3.1 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)東方高原鰍生長(zhǎng)性能的影響

蛋白質(zhì)是魚體生長(zhǎng)所必需的營養(yǎng)物質(zhì)之一，占魚類干物質(zhì)質(zhì)量的65%～75%，除了提供魚體生長(zhǎng)所需的必需氨基酸，還可以提供所需的部分能量[23]。飼料中蛋白含量過高，多余的蛋白用于代謝功能，氨氮排放量增加，對(duì)魚類產(chǎn)生毒害作用并污染養(yǎng)殖環(huán)境；蛋白含量過低，抑制魚類生長(zhǎng)[24]。本試驗(yàn)中，東方高原鰍末體質(zhì)量、質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率均與飼料蛋白有較強(qiáng)的相關(guān)性；隨著飼料蛋白水平的升高，質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率均呈先升高后趨于穩(wěn)定的變化趨勢(shì)，當(dāng)飼料蛋白水平升至35%時(shí)，過高的蛋白質(zhì)將不再用于其生長(zhǎng)，由于該試驗(yàn)飼料為等能飼料，高蛋白質(zhì)水平組飼料的非蛋白質(zhì)能較少，大量的蛋白質(zhì)作為能量被消耗掉，這對(duì)草魚(Ctenopharyngodonidellus)[25]和克林雷氏鲇(Rhamdiaquelen)[26]的研究的結(jié)果一致，進(jìn)一步驗(yàn)證了以上觀點(diǎn)。另外，有研究表明，隨著飼料蛋白水平的增加，魚類的攝食率會(huì)呈先升后降的變化趨勢(shì)，從而影響魚類的生長(zhǎng)[27]。本試驗(yàn)除蛋白水平20%組外，其余組均不存在顯著性差異，分析原因可能是，在自然水體中食物十分匱乏，東方高原鰍對(duì)餌料的選擇性很低。

3.2 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)東方高原鰍攝食形體指標(biāo)的影響

肥滿度是反映魚體肥瘦程度和生長(zhǎng)情況的形體指標(biāo)，與攝入的飼料蛋白水平密切相關(guān)。在本試驗(yàn)中，魚體肥滿度不受飼料蛋白水平的顯著影響，與刺鲃(Barbodescaldwelli)[28]、北方須鰍(Barbatulabarbatula)[29]、大鱗鲃(Barbuscapito)[30]的研究結(jié)果相一致；但也有研究表明，肥滿度受飼料蛋白水平的顯著影響[31]。究其原因可能是魚的種類不同，造成體質(zhì)量和體長(zhǎng)增長(zhǎng)速度不同，從而影響其肥滿度的變化。肝體比和臟體比作為形態(tài)學(xué)指標(biāo)，可以反映魚類的營養(yǎng)狀態(tài)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著飼料蛋白水平升高，肝體比和臟體比無顯著性影響，與陳建明等[11]報(bào)道青魚的臟體比與飼料蛋白水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系不一致，具體原因還需進(jìn)一步研究。

3.3 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)東方高原鰍飼料利用率的影響

蛋白質(zhì)是魚類正常發(fā)育最重要的物質(zhì)基礎(chǔ)，大多數(shù)魚類對(duì)飼料蛋白質(zhì)的需求量為30%～60%[32-33]，在一定范圍內(nèi)提高飼料蛋白水平能滿足魚體的營養(yǎng)需求，可促進(jìn)魚類的生長(zhǎng)和飼料利用率，但過量的飼料蛋白會(huì)通過肝臟脫氨基作用轉(zhuǎn)化為能源被消耗掉，同時(shí)由于蛋白源價(jià)格昂貴，導(dǎo)致飼料的成本提高。Santiago等[33]研究發(fā)現(xiàn)，等能的高蛋白水平飼料含有的非蛋白能量不足，使部分飼料蛋白被魚體分解轉(zhuǎn)化為能量，導(dǎo)致蛋白質(zhì)效率下降。本研究結(jié)果表明，東方高原鰍蛋白質(zhì)效率隨著飼料蛋白水平呈先升后降的變化趨勢(shì)，通過二次曲線擬合最高蛋白水平為27.17%，而餌料系數(shù)呈先降低后趨于穩(wěn)定的變化趨勢(shì)，通過折線模擬最低飼料系數(shù)時(shí)，蛋白水平為29.37%，低于其他相關(guān)研究報(bào)道，可能原因是東方高原鰍長(zhǎng)期生活水域餌料生物匱乏，對(duì)餌料匱乏、餌料蛋白低的環(huán)境產(chǎn)生了適應(yīng)性，具體因素還需設(shè)置相關(guān)試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。筆者基于飼料蛋白水平對(duì)攝食率、特定生長(zhǎng)率、成活率和形體指標(biāo)的綜合影響結(jié)果，初步確定東方高原鰍蛋白適宜需求為27.17%～33.64%。

4 結(jié) 論

綜上所述，適當(dāng)提高飼料蛋白質(zhì)水平可提高東方高原鰍生長(zhǎng)速度，提高其蛋白質(zhì)利用率，降低餌料系數(shù)，綜合考慮攝食率、質(zhì)量增加率、特定生長(zhǎng)率、成活率、蛋白質(zhì)效率和飼料系數(shù)，東方高原鰍適宜蛋白水平需求為27.17%～33.64%。