謝美強 張 丹 顏 勁 巫源博（湛江中心人民醫(yī)院 湛江 524000）

卵巢癌是嚴重影響女性健康的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，研究表明發(fā)病率僅次于乳腺癌和宮頸癌[1]。子宮頸的解剖學位置在盆腔深部，早期不易發(fā)現(xiàn)，大多數確診時已經處于癌癥晚期，病死率較高。傳統(tǒng)的癌癥治療方案主要是殺傷腫瘤細胞，同時也會嚴重影響正常細胞的活性。紫杉醇類聯(lián)合鉑類藥物的化療方案開始應用于腫瘤治療，但是只能起到短期的治療效果，5年生存率未明顯提升[2，3]?；颊唛L期進行化療會產生化療耐藥性，嚴重影響治療效果和預后。化療耐藥機制十分復雜，受到多組基因在不同時間和空間的調控。本研究通過檢測腫瘤相關蛋白P53、凋亡抑制蛋白livin、谷胱甘肽S轉移酶-π以及II型DNA拓撲異構酶等化療耐藥相關蛋白在卵巢癌上皮組織中的表達情況，分析上述蛋白對卵巢癌的治療以及預后的影響。

1 對象和方法

1.1 研究對象：選取2012年1月—2014年1月在我院接受手術治療以及病理學檢查確診的80例卵巢癌患者，取腫瘤組織上皮制成標本，取材后經甲醛浸泡，石蠟包埋，切片備用。納入標準：經過病理學檢測，確診為卵巢癌；臨床資料以及術后隨訪信息完整；術前沒有接受放化療以及免疫療法。排除標準：出現(xiàn)其他腫瘤；依從性差。年齡25～75歲，平均年齡（56.21±6.54）歲。根據《2016年卵巢癌臨床實踐指南》[4]分為：I～II20 例，III～IV60 例。初次診斷癥狀為腹脹、食欲不振、陰道內出血。在我院進行腫瘤分期手術，術后進行鉑類藥物化療。術后隨訪5年，其中50例停止化療后半年復發(fā)或者隨訪期內一直未見復發(fā)作為化療敏感組，30例停止化療半年復發(fā)作為化療耐藥組。兩組一般資料進行統(tǒng)計學分析無顯著差異（P＞0.05）。本研究經過我院倫理委員會審批，簽署知情協(xié)議。

1.2 檢測方法：采用免疫組化的方法[5]分析化療耐藥相關蛋白P53、livin、GST-π 以及 Topo II表達情況。

1.3 統(tǒng)計學方法：采用SPSS17.0軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗；計數資料以頻率和百分率表示，采用χ2和Fisher確切概率法檢驗。利用Cox回歸模型進行多因素分析，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果

2.1 耐藥相關基因的表達：化療敏感組P53、linvin、GST-π的陽性表達率和化療耐藥組相比顯著降低，P＜0.01，但是TopoII的陽性表達情況顯著高于化療耐藥組，P＜0.05。見表1。

表1 兩組表達率化療耐藥相關抗性蛋白的陽性統(tǒng)計比較[n（%）]

2.2 兩組5年生存率分析：采用Log-rank檢驗方法比較兩組5年生存率（56.3%）和化療耐藥組5年生存率（13.6%），具有顯著差異，P＜0.01。見圖 1。

2.3 生存時間的影響因素：將年齡、臨床分期、組織分化和化療程度敏感性作為自變量納入Cox回歸模型分析，將是否死亡作為因變量，分析本研究的耐藥因素對生存時間的影響，結果顯示臨床分期和化療敏感度是生存時間的影響因素（P＜0.05）。見表2。

表2 納入生存時間影響因素分析

3 討論

發(fā)生、發(fā)展和轉移是腫瘤發(fā)展的基本過程，該過程是腫瘤和正常組織相互作用的結果，并且受到許多因素的調控。當前，卵巢癌的主要治療方法是全面分期手術以及降低腫瘤細胞，然后輔助以標準化療，合理的手術加上合理的治療可以達到良好的短期治療效果[6]。鉑類藥物能夠在卵巢癌術后早期起到良好的抑制癌細胞增殖和遷移的作用，但是多數患者因為癌細胞的再次遷徙造成長期生存率較低[7]?；熌退幮詫﹂L期生存率起到了重要作用，所以長期以來關于耐藥靶點的篩選和機制研究成為關注的熱點，該類研究對化療效果的檢測以及靶向治療和制定個性化治療方案具有重要的參考，從而增加長期生存率。

化療藥物對腫瘤細胞的殺傷作用機制主要是誘導凋亡，而且這一過程是受到多個基因共同調控，這些基因的異常表達會使患者產生化療耐藥性[8]。P53基因是一種細胞凋亡相關基因，還參與癌癥的防控以及修復細胞基因缺陷，在多數的惡性腫瘤中P53會發(fā)生突變，進一步誘發(fā)癌癥。Livin屬于凋亡抑制蛋白家族，可以抑制細胞凋亡，參與調節(jié)細胞周期和細胞分裂[9]。本研究發(fā)現(xiàn)P53和livin陽性表達的患者化療效果要比陰性表達的顯著降低，5年生存率明顯降低，主要原因可能是卵巢癌患者中表達的P53，多為突變型，其表達產物會干擾細胞周期的調控，化療藥物失去誘導腫瘤細胞凋亡的能力。Livin基因在晚期臨床分期或者是終末期較為常見，研究表明該基因在卵巢癌細胞的增殖、分化以及遷移過程中起到了重要的調控作用。另外，GST-π和TopoII等長期刺激腫瘤細胞會使其產生耐藥性。前者是一種藥物代謝酶，可以參與細胞內有毒物質的降解。臨床治療中，設計的抗癌藥物無法直接和癌細胞結合，GST-π可以催化藥物和谷胱甘肽的結合殺滅癌細胞。TopoII存在于細胞核，功能是可以催化調整DNA結構，實現(xiàn)DNA不同拓撲異構體的轉變，調控基因的重組、轉錄以及DNA修復[10]，其活性的降低可以引起腫瘤細胞對TopoII抑制劑產生耐藥性。本研究發(fā)現(xiàn)GST-π陽性表達患者的療效較陰性顯著降低，5年生存率較低。其原因可能是癌細胞中的GST-π高表達，抗癌藥物無法和谷胱甘肽結合進入細胞，從而抑制了對腫瘤細胞的殺傷作用。總的來說，P53、livin、GST-π以及Topo II可以作為卵巢癌化療效果以及預后效果評估的因子。