張 莉

河南省鄭州市第七人民醫(yī)院 450006

原發(fā)性肝癌(PHC)是一種病因及確切分子機(jī)制尚不完全清楚，臨床表現(xiàn)為肝區(qū)疼痛、腹脹、乏力、消瘦、進(jìn)行性肝大或上腹部包塊等癥狀的疾病[1]，肝細(xì)胞癌(HHC)作為原發(fā)性肝癌的主要組織學(xué)亞型，是世界排名第三的高死亡率癌癥[2]，有研究表明，HHC治療效果及預(yù)后情況與HHC早期診斷密切相關(guān)[3]，因此篩選有效的生物學(xué)標(biāo)志物對(duì)HHC的早期診斷至關(guān)重要。

本研究旨在探討血清FER、AFP-L3聯(lián)合fibulin-1蛋白檢測(cè)診斷HHC的價(jià)值，對(duì)肝病患者765例以及230例健康體檢者進(jìn)行FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白測(cè)定，研究三項(xiàng)指標(biāo)與HHC診斷與治療的相關(guān)性，現(xiàn)匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2017年1月—2018年3月在我院接受治療的肝病患者765例作為研究對(duì)象，男417例，女348例，年齡27～75歲，平均年齡(51.92±9.88)歲。其中經(jīng)病理組織學(xué)診斷與TNM分期確診的307例HHC患者作為HHC組，男193例，女114例，年齡25～73歲，平均年齡(48.96±7.18)歲，Ⅰ期69例，Ⅱ期101例，Ⅲ期112例，Ⅳ期25例，HHC組中112例進(jìn)行手術(shù)治療，作為術(shù)后對(duì)照組，Ⅰ期19例，Ⅱ期24例，Ⅲ期51例，Ⅳ期18例；187例LC患者為L(zhǎng)C組，男117例，女70例，年齡23～76歲，平均年齡(49.91±6.58)歲；271例CHS患者為CHS組，男177例，女94例，年齡27～79歲，平均年齡(53.97±7.33)歲；230例健康體檢者為健康對(duì)照組，男143例，女87例，年齡24～72歲，平均年齡(48.81±7.72)歲。四組患者的性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合HHC的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；(2)自愿參加本次研究并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并心、肝、腎等臟器嚴(yán)重受損者；(2)服用影響FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平的藥物者。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集與血清分離：所有參與試驗(yàn)者均空腹至少8h，采集靜脈血5ml，以3 000r/min離心10min，取上清置于無(wú)RNA酶EP管中，置于-80℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 檢測(cè)方法：采用雙抗夾心法檢測(cè)血清中fibulin-1蛋白和AFP-L3的水平；采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清FER水平。

1.2.3 病理診斷方法[5]：患者通過(guò)穿刺法取腫瘤組織送檢，進(jìn)行組織病理切片，HE染色后進(jìn)行顯微鏡檢查，由1名資深主任醫(yī)師與2名副主任醫(yī)師進(jìn)行病理組織學(xué)診斷與TNM分期。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)四組FER、AFP-L3、fibulin-1蛋白的水平；記錄HHC組手術(shù)前后FER、AFP-L3、fibulin-1蛋白水平以及TNM分期后各組FER、AFP-L3、fibulin-1蛋白水平；統(tǒng)計(jì)FER、AFP-L3、fibulin-1蛋白單項(xiàng)與聯(lián)合檢測(cè)的準(zhǔn)確率、漏診率、誤診率、敏感度和特異度。

2 結(jié)果

2.1 四組FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較 HHC組FER、AFP-L3均高于其他三組(P<0.05)，HHC組fibulin-1蛋白水平低于其他三組(P<0.05)，LC組、CHS組FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 四組FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較

2.2 HHC組手術(shù)前后FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較 手術(shù)前HHC組FER、AFP-L3蛋白水平均高于術(shù)后對(duì)照組(P<0.05)；術(shù)后對(duì)照組FER、AFP-L3均高于健康對(duì)照組(P<0.05)；術(shù)后對(duì)照組fibulin-1蛋白水平低于健康對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 HHC組手術(shù)前后FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較

2.3 手術(shù)前HHC組TNM各期患者FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較 手術(shù)前HHC組中，隨著TNM分期級(jí)數(shù)的上升，患者FER、AFP-L3蛋白水平逐漸升高且均高于術(shù)后對(duì)照組(P<0.05)；Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期患者fibulin-1蛋白水平逐步下降且均低于術(shù)后對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 手術(shù)前HHC組TNM各期患者FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較

2.4 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白單項(xiàng)與聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率均高于單項(xiàng)檢測(cè)(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白單項(xiàng)與聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確率

2.5 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白單項(xiàng)與聯(lián)合檢測(cè)的漏診率與誤診率 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白聯(lián)合檢測(cè)的漏診率與誤診率均低于單項(xiàng)檢測(cè)(P<0.05)，見(jiàn)表5。

表5 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白單項(xiàng)與聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度和特異度比較(%)

3 討論

HHC是一種以原發(fā)性肝癌為主要組織學(xué)亞型的惡性腫瘤疾病，是世界排名第三的高死亡率癌癥。研究表明，HHC的治療效果及預(yù)后情況與HHC早期診斷密切相關(guān)[6]，因此篩選有效的生物學(xué)標(biāo)志物對(duì)HHC的治療和預(yù)后至關(guān)重要。有研究表明，患者血清中AFP-L3表達(dá)水平異常與HHC密切相關(guān)[7]；血清中FER有HHC第二血清學(xué)標(biāo)志物之稱(chēng)，早期常被用于HHC檢測(cè)，但其敏感性較差，易誤診、漏診[8]；fibulin蛋白家族參與調(diào)控多種腫瘤的發(fā)生與發(fā)展，fibulin-1蛋白作為細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白fibulin家族中的一員，與肝癌、胃癌等腫瘤發(fā)展過(guò)程有密切關(guān)系[9-10]。

本研究選擇以FER、AFP-L3與fibulin-1為參考指標(biāo)，將單項(xiàng)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)進(jìn)行對(duì)比，旨在探討血清FER、AFP-L3聯(lián)合fibulin-1蛋白檢測(cè)診斷HHC的價(jià)值與優(yōu)勢(shì)。為了探究FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白的相關(guān)性，首先對(duì)肝病患者765例以及230例健康體檢者進(jìn)行FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)HHC組FER、AFP-L3均高于其他三組，HHC組fibulin-1蛋白水平低于其他三組，LC組、CHS組FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平與健康對(duì)照組比較無(wú)顯著差異，分析原因可能是FER作為分布于骨髓中的高分子蛋白，在血清中含量并不高，但惡性腫瘤細(xì)胞會(huì)大量分泌FER，通過(guò)膜運(yùn)轉(zhuǎn)方式以及腫瘤細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致血液中FER含量迅速升高，且含量與癌變程度成正比[11-12]。AFP是早期診斷HHC中應(yīng)用最廣泛的腫瘤標(biāo)志物，因其易受到肝炎的影響造成誤診、漏診[13]。AFP-L3作為AFP與小扁豆素(LCA)結(jié)合形成的甲胎蛋白異質(zhì)體，主要存在于惡性肝癌腫瘤細(xì)胞中，能有效地排除肝炎的干擾，提高特異性與診斷率[14]。fibulin-1蛋白作為fibulin蛋白家族中第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的腓骨蛋白，其異常表達(dá)與多種腫瘤緊密相關(guān)，受到腫瘤細(xì)胞的影響時(shí)，fibulin-1基因存在高度甲基化的啟動(dòng)子序列，而甲基化的DNA分子可以抑制其本身的轉(zhuǎn)錄，使fibulin-1蛋白分泌量減少，導(dǎo)致血清中的fibulin-1水平下降[15]。FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平會(huì)隨著患者病情的發(fā)展與手術(shù)的干預(yù)表現(xiàn)出明顯變化，患者病情加劇會(huì)導(dǎo)致FER、AFP-L3水平升高與fibulin-1蛋白水平下降；手術(shù)干預(yù)后，患者FER、AFP-L3水平降低，但仍高于健康對(duì)照組，fibulin-1蛋白水平上升，但仍低于健康對(duì)照組。通過(guò)對(duì)單項(xiàng)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果的對(duì)比，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測(cè)的各項(xiàng)檢出率、敏感度與特異度均高于單項(xiàng)檢測(cè)，本研究結(jié)果數(shù)據(jù)表明，F(xiàn)ER、AFP-L3與fibulin-1蛋白單獨(dú)作為檢測(cè)指標(biāo)時(shí)具有各自的局限性，容易出現(xiàn)漏診情況，三者結(jié)合能有效地提高特異度與靈敏度，降低誤診率與漏診率，有效提高對(duì)HHC診斷率，具有臨床應(yīng)用參考價(jià)值。

綜上所述，血清FER、AFP-L3聯(lián)合fibulin-1有望作為診斷HHC的新生物學(xué)標(biāo)志物，為HHC早期診斷，臨床HHC治療預(yù)案的制定提供參考。