喬普丹 趙宇琦 唐 波 董金玉 楊少康 戴羅桓 劉達(dá)琳 米玉龍 李江陽 邢 越 鄧光祁 袁立明△
(1 湖南師范大學(xué)樹達(dá)學(xué)院,2 湖南師范大學(xué),長沙 410013)
外科學(xué)中,肝手術(shù)的發(fā)展與肝臨床解剖學(xué)研究的進(jìn)步息息相關(guān)。肝不同的管道系統(tǒng)分布錯綜復(fù)雜,是肝手術(shù)和介入治療的難點[1]。傳統(tǒng)的新鮮肝標(biāo)本因其形態(tài)易變,難于精確成形[2],消耗量大,且受醫(yī)學(xué)倫理學(xué)的限制,不可以自由交易,來源困難。而鑄型標(biāo)本可以較為直觀展現(xiàn)肝內(nèi)靜脈走行,立體感強,增加實體標(biāo)本質(zhì)感,來源較廣泛,為臨床工作者建立走行、分布的立體概念。為此,筆者采用自凝牙托粉填充劑對防腐固定后的肝鑄型方法進(jìn)行探索。
從學(xué)院尸庫中選取經(jīng)局部解剖過后、無破損的且固定5年以上的肝1例,保留上、下腔靜脈各1 cm。將標(biāo)本放置于清水中清洗,為清除肝血管內(nèi)的血凝塊進(jìn)行初步處理。
解剖器械1套、一次性注射器(50 mL)2支,橡膠管10 cm,燒杯2只、腐蝕槽1個,鄰苯二甲酸二丁酯、自凝牙托粉、α-甲基丙烯酸甲酯、油畫顏料(藍(lán)色)、氫氧化鉀和過氧化氫、鹽酸適量。
血凝塊是否完全沖洗干凈是防腐固定后標(biāo)本鑄型成功的關(guān)鍵步驟之一。將選取好的肝臟標(biāo)本放入30%的雙氧水中浸泡2~3 d 后,采用注射器分別經(jīng)從門靜脈、肝靜脈向肝內(nèi)注射30%的過氧化氫分解血管內(nèi)血凝塊,充分反應(yīng) 20 min 后,加壓注入清水沖出血凝塊。重復(fù)上述步驟,2~3次即可。待血凝塊排盡后用止血鉗和縫線將門靜脈及上、下腔靜脈開口結(jié)扎,目的在與防治灌注過程中出現(xiàn)鑄型劑溢漏[3]。
用天平稱量自凝牙托粉40 g,量筒量取α-甲基丙烯酸甲酯60 mL,鄰苯二甲酸二丁酯24 mL,放入燒杯,加入適量油畫顏料,混合,攪拌均勻,即配即用。
用50 mL的注射器吸取適量的灌注劑,在門靜脈、肝靜脈處加壓注入。反復(fù)注入2次,直到阻力明顯增大(或)灌注液大量流出時,迅速夾閉灌注管道,以防灌注液倒流。由于靜脈管壁較薄,為防止管壁破裂或改變血管原有形態(tài),灌注時應(yīng)控制好灌注壓以及灌注量。
在常溫下放置3~4 d待灌注液完全凝固,將其放入密閉容器中,用堿腐蝕法(將氫氧化鉀粉末、蒸餾水、無水乙醇按照5:10:1的比例配制成堿腐蝕液)進(jìn)行腐蝕,2~3 d后取出.用細(xì)水將鑄型管道旁的組織進(jìn)行沖洗,注意水流速度,以免損壞周圍鑄型管道。
防腐固定后的肝標(biāo)本采取自凝牙托粉鑄型劑制作的鑄型標(biāo)本,從整體觀察,外形完整、美觀,輪廓飽滿,較硬但韌性較好,對整體的支撐力較好,可展現(xiàn)出立體構(gòu)型,主支、分支容易辨認(rèn),較好展現(xiàn)血管走行,幾乎可以和新鮮標(biāo)本灌注的效果相媲美(圖1)。
人體鑄型標(biāo)本在我國發(fā)展迅速,為我國人體解剖學(xué)的教學(xué)、科研、臨床、科普工作提供了重要幫助[4]。李長征等[5]用已防腐固定的肢體,通過自凝牙托粉改良配方成功制作動脈鑄型標(biāo)本。但固定后靜脈鑄型標(biāo)本尚無人進(jìn)行探究。本方法通過進(jìn)一步改進(jìn)標(biāo)本處理方法及灌注劑配方,利用固定后的肝標(biāo)本,成功制作出肝靜脈鑄型標(biāo)本。
防腐固定后的肝標(biāo)本靜脈內(nèi)血凝塊多,在選擇標(biāo)本時,應(yīng)盡可能選擇顏色較淺,質(zhì)地彈性較好的標(biāo)本,此種標(biāo)本靜脈內(nèi)血凝塊相對較少,標(biāo)本更容易制作成功。本方法采用30%雙氧水浸泡標(biāo)本后,再加壓沖洗較為干凈,且雙氧水與甲醛反應(yīng)生成二氧化碳和水,減少環(huán)境污染。
自凝牙托粉∶鄰苯二甲酸二丁酯∶聚甲基丙烯酸甲酯按照2∶3∶1.2比例配制,與常規(guī)配法相比,降低了自凝牙托粉比例。經(jīng)此法制作的鑄型標(biāo)本,管道鑄型飽滿,韌性好,不易折斷,主、分支顯示清楚,相對新鮮標(biāo)本管道鑄型顯示立體,提高了標(biāo)本的實用性。配制自凝牙托粉鑄型劑時,灌注劑容易凝固,可將灌注劑置于65℃水浴中,防止過早凝固,但溫度也不宜太高,否則容易發(fā)生“爆聚”,導(dǎo)致配制失敗。經(jīng)此法灌注標(biāo)本,可一次成型,無需進(jìn)行補注,通常在灌注后幾小后即進(jìn)行堿腐蝕,且堿腐蝕速度較快,明顯縮短了標(biāo)本制作時間,同時避免了對工作環(huán)境的污染,減輕了對實驗人員的影響,提高了工作效率[6]。
圖1 防腐固定后的肝標(biāo)本(A)和肝靜脈、門靜脈灌注鑄型標(biāo)本(B)
傳統(tǒng)鑄型標(biāo)本常用新鮮標(biāo)本進(jìn)行制作,但新鮮標(biāo)本獲取困難,對于某些高校而言,采用防腐固定后的標(biāo)本制作鑄型標(biāo)本,擴(kuò)大了材料來源,在一定程度上解決了標(biāo)本內(nèi)管道結(jié)構(gòu)學(xué)習(xí)困難的問題。
肝內(nèi)部肝動脈、肝靜脈、門靜脈、肝膽管分布錯綜復(fù)雜,各管道解剖結(jié)構(gòu)以及毗鄰關(guān)系,既是人體解剖學(xué)教學(xué)的重點,同時也是手術(shù)中肝膽外科醫(yī)生重點關(guān)注的內(nèi)容。肝鑄型標(biāo)本是研究肝內(nèi)管道關(guān)系的重要方法,但新鮮標(biāo)本來源限制了其的應(yīng)用[7]。本方法制作的防腐固定后的肝鑄型標(biāo)本,可以清楚顯示各個管道的走行及毗鄰關(guān)系,為肝內(nèi)結(jié)構(gòu)研究解決樣本不足的問題,促進(jìn)肝內(nèi)管道結(jié)構(gòu)的研究。