鐘良才 胡彥君 幸春容（通訊作者）

( 重慶三峽中心醫(yī)院藥學(xué)部 重慶 404000）

中藥是我國中醫(yī)學(xué)中的重要組成部分，在我國具有幾千年的應(yīng)用歷史。中藥具有非常多的種類，藥材品質(zhì)與藥物療效之間有著密切聯(lián)系。為保證中藥治療的安全性以及有效性，準(zhǔn)確的藥材鑒別非常關(guān)鍵。中藥樣品種類繁雜，其中包含碎塊、飲片以及粉末等多種形式，因此在進行中藥鑒別時相對較為困難。目前臨床常用的重要鑒別方法包括顯微鑒定、性狀鑒定以及來源鑒定，這些鑒定方法很大程度的保證了中藥治療的安全性以及有效性。近年來，隨著醫(yī)療科技的不斷進步，現(xiàn)代生物技術(shù)得到飛快發(fā)展，越來越多的學(xué)者開始關(guān)注現(xiàn)代生物技術(shù)在中藥鑒別中的應(yīng)用情況。本次以甘草為例，采用不同現(xiàn)代生物技術(shù)進行中藥鑒定，分析其在中藥質(zhì)量鑒定中的應(yīng)用。

1.資料與方法

1.1 一般資料

取優(yōu)質(zhì)甘草樣本20 份，共20g，劣質(zhì)甘草樣本4 份，共4g，然后將其分裝在相同的容器中，每份1g，在容器底部標(biāo)記甘草質(zhì)量，分別采用電泳、生物免疫技術(shù)、DNA 分子遺傳標(biāo)記技術(shù)等現(xiàn)代生物技術(shù)對樣本進行檢測。

1.2 方法

分別采用電泳、生物免疫技術(shù)以及DNA 分子遺傳標(biāo)記技術(shù)對甘草樣本進行優(yōu)劣質(zhì)量鑒別，對樣本進行分裝，并在分裝樣本中對優(yōu)劣質(zhì)樣本進行標(biāo)記，然后對三種不同鑒別方法的鑒別結(jié)果進行對比分析。

將每個容器中的甘草均等分為三份，然后分別采用電泳、生物免疫技術(shù)以及DNA 分子遺傳標(biāo)記技術(shù)對甘草進行檢驗，根據(jù)檢驗結(jié)果分析優(yōu)劣品質(zhì)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析處理，計數(shù)資料采用率（%）表示，行χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

電泳、生物免疫技術(shù)以及DNA 分子遺傳標(biāo)記技術(shù)在甘草優(yōu)劣質(zhì)檢出率分別為87.5%、79.2%和83.3%，三種方法優(yōu)質(zhì)檢出率比較，無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），具體見表。

表 不同生物技術(shù)在甘草優(yōu)良鑒別中的應(yīng)用對比[n(%)]

3.討論

中醫(yī)是我國特有的文化瑰寶，中藥是中醫(yī)治療的重要組成部分，中藥的質(zhì)量與治療效果之間掛鉤，因此有限的質(zhì)量鑒定技術(shù)非常關(guān)鍵。隨著醫(yī)學(xué)臨床的不斷發(fā)展，現(xiàn)代生物技術(shù)逐漸應(yīng)用于中藥鑒定中來。目前在臨床中應(yīng)用的生物技術(shù)也比較多樣，其在中藥鑒定中所發(fā)揮的作用也存在一定差異。

聚丙烯酰胺凝膠電泳主要應(yīng)用于中藥材料的成分鑒定，在中藥中含有多種成分，如蛋白質(zhì)、有機酸、多肽以及氨基酸等，在不同的電場作用下，經(jīng)過一段時間，各組的泳動方向也會出現(xiàn)差異，從而形成寬窄、數(shù)目、位置以及染色程度不同的電泳帶，可以進行多種信息的傳達。曾有學(xué)者在研究中指出，采用聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)可以對五中外形很相似的藥材進行有效區(qū)別、鑒定[1]。但是蛋白質(zhì)電泳圖譜類型主要是依靠肉眼進行直觀比較，因此存在較高的主觀性，導(dǎo)致鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性受到影響。高效毛細管電泳屬于近幾年發(fā)展起來的分離技術(shù)，在多種生物活性物質(zhì)分離中顯現(xiàn)出明顯的鑒別優(yōu)勢，如核酸、蛋白質(zhì)以及多肽等，高效毛細管電泳具有分辨率強、靈敏度高等特點，目前臨床多用于含生物堿、黃酮以及苷類等化合物的鑒定。曾有學(xué)者在研究中指出，采用高效毛細管電泳可以有效將別巴山榧子，香榧子、云南榧子、九龍山榧子以及日本榧子等。今年來毛細管電泳常與高效液相色譜進行結(jié)合使用，從而有效提高鑒定的準(zhǔn)確性，使該鑒定方式的使用范圍擴大[2]。

生物免疫技術(shù)是目前臨床應(yīng)用較多的一種醫(yī)學(xué)技術(shù)，主要是依靠抗原、抗體結(jié)合所產(chǎn)生的抗原抗體復(fù)合物，從而對藥材中的特異性蛋白質(zhì)進行檢測。在采用生物免疫技術(shù)進行檢測時，礦院為不同動植物藥材中的特異性蛋白質(zhì)，然后制成相應(yīng)的抗體試劑，從而對檢測樣本中的特異性蛋白質(zhì)進行檢測，從而對藥材的真?zhèn)芜M行鑒定。在中藥中大多含有抗原大分子，比如蛋白質(zhì)等，然后利用這些蛋白質(zhì)制成特異性抗原，然后對中藥進行定性、定量鑒定，該技術(shù)在中藥復(fù)發(fā)制劑中同樣發(fā)揮著非常重要的作用。曾有學(xué)者在研究中指出，可以根據(jù)生物免疫技術(shù)對梅花鹿血清進行鑒定，結(jié)果顯示采用生物免疫技術(shù)可以快速鑒定梅花鹿血清以及偽品動物血清[3]。

DNA 分子遺傳標(biāo)記技術(shù)，現(xiàn)代分子生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，生物資源呈現(xiàn)多樣化主要是受基因多肽影響，其中不包含礦物藥，因此隨著醫(yī)學(xué)臨床技術(shù)的不斷發(fā)展，DNA 分子遺傳標(biāo)記技術(shù)逐漸得到應(yīng)用。不同的動植物物種其DNA 分子也會存在差異，即便是很小的差異，在對藥品進行鑒定時，可以通過DNA 差異進行有效區(qū)分，而該鑒定技術(shù)更為準(zhǔn)確可靠。曾有學(xué)者在研究中指出，采用限制性片斷長度多態(tài)性分析技術(shù)可以有效鑒別人參農(nóng)家類型[4]。而且PCR 技術(shù)可以對微量或是高度講解的樣品進行對比分析，在干燥藥材鑒別中特別適用。

綜上所述，目前臨床常用的電泳、生物免疫技術(shù)以及DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù)等現(xiàn)代生物技術(shù)在中藥鑒別中均具有較高的應(yīng)用價值。