朱磊 郭紅兵 金美春 李于西(浙江海正藥業(yè)股份有限公司，浙江 臺州 318000)

0 引言

全面質(zhì)量管理(Total quality management，TQM)屬于質(zhì)量管理的里程碑。全面指的是對藥品研發(fā)全工程的管理。全面質(zhì)量管理的重點(diǎn)是設(shè)計(jì)為主，持續(xù)改進(jìn)，同時(shí)以客戶為中心，全面提高水平。在藥品研發(fā)過程中，質(zhì)量管理涉及的內(nèi)容非常多。本文以索利那新原料藥為例，采用液相和氣相兩種方式，分析藥物質(zhì)量控制要點(diǎn)。

1 關(guān)于索利那新的質(zhì)量控制

索利那新是一種用于膀胱過度活動(dòng)癥患者，伴有的尿失禁和/或尿頻、尿急癥狀的治療的藥物，在醫(yī)療市場獲準(zhǔn)治療范圍較廣。對索利那新原料藥的質(zhì)量進(jìn)行研究，可優(yōu)化質(zhì)量，保證產(chǎn)品的穩(wěn)定。在原料藥質(zhì)量控制過程中，比較復(fù)雜的就是雜質(zhì)的研究與控制。

1.1 索利那新原料藥的雜質(zhì)以及主要反應(yīng)步驟

通常雜質(zhì)引入的途徑有以下幾種途徑：在生產(chǎn)工藝中引入(存在原因：原料不純、原料反應(yīng)不完全、副反應(yīng)產(chǎn)生雜質(zhì))；在貯存過程中引入(貯存過程中受到溫度、濕度、光照、氧化等外因的干擾產(chǎn)生雜質(zhì))。在生產(chǎn)工藝中引入雜質(zhì)需要從源頭進(jìn)行控制，按照合成線路的各個(gè)步驟使用的原料進(jìn)行逐個(gè)分析。

關(guān)于索利那新原料藥，反應(yīng)步驟如下：

反應(yīng)步驟:從1，2，3，4-四氫異喹啉合成得到中間體1，中間體1 與R-奎寧醇合成得到中間體2，中間體2 與結(jié)合生成成品索利那新。

主要原料：1，2，3，4-四氫異喹啉、R-3-奎寧醇，分別從性狀、紅外及液相保留時(shí)間鑒別、卡爾費(fèi)休水分分析，及液相、氣相及滴定法對含量、雜質(zhì)、異構(gòu)體、熾灼殘?jiān)治龅确矫孢M(jìn)行質(zhì)量檢測。四氫異喹啉要求總雜質(zhì)不大于1.0%，其他單個(gè)最大雜質(zhì)不大于0.3%，含量98.0%～102.0%，異構(gòu)體雜質(zhì)不大于0.5%。R-3-奎寧醇要求氣相總雜質(zhì)不大于1.0%，其他單個(gè)最大雜質(zhì)不大于0.2%，通過滴定法進(jìn)行含量控制，要求其含量不低于85%，異構(gòu)體雜質(zhì)不大于0.2%。

在合成過程中，通過高效液相色譜監(jiān)測反應(yīng)轉(zhuǎn)化程度，控制反應(yīng)液中原料1，2，3，4-四氫異喹啉的殘留量不大于0.3%；工藝操作中設(shè)計(jì)了精制工序，以進(jìn)一步去除雜質(zhì)。

1.2 索利那新原料藥質(zhì)量控制體系以及標(biāo)準(zhǔn)的建立

結(jié)合工藝流程、藥典以及國際法的要求，對于索利那新建立合理的質(zhì)量控制體系，關(guān)于質(zhì)量控制體系的建立標(biāo)準(zhǔn)，氣、液相相關(guān)內(nèi)容如表1。

表1 相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

2 相關(guān)雜質(zhì)檢驗(yàn)分析

2.1 高效液相色譜法檢驗(yàn)測試索利那新的雜質(zhì)

高效液相色譜法的開發(fā)結(jié)合藥典通則、生產(chǎn)工藝、藥物特性(如HS026201 為潛在基因毒性雜質(zhì)，定為不大于0.015%的限度較低)等多種因素綜合研究，通過帶有紫外檢測器的反相高效液相色譜檢測索利那新的雜質(zhì)。

試劑：乙腈、水、磷酸氫二鉀、磷酸。

儀器：液相色譜儀；流動(dòng)相過濾器；A 級玻璃儀器，色譜柱：Waters RP18 峰鑒別溶液：取HS026101、HS026302 和索利那新各對照品適量，配制成各濃度約為0.5μg/mL、0.5μg/mL、0.5mg/mL的溶液。

對照溶液：取索利那新對照品適量，配制成濃度約2.5μg/ml的溶液。

樣品溶液：取索利那新樣品適量，配成濃度約0.5mg/mL 的溶液，平行配制2 份。

色譜條件：檢測波長：210nm；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL。

采集時(shí)間：約2.5 倍主峰保留時(shí)間。

完成上述操作后，制備緩沖液，運(yùn)行序列。系統(tǒng)適用性滿足要求后，如圖1，進(jìn)樣品溶液，按公式計(jì)算單個(gè)雜質(zhì)、總雜質(zhì)含量。

圖1 峰鑒別溶液

每一個(gè)參數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)都要進(jìn)行驗(yàn)證。

采用信噪比的方法來計(jì)算理論定量限和檢測限，確定方法的檢測靈敏度。

配制0.015%樣品濃度索利那新溶液、0.004%樣品濃度的HS026101、0.010%樣品濃度的HS026302，連續(xù)進(jìn)樣6 次，信噪比在10～15 之間，為定量限。將定量限溶液稀釋約3 倍，信噪比在2～5 之間，為檢測限。專屬性方面，在沒有其他峰干擾的情況下，通過分離度來評估其專屬性，要求使HS026302 與索利那新之間分離度≥3.0，則認(rèn)為專屬性符合要求。為了在精密度方面有很大的提升，需要配置6 份相同的索利那新樣品溶液(溶液A1、A2、A3、A4、A5 和A6)，并且進(jìn)樣；另一方面，配制6 份加入已知雜質(zhì)限度濃度的同一批索利那新樣品溶液(溶液AC1、AC2、AC3、AC4、ACS 和AC6)，并且進(jìn)樣。

定量精密度：接受標(biāo)準(zhǔn)為各系列的6 針進(jìn)樣結(jié)果的RSD 不大于5%。加入已知雜質(zhì)限度濃度精密度:溶液AC1、AC2、AC3、AC4、ACS 和AC6 中每個(gè)雜質(zhì)的回收率：80%～120%，RSD 不大于25%。

在線性關(guān)系方面，配制5 份不同濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液，來評價(jià)方法的線性。雜質(zhì)分別為限度濃度的400%、200%、100%、50%和25%。一方面，配制上述5 個(gè)濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液(溶液B1、C1、D1、E1 和F1)。另一方面，同樣配制相同的份索利那新溶液，加入相應(yīng)量的對照品(溶液BC1、CC1、DC1、EC1 和FC1)。每個(gè)樣品進(jìn)一次。采用最小二乘法來計(jì)算包括對照液和加入標(biāo)準(zhǔn)的對照液系列的回歸曲線來評價(jià)各溶劑量和峰面積的線性關(guān)系。線性的接受標(biāo)準(zhǔn)為:相關(guān)系數(shù)不小于0.99，截距百分比≤15.0%。

準(zhǔn)確度驗(yàn)證方法:使用溶液AC1、AC2、AC3、CC1 和DC1。計(jì)算實(shí)驗(yàn)濃度(通過代入相應(yīng)回歸曲線)和實(shí)際濃度的比值來計(jì)算溶液回收率。計(jì)算所有回收率的RSD。通過Student 檢驗(yàn)法來對準(zhǔn)確度進(jìn)行評價(jià)，以判斷回收率是否接近100%，未接標(biāo)準(zhǔn)為：定量限RSD≤50%，回收率：50%～150%，其它點(diǎn)RSD≤25%，回收率：80%～120%。經(jīng)過反復(fù)的計(jì)算，就可以得到相關(guān)的濃度范圍，也能夠確定好質(zhì)量。

2.2 氣相檢測方式

所需要的儀器：氣相色譜儀，F(xiàn)ID 檢測器，頂空進(jìn)樣器。

使用的色譜柱為：DB-624 毛細(xì)管色譜柱(30m×0.53mm×3μm)。

氣相色譜法檢測索利那新中的殘留溶劑。檢測靈敏度、線性、回收率、范圍等參數(shù)也要進(jìn)行驗(yàn)證。

3 結(jié)語

通過對索利那新氣相以及液相的相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)在保證藥品生產(chǎn)質(zhì)量中需要制定合理的指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)制定出合理的檢驗(yàn)方式。通過檢驗(yàn)分析，檢驗(yàn)的合理性、穩(wěn)定性、耐用性是檢驗(yàn)方法的重點(diǎn)。氣相、液相兩種方式都是索利那新原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測不可或缺的，可以適應(yīng)并穩(wěn)定的用于該種原料藥的檢驗(yàn)，從而保證原料藥的改善，確保最終可以達(dá)到要求，對患者的健康用藥有一定的保證。另外，需要重點(diǎn)說明一個(gè)問題，檢測分析方法長期使用穩(wěn)定性，也是重點(diǎn)關(guān)注的問題，需要我們長期的跟蹤與研究。