余小東 唐紅英 沈堅(jiān)

（1，浙江省新昌縣城南鄉(xiāng)人民政府 312500；2，浙江省新昌縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 312500；3，浙江省臺(tái)州市路橋區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 318050）

球蟲(chóng)病和巴氏桿菌作為兔消化道和呼吸道兩大常在的病原，當(dāng)天氣變化和飼料轉(zhuǎn)換以及其他應(yīng)激情況存在常會(huì)引起內(nèi)源性感染，從而引起發(fā)病。由于球蟲(chóng)和巴氏桿菌存在于兔的不同生理系統(tǒng)，臨床上這兩種疾病一起混合感染并不多見(jiàn)，容易疏忽從而造成誤診，延誤病情造成不必要的損失[1-2]?，F(xiàn)將筆者最近碰到的一個(gè)病例與大家分享。

1 發(fā)病情況

該獺兔場(chǎng)規(guī)模中等，存欄約1200 多只；兔舍位于小山坳中，依山而建，坐北朝南；飼料為外加工商品飼料，偶爾補(bǔ)充新鮮黑麥草。2019 年2 月底3 月初開(kāi)始陸續(xù)發(fā)病，發(fā)病初期以腹圍增大、腹瀉癥狀為主，沒(méi)有特別在意呼吸道癥狀，以青年兔為主，每天死亡3～5 只，最多的時(shí)候每天死亡7～8 只。兔場(chǎng)根據(jù)以往的經(jīng)驗(yàn)，在飼料中添加磺胺氯丙嗪鈉（三字球蟲(chóng)粉），連用5d，有一定的效果，病情有所緩解，但沒(méi)有完全控制住，斷斷續(xù)續(xù)仍有兔子死亡。然后病情逐漸往仔兔發(fā)展，仔兔出現(xiàn)咳嗽、打噴嚏的聲音，能見(jiàn)到有的兔子鼻腔流黏液，個(gè)別出現(xiàn)了歪脖子，遂送我處診治。

2 臨床癥狀

病兔體溫升高（41℃左右），精神不振，食欲減退，呼吸急促伴有拉稀；部分腹圍明顯增大，部分有彎脖子，耳朵一支豎起一支耷拉；病兔打噴嚏、咳嗽，呼吸困難；從鼻腔流出漿液性鼻液，以后轉(zhuǎn)為黏液性到膿性；病兔常用爪抓鼻部、口唇部，鼻孔周?chē)睗?、纏結(jié)，甚至脫落，上唇和鼻孔發(fā)炎、腫脹。幼兔唾液分泌增多，流涎，眼結(jié)膜蒼白、貧血，被毛粗亂無(wú)光澤。大部分出現(xiàn)腹瀉甚至排便帶血，肛門(mén)周?chē)患S便污染；個(gè)別未出現(xiàn)明顯腹瀉，突然用頭撞籠舍，呈角弓反張，尖叫而亡；后期一半以上有神經(jīng)癥狀，四肢痙攣或麻痹，角弓反張。

3 病理變化

病死兔表現(xiàn)為消化道的病變?yōu)橹饕?，腸道炎癥表現(xiàn)明顯；在腸道各腸段有不同程度臌氣，輕度出血，腸壁變薄，腸腔擴(kuò)張，腸內(nèi)容物稀薄，內(nèi)容物呈灰褐色或棕褐色；盲腸膨大，內(nèi)充盈有氣體和液體；有的兔子腹腔內(nèi)有大量腹水。胃多數(shù)充盈，有的胃底部黏膜脫落，個(gè)別胃底部糜爛，一觸即破。腸系膜充血明顯，淋巴結(jié)腫大。肺充血，有點(diǎn)狀出血或出血斑，部分肺表面有纖維素性滲出，與胸壁粘連；心臟肥大，心冠脂肪溝散在出血小點(diǎn)；氣管充出血明顯，伴有紅色黏液，有的可見(jiàn)血絲；肝臟略腫大，質(zhì)脆，個(gè)別兔子肝臟可見(jiàn)少量針尖狀壞死灶；脾臟基本正常，其他實(shí)質(zhì)性臟器未見(jiàn)明顯病變。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 細(xì)菌學(xué)診斷

4.1.1 組織觸片染色

取新鮮肺臟組織，用鋒利剪刀取黃豆大小病變明顯部位，在干凈載玻片輕輕按壓，晾干；用改良瑞氏-吉姆薩染色5min；鏡檢，在觸片上可見(jiàn)多量藍(lán)色的兩極濃染細(xì)菌，疑為巴氏桿菌。

4.1.2 細(xì)菌分離

無(wú)菌取心血、肝、肺等部位，分別接種于TSA 培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)24 h。麥康凱培養(yǎng)基上未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)；TSA 平板上的出現(xiàn)圓形、光滑、濕潤(rùn)、半透明菌落，菌落大小為1～2mm。該菌革蘭氏染色陰性，卵圓形，兩極濃染的球桿菌[3]。

4.1.3 生化鑒定

用無(wú)菌接種針挑取單菌落涂布于氧化酶試紙，顯紅色，為氧化酶陽(yáng)性；同時(shí)挑取單菌落置于3%過(guò)氧化氫溶液內(nèi)，未見(jiàn)氣泡產(chǎn)生，接觸酶陰性；故使用15e 非發(fā)酵細(xì)菌生化鑒定管鑒定進(jìn)行生化鑒定。將上述分離細(xì)菌，接種于TSB 中培養(yǎng)液中，37℃培養(yǎng)24h；用無(wú)菌金屬絲將菌液接種于微量發(fā)酵管內(nèi)，37℃培養(yǎng)36～48h，觀察結(jié)果（見(jiàn)表1）。

結(jié)果為多殺性巴氏桿菌。

4.1.4 藥敏試驗(yàn)

采用藥敏紙片擴(kuò)散法（K-B 法）： 將上述分離細(xì)菌，接種于TSB 中培養(yǎng)液中，37℃培養(yǎng)24h，取200μL 菌懸液，用滅菌三角玻棒均勻涂布于含TSA 平板中，待菌液干后用無(wú)菌鑷子取藥敏紙片置于培養(yǎng)基表面，使紙片之間距離適當(dāng)。置37℃培養(yǎng)24～36h 后觀察結(jié)果，游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈直徑(見(jiàn)表2)。

結(jié)果表明，分離細(xì)菌對(duì)頭孢噻呋、頭孢噻肟、阿米卡星、卡那霉素、清大霉素、復(fù)方新諾明、壯觀霉素高敏，對(duì)氟苯尼考、氨芐西林、環(huán)丙沙星、恩諾沙星為中敏，對(duì)紅霉素和青霉素耐藥。

表1 分離細(xì)菌微量生化管鑒定結(jié)果

表2 分離細(xì)菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果

4.2 寄生蟲(chóng)診斷

取小腸內(nèi)容物2g 左右，溶于生10ml 生理鹽水，用40 目濾網(wǎng)濾去糞渣，溶液置離心管中，3000rpm，離心20min，傾去上清，在殘?jiān)鼉?nèi)加入飽和食鹽水?dāng)嚢杈鶆颍o置10min，用鐵絲圈蘸取液面液體置于載玻片上，低倍顯微鏡下暗視野觀察，發(fā)現(xiàn)有多量卵圓形的球蟲(chóng)卵囊。

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果，并結(jié)合臨床癥狀和剖解病變，本次發(fā)病確診為兔球蟲(chóng)和多殺性巴氏桿菌并發(fā)感染。

5 防治措施

5.1 治療

根據(jù)上述診斷結(jié)果，考慮本場(chǎng)先前用藥的情況和經(jīng)濟(jì)情況，建議在飼料中添加氯苯胍加復(fù)方新諾明，連續(xù)飼喂5d；病情嚴(yán)重的可以注射卡那霉素或阿米卡星。復(fù)方新諾明不但對(duì)多殺性巴氏桿菌有效，而且也能增強(qiáng)氯苯胍的抗球蟲(chóng)效果?？紤]到頭孢噻呋、頭孢噻肟等為三代頭孢，雖然抗菌效果好，在動(dòng)物使用時(shí)不作為首選藥物。

5.2 預(yù)防

做好兔舍的消毒、通風(fēng)，保持兔舍的干燥和溫暖，防止應(yīng)激。及時(shí)清理病死兔只和糞便，并進(jìn)行無(wú)害化處理，防止疾病傳播[4]。對(duì)發(fā)病嚴(yán)重的兔只進(jìn)行隔離單獨(dú)治療，確保藥物足量使用（磺胺類(lèi)藥物首日倍量）。對(duì)于沒(méi)有發(fā)病的健康兔只進(jìn)行緊急免疫兔瘟-巴氏桿菌二聯(lián)滅活苗，皮下注射1.5ml/只[5,6]。

經(jīng)過(guò)上述方法處理，兔場(chǎng)于5 日后基本控制，7d 后完全恢復(fù)正常。

6 體會(huì)

兔球蟲(chóng)和巴氏桿菌病作為兔體常在病原，在天氣變化和應(yīng)激等情況下容易發(fā)生[5,6]。而發(fā)病以后，兔子腹圍增大和腹瀉是最容易看到的癥狀，以至于僅當(dāng)球蟲(chóng)病進(jìn)行治療，而忽視巴氏桿菌的并發(fā)感染，造成誤診和損失。因此，當(dāng)兔場(chǎng)出現(xiàn)疫病時(shí)，要充分考慮疾病的復(fù)雜性，特別是混合感染的可能性，切勿憑經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行亂投藥；應(yīng)及時(shí)請(qǐng)獸醫(yī)并結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷進(jìn)行確診，把損失降到最低程度。