譚傳波，盧芳國(guó)，李 玲，何谷良，吳 濤，魏 科，賴瓊瑋，黃 閨，周魁香

(1.湖南大三湘山茶油股份有限公司，湖南 衡陽(yáng) 421141； 2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)沙 410208)

山茶油富含不飽和脂肪酸，其油酸含量高達(dá)75%～80%，因其理化性質(zhì)與“植物油皇后”橄欖油相似而享有“東方橄欖油”的美譽(yù)[1-3]。山茶油中含有油酸、亞油酸、亞麻酸、生育酚、植物甾醇和角鯊烯等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，具有預(yù)防心血管硬化、降血壓、降血脂、抗炎、防癌、抗癌等功效[4-6]。

研究表明山茶油具有抑菌效果[7]，但還沒(méi)有山茶油對(duì)胃腸炎、胃潰瘍預(yù)防效果的相關(guān)研究。胃腸炎、胃潰瘍是臨床上常見(jiàn)的消化內(nèi)科病癥，主要表現(xiàn)為腹痛、食欲差和反酸等[8]。隨著人們生活方式的改變，飲食習(xí)慣的變化，其發(fā)病率不斷增加，對(duì)患者的生活質(zhì)量造成影響[9]，有效預(yù)防其發(fā)生已備受關(guān)注。

本研究以不同工藝山茶油為研究對(duì)象，比較其對(duì)胃腸炎、胃潰瘍的預(yù)防效果，以期對(duì)山茶油的應(yīng)用提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

鮮榨山茶油，由新鮮油茶果經(jīng)機(jī)械脫除果殼得到的新鮮油茶籽經(jīng)壓榨得到漿液，再?gòu)臐{液分離出油脂，脫水過(guò)濾后得到；原香山茶油，由干燥的油茶籽經(jīng)冷榨、低溫物理吸附去雜得到；精煉山茶油，市購(gòu)；9°糯米白醋，市購(gòu)；SD大鼠，66只，雄性，體重(220±2)g，購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，許可證號(hào)為SCXK(湘)2014-0002，批號(hào)為43004700041237。

YP20002電子天平，400倍奧林巴斯光學(xué)顯微鏡。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 動(dòng)物分組及預(yù)防給油

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)1 d后稱重，分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、原香山茶油組、精煉山茶油組、鮮榨山茶油組。除正常對(duì)照組、模型對(duì)照組大鼠正常飲食外，其余組大鼠除正常飲食外灌胃給油，灌胃劑量為0.005 mL/(g·d)，連續(xù)灌胃5 d。每次灌胃給油前禁食2 h、禁水1 h，灌胃后1 h恢復(fù)飲食飲水。期間觀察大鼠一般癥狀與體征，并稱重。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕?/p>

經(jīng)灌胃給油5 d后，除正常對(duì)照組外，其余組大鼠用9°糯米白醋灌胃，灌胃劑量為0.015 mL/(g·d)，連續(xù)灌胃5 d。每次灌胃前禁食4 h、禁水1 h，灌胃后1 h恢復(fù)飲食飲水。灌胃糯米白醋過(guò)程中觀察大鼠一般癥狀與體征，連續(xù)灌胃5 d后，取胃、十二指腸組織，觀察其病理變化，胃、十二指腸組織壞死、充血，有大量炎癥細(xì)胞，表明胃腸炎、胃潰瘍模型形成。比較各組胃、十二指腸組織的病理變化，研究山茶油對(duì)大鼠的保護(hù)作用。

1.2.3 指標(biāo)檢測(cè)

大鼠最后一次給藥后禁食12 h，稱重后處死，檢測(cè)以下指標(biāo)。

(1)胃及胃液指標(biāo)：胃全重，胃凈重，胃內(nèi)容物質(zhì)量，胃液白細(xì)胞數(shù)(以顯微鏡下一個(gè)視野里面白細(xì)胞個(gè)數(shù)表示)。胃內(nèi)容物質(zhì)量=胃全重-胃凈重。

(2)胃、十二指腸前段病理變化：取胃、十二指腸組織，生理鹽水處理后，用4%多聚甲醛固定胃、十二指腸，石蠟包埋，切片，HE染色后，在400倍光學(xué)顯微鏡下觀察各組大鼠胃、十二指腸前段的病理變化。

(3)腸道菌群：無(wú)菌收集腸道糞便，用瓊脂傾注法檢測(cè)腸道菌群中的白色念珠菌、腸球菌、細(xì)菌總數(shù)。結(jié)果均以菌落對(duì)數(shù)值lgA表示。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS19.0軟件進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的差異顯著性分析采用成對(duì)樣本進(jìn)行t/F檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 大鼠一般癥狀與體征

正常對(duì)照組大鼠精神良好,動(dòng)作敏捷有力，攝食正常，被毛密澤，緊貼身體，體肌健壯。模型對(duì)照組大鼠出現(xiàn)精神萎靡，被毛張開(kāi)，食欲減退，體肌瘦削，體重減輕，便溏脫肛，動(dòng)作遲緩無(wú)力，成群倦臥，毛疏散豎立等表現(xiàn)，部分模型大鼠腹部腫脹、死亡。預(yù)防給油組大鼠一般癥狀與體征得到明顯改善，其中鮮榨山茶油組大鼠便溏脫肛、毛疏散豎立表現(xiàn)的改善效果優(yōu)于原香山茶油組和精煉山茶油組。

2.2 大鼠體重變化(見(jiàn)表1)

表1 各組大鼠體重變化 g

由表1可知：預(yù)防給油前各組大鼠體重?zé)o顯著差異(P>0.05)；預(yù)防給油5 d后，各組間大鼠體重?zé)o顯著差異(P>0.05)；用糯米白醋建模后各組大鼠體重發(fā)生變化，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠體重顯著下降(P<0.05)，與模型對(duì)照組比較，各預(yù)防給油組大鼠體重顯著增加(P<0.05)，其中鮮榨山茶油組大鼠體重顯著高于原香山茶油組，與正常對(duì)照組大鼠體重?zé)o顯著差異。

2.3 大鼠胃及胃液指標(biāo)

按1.2.2灌胃糯米白醋5 d后大鼠的胃及胃液指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。

由表2可知：灌胃糯米白醋5 d后，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠胃全重、胃凈重、胃內(nèi)容物質(zhì)量無(wú)顯著差異(P>0.05)，而胃液白細(xì)胞數(shù)顯著增加(P<0.05)；與模型對(duì)照組比較，鮮榨山茶油組大鼠胃液白細(xì)胞數(shù)顯著減少(P<0.05)，且鮮榨山茶油組與正常對(duì)照組大鼠的胃液白細(xì)胞數(shù)無(wú)顯著差異。

表2 各組大鼠胃及胃液指標(biāo)

2.4 大鼠胃、十二指腸病理變化

2.4.1 胃病理變化

按1.2.2灌胃糯米白醋5 d后大鼠的胃病理變化如圖1所示。

圖1 灌胃糯米白醋后大鼠的胃病理變化(400×)

由圖1可知：光學(xué)顯微鏡下觀察，正常對(duì)照組大鼠胃黏膜上皮組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，無(wú)壞死及脫落，胃腺體排列規(guī)律，結(jié)構(gòu)正常；模型對(duì)照組大鼠胃黏膜層及黏膜下層組織壞死，腺體消失，黏膜下層可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞、壞死以及充血，可見(jiàn)明顯的肉芽組織和瘢痕組織；精煉山茶油組大鼠胃黏膜層和部分腺體壞死，黏膜下層可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞及充血水腫；原香山茶油組大鼠胃黏膜層和部分腺體壞死，黏膜層嚴(yán)重充血水腫，黏膜下層可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞；鮮榨山茶油組大鼠胃黏膜上皮組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，無(wú)壞死及脫落，胃腺體排列規(guī)律，結(jié)構(gòu)正常?？梢?jiàn)，鮮榨山茶油組對(duì)大鼠胃病理恢復(fù)效果明顯好于其他山茶油實(shí)驗(yàn)組。

2.4.2 十二指腸病理變化

按1.2.2灌胃糯米白醋5 d后大鼠的十二指腸前段病理變化如圖2所示。

圖2 灌胃糯米白醋后大鼠的十二指腸前段病理變化(400×)

由圖2可知：光學(xué)顯微鏡下觀察，正常對(duì)照組大鼠十二指腸黏膜層結(jié)構(gòu)正常，絨毛完整，黏膜下層及肌層排列規(guī)律；模型對(duì)照組大鼠十二指腸黏膜層充血嚴(yán)重，絨毛壞死脫落，黏膜下層有大量炎癥細(xì)胞，部分腺體壞死；精煉山茶油組大鼠十二指腸黏膜層充血，黏膜下層可見(jiàn)部分炎癥細(xì)胞；原香山茶油組大鼠十二指腸黏膜層壞死，絨毛壞死脫落，黏膜下層有大量炎癥細(xì)胞；鮮榨山茶油組大鼠十二指腸黏膜結(jié)構(gòu)完整，絨毛完整，腺體無(wú)壞死，排列規(guī)律?？梢?jiàn)，鮮榨山茶油對(duì)大鼠十二指腸病理恢復(fù)效果明顯好于其他山茶油實(shí)驗(yàn)組。

2.5 腸道菌群

按1.2.2灌胃后，各組大鼠腸道菌群的變化見(jiàn)表3。

表3 各組大鼠腸道菌群的變化

由表3可知：與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠腸道糞便中腸球菌數(shù)量、細(xì)菌總數(shù)和白色念珠菌數(shù)量顯著增加(P<0.05)；與模型對(duì)照組比較，鮮榨山茶油組大鼠腸道糞便中腸球菌數(shù)量、細(xì)菌總數(shù)和白色念珠菌數(shù)量顯著減少(P<0.05)；與精煉山茶油組比較，原香山茶油組、鮮榨山茶油組大鼠腸道糞便中腸球菌數(shù)量、細(xì)菌總數(shù)顯著減少(P<0.05)；原香山茶油組與鮮榨山茶油組大鼠腸道糞便中腸球菌數(shù)量和白色念珠菌數(shù)量無(wú)顯著差異，而在細(xì)菌總數(shù)上有顯著差異。綜上，精煉山茶油對(duì)大鼠腸道腸球菌和細(xì)菌總數(shù)作用不明顯，原香山茶油和鮮榨山茶油總體上均能降低大鼠腸道腸球菌數(shù)量、細(xì)菌總數(shù)和白色念珠菌數(shù)量。

3 結(jié) 論

鮮榨山茶油、原香山茶油、精煉山茶油對(duì)胃腸炎、胃潰瘍均有一定的預(yù)防作用。整體效應(yīng)是鮮榨山茶油、原香山茶油優(yōu)于精煉山茶油；在大鼠胃液白細(xì)胞數(shù)、胃和十二指腸病理變化的調(diào)節(jié)作用中，鮮榨山茶油優(yōu)于原香山茶油。