馬家玲 高艷平（通訊作者）

（蘇州大學附屬張家港醫(yī)院 江蘇 張家港 215600）

右美托咪定(Dexmedetomidine，DEX)是一種臨床中常見的輔助鎮(zhèn)靜藥物。近年來多數(shù)動物實驗和臨床研究均表明DEX 對腦缺血再灌注損傷具有一定保護作用[1]。但DEX 對腦缺血再灌注損傷晚期星形膠質(zhì)瘢痕的形成的影響，相關(guān)報道較少，因此本研究通過給予DEX 來探究其對膠質(zhì)瘢痕的抑制作用。

1.實驗方法

1.1 動物模型及分組

90 只健康雄性SD 大鼠（300±20g），購置于xxx 實驗動物有限公司，體重在250 ～300g，日齡49 ～63d；隨機分為空白組，模型組和實驗組。其中空白組僅接受右側(cè)頸總、內(nèi)、外動脈游離術(shù)，而另外兩組則采用改良線栓法[2]建立短暫性大腦中動脈阻塞模型。實驗組于栓塞前30min 予以腹腔注射DEX 20ug/kg，而空白組及模型組則予以同等劑量的生理鹽水。

1.2 行為學評分

參照NDS 評分[3]于術(shù)后1 天進行。

1.3 腦梗死體積

術(shù)后1 天將大鼠斷頭取腦，行TTC 染色，拍照，ImageJ 進行測量，并計算腦梗死體積[4]。

1.4 Westernblot 檢測

于術(shù)后1d、7d、14d 取梗死周圍腦皮質(zhì)檢測。經(jīng)過裂解、離心取得上清蛋白，BCA 法測定并調(diào)節(jié)蛋白濃度。加熱變性后的蛋白經(jīng)電泳，轉(zhuǎn)膜封閉后分別加入GFAP(1：500)、neurocan(1：500)、β-actin(1：5000)等一抗，于4℃冰箱孵育過夜，經(jīng)TBST 洗膜后，加入HRP 標記的二抗（1：5000）室溫孵育1h，再次洗膜。經(jīng)ECL 化學發(fā)光成像系統(tǒng)中攝像并分析。

1.5 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)采用SPSS21.0統(tǒng)計學軟件分析處理，計數(shù)資料采用率（%）表示，行χ2檢驗，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，行t檢驗，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

2.1 行為學評分及腦梗死體積

術(shù)后1d，與空白組行為學評分（0.13±0.13）分比較，模型組行為學評分（1.88±0.13）分更高（P＜0.05）、實驗組行為學評分（2.5±0.19）分更高（P＜0.05）；且與空白組腦梗死體積（0±0）%比較，模型組腦梗死體積（27.42±0.65）%、實驗組腦梗死體積（23.8±1.45）%差異顯著（P＜0.05）。同時，實驗組行為學評分（2.5±0.19）分更高于模型組（1.88±0.13）分、腦梗死體積（23.8±1.45）%顯著小于模型組（27.42±0.65）%（P＜0.05），見表1。

表1 三組行為學評分及腦梗死體積的比較（±s）

表1 三組行為學評分及腦梗死體積的比較（±s）

注：與空白組比較，模型組行為學評分t=42.569、腦梗死體積t=188.655，實驗組行為學評分t=46.039、腦梗死體積t=73.405，*P ＜0.05；與模型組比較，行為學評分t=12.044，腦梗死體積t=10.188，#P ＜0.05。

組別 n 行為學評分(分) 腦梗死體積(%)空白組 30 0.13±0.13 0±0模型組 30 1.88±0.13* 27.42±0.65*實驗組 30 2.5±0.19*# 23.8±1.45*#P＜0.05 ＜0.05

2.2 GFAP 及neurocan 的表達

與空白組術(shù)后1d GFAP（0.20±0.02）、Neurocan（0.20±0.05）相較，模型組術(shù)后1d GFAP（0.24±0.03）、Neurocan（0.29±0.08）及實驗組術(shù)后1d GFAP（0.21±0.07）、Neurocan（0.23±0.07）皆見有增高趨勢，但增高差異不顯著（P＞0.05）；與空白組術(shù)后7d 、14d 相較，模型組術(shù)后7d GFAP（0.57±0.09）、Neurocan（0.63±0.07）及實驗組術(shù)后7d GFAP（0.50±0.09）、Neurocan（0.51±0.12）表達，術(shù)后14d模型組GFAP（0.59±0.09）、Neurocan（0.55±0.1） 及 實 驗 組GFAP（0.51±0.07）、Neurocan（0.44±0.1）表達更明顯（P＜0.05）；但本組之間比較，模型組、實驗組7d 與14d 之間無顯著差異（P＞0.05）；同時相較于模型組7d、14d 的GFAP、Neurocan，實驗組7d、14d的GFAP、Neurocan 明顯下降（P＜0.05），見表2。

表2 三組GFAP、neurocan 的灰度值比較（±s）

表2 三組GFAP、neurocan 的灰度值比較（±s）

注：與空白組比較，模型組7d GFAP t=22.357、14d GFAP t=16.941,7d Neurocan t=18.070、14d Neurocan t=12.800，實驗組7d GFAP t=10.983、14d GFAP t=13.101,7d Neurocan t=9.014、14d Neurocan t=7.694，*P ＜0.05；與模型組比較，實驗組7d GFAP t=2.460、14d GFAP t=3.138,7d Neurocan t=3.863、14d Neurocan t=3.479，#P ＜0.05。

組別 GFAP Neurocan 1d 7d 14d 1d 7d 14d空白組 0.20±0.02 0.22±0.07 0.20±0.05 0.20±0.05 0.23±0.07 0.23±0.05模型組 0.24±0.03 0.57±0.09* 0.59±0.09* 0.29±0.08 0.63±0.07* 0.55±0.1*實驗組 0.21±0.07 0.50±0.09*# 0.51±0.07*# 0.23±0.07 0.51±0.12*# 0.44±0.1*#P ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05

3.討論

本研究通過比較大鼠腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)行為學評分及腦梗死體積發(fā)現(xiàn)，在腦損傷早期，DEX 具有一定的腦保護作用，這與之前的報道是一致的。目前認為，早期膠質(zhì)瘢痕可防止損傷的進一步擴大，對腦功能的恢復具有積極的作用，而隨著膠質(zhì)瘢痕的逐漸成熟，在損傷后期其反而會抑制軸突的生長從而阻礙神經(jīng)功能的恢復。GFAP 作為星形膠質(zhì)細胞的標志性蛋白，其表達上調(diào)，是星形膠質(zhì)細胞活化和膠質(zhì)瘢痕形成的重要標志。而neurocan 主要由成熟膠質(zhì)瘢痕產(chǎn)生，會抑制軸突的生長。這兩種蛋白在腦損傷后表達均有明顯的升高，而給予DE X 后它們的表達會有所下降，說明D EX 在一定程度上抑制了星形膠質(zhì)細胞的過度活化，且減少了有害蛋白的表達。綜上所述，DEX 對腦缺血再灌注損傷早期具有腦保護作用，并可能在一定程度上會減少晚期膠質(zhì)瘢痕的產(chǎn)生。