胥 慧,梁紅梅,黃 華

[1.深圳市人民醫(yī)院(暨南大學第二臨床附屬醫(yī)院)內分泌科實驗室,廣東 深圳 518000；2.龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗科，廣東 深圳 518000]

原發(fā)性肝癌(Primary hepatic cancer，PHC)是我國常見的肝臟惡性腫瘤之一，起病隱匿，發(fā)現時多是中晚期，已失去最佳治療時機，疾病發(fā)展快，死亡率高[1-2]。早期發(fā)現、早期診斷、早期治療是提高PHC患者生存期的關鍵。由于影像學診斷和病理學檢測對早期診斷原發(fā)性肝癌價值有限，對原發(fā)性肝癌的診斷具有較高的敏感性和特異性的血清甲胎蛋白(AFP)成為目前臨床最常用的肝癌標志物，但AFP在原發(fā)性肝癌中的陽性率為71.59%，但對原發(fā)性肝癌的診斷仍有部分假陰性[3-4]。因此聯合檢測多種腫瘤標志物有助于提高原發(fā)性肝癌臨床診斷陽性率。血清鐵蛋白(SF)在 PHC 患者中顯著升高且與腫瘤血管侵襲或肝內轉移關系密切。熱休克蛋白90α(Hsp90α)是潛在的腫瘤標志物。本文通過對Hsp90α、AFP、SF聯合檢測來探討其對原發(fā)性肝癌的診斷價值，現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取我院2015年1月～2017年1月原發(fā)性肝癌患者血清標本70例，術后病理確診，符合原發(fā)性肝癌診斷標準(2011版)，男41例，女29例，年齡37～72歲，平均(45.73±5.79)歲；肝炎患者血清標本70例，經臨床癥狀體征、肝功能檢查以及PCR法定量檢測血清乙肝病毒DNA確診，符合病毒性肝炎防治方案，男38例，女32例，年齡36～70歲，平均(44.29±5.23)歲；健康體檢血清標本70例，男36例，女34例，年齡40～68歲，平均(45.19±5.46)歲。排除標準：①免疫系統(tǒng)疾病或服用免疫藥物者；②心、肺、肝、腎等器官功能異常及其他腫瘤者；③嚴重的感染性疾病。PHC組、肝炎組及健康體檢組在年齡、性別等一般臨床資料方面差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。醫(yī)院倫理委員會批準，三組人員及其家屬均了解此次研究內容，全部簽署知情同意書。

1.2方法：清晨空腹采集靜脈血5 ml，分離血清，置冰箱待測。SF、AFP檢測采用電化學方法，使用的E170全自動免疫分析儀及其配套試劑均由美國羅氏公司提供。ELISA法檢測Hsp90α，定量檢測試劑盒購自上海領潮科技生物有限公司。ELISA法檢測乙肝血清免疫學指標，試劑盒購自上海晶抗生物工程有限公司。AFP>20 ng/ml，SF<219 ng/ml，Hsp90α>82.06 ng/ml為陽性表達。靈敏度=真陽性例數/PHC患者總數×100%；特異性=真陰性例數/PHC患者總數×100%；準確性=(真陽性例數+真陰性例數)/PHC患者總數×100%。

2 結果

2.1三組人員血清TM各指標水平的比較:PHC組AFP、SF及Hsp90α均顯著高于肝炎組和健康體檢組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

組別例數AFP(μg/L)SF(ng/ml)Hsp90α(ng/ml)PHC組70212.34±63.54254.33±127.67147.78±32.74肝炎組7013.19±7.87①162.37±84.51①75.87±17.31①健康體檢組707.54±3.65①125.43±56.72①71.25±15.64①t1值36.8047.10724.451t2值38.01710.91724.956

注：t1為PHC組與肝炎組相比；t2為PHC組與健康體檢組相比；與PHC組比較，①P<0.05

2.2PHC組內腫瘤指標單獨與聯合檢測的結果比較：PHC組血清AFP敏感性為72.86%，SF的敏感性為70.00%，Hsp90α的敏感性為30.00%。多項指標聯合檢測HPC敏感性為95.71%，與一項或兩項聯合檢測相比，敏感性、準確性均有不同程度的升高，但與一項檢測相比，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與部分單項檢測相比，特異性略有下降。見表2。

表2 PHC組內腫瘤指標單獨和聯合檢測的結果比較(%)

項目準確性敏感性特異性AFP78.57272.86182.86SF71.4370.0080.00Hsp90α60.0030.0080.00AFP+ SF88.5787.1478.57AFP+ Hsp90α85.7184.2977.13AFP+SF+ Hsp90α97.1495.7178.57

注：與AFP單項檢測比較，χ2=13.806、11.351，P<0.05

3 討論

AFP在胎兒肝臟合成，在正常組織中幾乎不產生或產量甚微，當肝細胞發(fā)生癌變時，由于低甲基化作用導致AFP的基因表達開放，于血清中可檢測到AFP濃度顯著升高，因此AFP成為PHC早期診斷的血清標記物。許多國內外專家和機構均指定 AFP作為唯一的原發(fā)性肝癌腫瘤標志物，并且AFP 檢測對手術治療及放療、化療預后具有重要的臨床價值[5]。

有研究報道，SF是鐵貯存于人體的主要形式之一，參與對造血和免疫系統(tǒng)的調控，合成增加見于炎性反應、肝臟病變及惡性腫瘤，尤其是原發(fā)性肝癌，腫瘤壞死因子 α誘導肝癌細胞產生鐵蛋白，血清中鐵蛋白升高[6]。PHC發(fā)生時，腫瘤的臨床TNM分期、淋巴結轉移及遠處臟器轉移與SF水平呈正相關(P<0.05)，在進展為 Ⅲ 期和Ⅳ 期患者中SF水平有進一步上升的趨勢，可作為肝癌的診斷、治療及療效監(jiān)測的輔助手段[7]。Hsp90α作為熱休克家族的主要成員，在多種惡性腫瘤中異常表達，加速細胞的惡性轉變及影響腫瘤血管形成，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲浸潤和轉移關系密切，對腫瘤的病情監(jiān)測和治療效果評價有一定的提示作用。Hsp90α可能在肝細胞惡變的初始期或癌前期即參與細胞的轉化[8]。

本文研究顯示， PHC組的AFP、SF及Hsp90α水平顯著高于肝硬化組和健康體檢組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，表明肝癌發(fā)生時，三者活性大量表達，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲與轉移關系密切。研究顯示，PHC患者血清AFP水平與FER呈正相關(P<0.05)[9]。

崔燦等人研究發(fā)現，PHC組中的AFP及Ferritin水平遠高于良性肝病組和健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。原發(fā)性肝癌組的AFP及Ferritin水平陽性率高于良性肝病組和健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。腫瘤標志物聯合檢測敏感度84.8%顯著優(yōu)于單一指標檢測敏感度，特異性和準確性分別為88.9%和85.2%，較部分腫瘤標志物特異性有所降低[10]。本研究中，三者聯合檢測的準確性與敏感性分別為88.57%和95.17%，遠高于二者聯合檢測或單一指標檢測，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，特異性為78.57%，略低于二者聯合檢測或單一指標檢測，提示腫瘤標志物的聯合檢測對于提高肝癌診斷的敏感性和準確性具有良好的互補作用。AFP單項檢測對PHC診斷存在不同程度的局限性，會出現一定程度的漏診和誤診，聯合檢測AFP和SF及Hsp90α可以有效提高AFP陰性或低濃度病例的檢出率，提高了PHC的檢出率和診斷PHC的敏感性，可以顯著提高原發(fā)性肝癌的確診率，具有更好的臨床應用價值。