王紫嫣 劉雪萍 楊志前 劉移民

（廣州市第十二人民醫(yī)院職業(yè)病科 廣東 廣州 510620）

百草枯，化學(xué)名為1-1’-二甲基-4-4’-聯(lián)吡啶陽(yáng)離子鹽，是一種接觸性除草劑，內(nèi)吸作用強(qiáng)，歷年來(lái)因?yàn)槠涑莸母咝约翱焖贉缁畹沫h(huán)保特性，而在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用[1]。但其對(duì)人畜毒性極強(qiáng)，可經(jīng)皮膚、消化道、呼吸道等途徑吸收中毒，主要靶器官為肺組織，可導(dǎo)致嚴(yán)重的肺損傷、肺纖維化，口服劑量大時(shí)可同時(shí)引起肝、腎、肺等多器官功能衰竭[2]。百草枯中毒的作用機(jī)制尚未完全明確，且無(wú)特效解毒劑，臨床救治難度大，病死率較高。目前較為明確的百草枯中毒致機(jī)體損傷可以分為兩個(gè)階段：氧自由基的產(chǎn)生和氧化應(yīng)激反應(yīng)[3]。而眾多炎癥因子又在百草枯中毒氧自由基的產(chǎn)生過(guò)程中起重要的調(diào)節(jié)作用[4]。本文主要探討口服不同劑量百草枯的中毒患者血中炎癥因子的變化趨勢(shì)及其與預(yù)后的關(guān)系，進(jìn)一步研究炎癥因子在百草枯中毒病情發(fā)展中的調(diào)節(jié)作用。

1.資料和方法

1.1 一般資料

選取2018 年1 月—2019 年12 月于我科住院的口服百草枯中毒的患者共30 例，按不同口服劑量分為病例組1（治愈組，口服20ml 以下）和病例組2（死亡組，口服20ml 以上）。其中病例組1 患者18 例，男性8 例，女性10 例，年齡分布為19 ～66 歲，平均年齡31 歲。病例組2 患者12 例，男性5 例，女性7 例，年齡分布為17 ～64 歲，平均年齡35 歲。兩組患者的年齡、性別沒(méi)有顯著差異，具有可比性（P＞0.05）。以上兩組患者均于口服百草枯后第3 天晨起抽取靜脈血5ml 進(jìn)行炎癥因子檢測(cè)。此次研究所涉及的患者均通過(guò)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑

采用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀ImmuLite1000(西門子)檢測(cè)患者血中白介素6（IL6）、白介素10（IL10）、白介素1β（IL1β）、白介素8（IL8）；r 放射免疫計(jì)數(shù)器CG-1500 檢測(cè)腫瘤壞死因子（TNFα）。

1.3 方法

使用放免法對(duì)腫瘤壞死因子（TNFα）進(jìn)行檢測(cè)，化學(xué)發(fā)光法對(duì)白介素6（IL-6）、白介素10（IL-10）、白介素1β（IL-1β）和白介素8（IL-8）進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，行t檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組患者血中炎癥因子TNFα、IL-6、IL-10、IL-1β、IL-8 水平比較

獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)結(jié)果顯示，患者血中炎癥因子TNFα、IL-10、IL-1β 的升高水平在兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05；IL-6、IL-8的升高在兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05，見表1。

表 兩組患者血中炎癥因子檢測(cè)結(jié)果比較（±s，pg/ml）

表 兩組患者血中炎癥因子檢測(cè)結(jié)果比較（±s，pg/ml）

組別 n TNFα IL-6 IL-10 IL-1β IL-8病例組1 18 10.63±4.72 4.63±2.51 5.44±2.90 6.83±4.77 104.23±86.05病例組2 12 9.06±2.62 18.99±7.66 7.45±3.75 9.97±5.24 499.70±241.21

3.討論

百草枯作為一種高效、環(huán)保的除草劑曾在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中被廣泛推廣應(yīng)用。但因其對(duì)人畜毒性強(qiáng)，且無(wú)特效解毒劑，隨著口服中毒的患者日益增多，現(xiàn)已被禁止使用。臨床發(fā)現(xiàn)百草枯中毒可致機(jī)體多個(gè)臟器損傷，主要靶器官為肺，早期可引起急性肺損傷，隨著病情發(fā)展繼而出現(xiàn)雙肺滲出、肺間質(zhì)纖維化，嚴(yán)重時(shí)因呼吸衰竭危及生命[5]。同時(shí)百草枯中毒早期也可引起急性肝臟、腎臟、胰腺損傷，出現(xiàn)肝功能異常、黃疸、血尿、蛋白尿、血肌酐及尿素氮升高、胰腺炎等臨床表現(xiàn)[6-7]。

目前對(duì)百草枯中毒的作用機(jī)理尚未完全明確，較為認(rèn)可的百草枯中毒致機(jī)體損傷的作用機(jī)制主要包括氧自由基的產(chǎn)生和氧化應(yīng)激反應(yīng)[8-9]，而眾多炎癥因子對(duì)活性氧的產(chǎn)生和氧化應(yīng)激反應(yīng)具有重要的調(diào)節(jié)作用[5]。TNFα 在體內(nèi)主要由巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、T 細(xì)胞等產(chǎn)生，是一種毒性細(xì)胞因子，可刺激纖維細(xì)胞增殖，參與肺纖維化的形成與間質(zhì)炎癥反應(yīng)[10-11]。多位學(xué)者研究均表明百草枯中毒后患者血清中TNFα 明顯升高。IL6 主要由淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞分泌產(chǎn)生，在體內(nèi)主要可誘導(dǎo)B細(xì)胞生長(zhǎng)、分化，產(chǎn)生免疫復(fù)合物損傷肺組織[12]。大鼠百草枯中毒模型研究表明百草枯在中毒后大鼠血清中含量逐漸升高，并在第3 天達(dá)到峰值[13]。IL10 是一種多細(xì)胞源、多功能的細(xì)胞因子，主要由淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T 輔助細(xì)胞產(chǎn)生，調(diào)節(jié)體內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)分化，是炎癥抑制因子，可減輕炎癥反應(yīng)，減少膠原蛋白的產(chǎn)生。通過(guò)抑制IL1、IL6、TNFα、IL8 等細(xì)胞因子的分泌而起到抗炎作用[14]。IL-1β 主要由單核巨噬細(xì)胞分泌生成，在中毒早期可介導(dǎo)肺組織的炎性損傷，后期誘導(dǎo)肺組織纖維化的生成。IL8由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌產(chǎn)生，是一種主要的促炎因子，研究表明百草枯可刺激單核細(xì)胞生成IL8，且可在炎癥部位存活數(shù)天至數(shù)周。

本研究結(jié)果表明，口服不同劑量百草枯中毒的兩個(gè)病例組患者，其血中促炎因子TNFα、IL6、IL-1β 及IL8 均有不同程度的升高，且IL6、IL8 的升高在兩組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而抑炎因子IL10 無(wú)明顯升高，提示百草枯進(jìn)入機(jī)體，可引起體內(nèi)細(xì)胞產(chǎn)生炎癥因子介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，并進(jìn)一步誘導(dǎo)肺組織纖維化的形成。隨著口服百草枯劑量的增大，單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞等機(jī)體細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子進(jìn)一步增多，炎癥反應(yīng)更加劇烈，由細(xì)胞因子介導(dǎo)的肺組織損傷及纖維化進(jìn)一步加重，在臨床上患者表現(xiàn)為呼吸困難、血氧飽和度下降、胸悶、氣促、胸痛等，病情加重，最終無(wú)法逆轉(zhuǎn)導(dǎo)致死亡，因此對(duì)百草枯中毒患者入院早期檢測(cè)其血中炎癥因子的升高水平，或許可作為判斷其預(yù)后的指標(biāo)，為后續(xù)治療提供參考與幫助。在本研究結(jié)果中，兩組患者血中抑炎因子IL10 均未觀察到明顯的升高趨勢(shì)，提示我們?cè)诎俨菘葜卸镜幕颊唧w內(nèi)促炎因子是否可反過(guò)來(lái)抑制抑炎因子的生成值得進(jìn)一步的思考與探索。同時(shí)因IL10 在體內(nèi)可抑制IL6、IL8等炎癥因子的分泌，減輕炎癥反應(yīng)，減少膠原蛋白的合成，對(duì)抗炎癥因子對(duì)肺組織的損傷，因此在理論上，今后的臨床治療中是否可補(bǔ)充IL10 或開發(fā)藥物促進(jìn)體內(nèi)IL10 的生成，從而減輕肺組織的炎癥反應(yīng)與纖維化程度，為百草枯患者的治療方法提供新的思路。