鄞瑩，劉佳

（江西省贛州市人民醫(yī)院，贛州 341000）

下丘腦-垂體-腎上腺軸（HPA軸）是神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的中央樞紐，參與眾多重要的反饋調(diào)節(jié)，對機體衰老、應(yīng)激等生理病理過程起到重要調(diào)節(jié)作用[1]。 有研究表明[2]，2 型糖尿病（T2DM）患者的 HPA軸表現(xiàn)出一定亢進(jìn)狀態(tài)，患者血液中皮質(zhì)醇、兒茶酚胺等胰島素拮抗激素水平明顯升高，加重胰島素抵抗作用，從而加重機體糖代謝紊亂惡化。褪黑素是一種松果體內(nèi)合成分泌的激素，為N-乙酰-5-甲氧色胺。褪黑素可影響神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)等多個系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用，具有廣泛的藥理及生理功能；此外，其還能調(diào)節(jié)生物晝夜節(jié)律、免疫反應(yīng)、機體代謝等[3]。目前，將褪黑素應(yīng)用于T2DM研究較少，故研究旨在探討褪黑素對HPA軸功能的調(diào)節(jié)作用及糖脂代謝調(diào)節(jié)作用，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2017年3月-2019年3月間治療的T2DM患者82例做研究對象，入選患者均符合WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。將T2DM的患者采取隨機數(shù)字表法分成對照組與觀察組。其中男49例，女33例；病程20 d-10年，平均(2834.1±1823.7)d。82例患者納入研究時的臨床基線資料，見表1。排除標(biāo)準(zhǔn)：正在行糖皮質(zhì)激素、非類固醇抗炎藥、精神藥物治療患者；患者有過敏反應(yīng)、自身免疫紊亂或炎癥反應(yīng)；懷孕及哺乳患者；有嚴(yán)重精神類疾病、代謝綜合征及急性應(yīng)激反應(yīng)患者。且本研究已通過倫理委員會審批，患者知情并簽署知情書。

1.2 治療方法 兩組入選患者于住院次日6：00采集空腹條件下肘靜脈血3ml，血糖指標(biāo)立即進(jìn)行檢測，而采集的靜脈血靜置后離心10min（3000 r/min），分離血清可保存于-80℃待測。對照組每晚10點口服含淀粉的膠囊予以治療，0.25g/d，1次/d；觀察組患者給予0.25g褪黑素膠囊（生產(chǎn)商：吉林修正生物工程有限公司，批準(zhǔn)文號：國食健字G200 80087）于相同時間口服，1次/d；兩組患者均連續(xù)給藥6周。療程結(jié)束后次日清晨采集患者空腹條件下肘靜脈血3ml，血糖指標(biāo)立即進(jìn)行檢測，而采集的靜脈血靜置后3000r/min離心10min，分離血清置于-80℃保存待測。注意事項：患者治療期間避免劇烈活動、急性高血糖、急性高血壓及急性發(fā)熱等應(yīng)激因素出現(xiàn)，若發(fā)生上述情況，研究病例則退出本研究；患者治療期間每周檢測1-2次血糖指標(biāo)，并通過體檢及檢查排除相關(guān)應(yīng)激因素；治療期間患者避免服用谷胱甘肽、調(diào)脂藥物等抗氧化應(yīng)激藥物。

1.3 觀察指標(biāo) 采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA法）測定血清中促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（CRH）、血清皮質(zhì)醇（CORS）水平。檢測方法及步驟嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行（生產(chǎn)商：R＆D公司，US）；采用葡萄糖氧化酶法測定患者空腹血糖（FPG）水平；采用免疫凝集法測定糖化血紅蛋白A1c（HbA1c）水平；采用免疫比濁法測定總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇 （HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等血脂指標(biāo)水平；采用分光光度計法測定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）活度，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行測定，檢測試劑盒購自南京建成生物工程研究所。采用羥胺法比色法測定谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活度水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理，計量資料以表示，組間比較用t檢驗；計數(shù)資料以率[n(%)]表示，用卡方檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床基線資料比較 納入研究的82例T2DM患者的臨床基線資料。見表1。

2.2 兩組治療前后HPA軸激素水平比較 治療前，兩組患者的ACTH、CRH、CORS軸激素水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；治療后，觀察組ACTH、CRH、CORS軸激素水平均低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

2.3 兩組治療前后糖脂代謝水平比較 對照組經(jīng)安慰劑治療后的血糖及血脂指標(biāo)無明顯差異。觀察組予以褪黑素治療后，F(xiàn)PG、HbA1c水平較治療前明顯下降；且與對照組相比，F(xiàn)PG、HbA1c水平明顯下降 （P＜0.05）。 觀察組治療后的 TC、TG、HDLC、LDL-C水平較治療前無明顯改變，且與對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

2.4 兩組治療前后SOD、MDA、GSH-Px水平變化比較 對照組經(jīng)安慰劑治療6周后SOD、GSH-Px、MDA均無明顯變化（P＞0.05）。觀察組治療6周后SOD、GSH-Px較治療前明顯上升，而MDA較治療前明顯下降；且觀察組治療后SOD、GSH-Px活度水平較對照組明顯上升，MDA水平較對照組明顯下降，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表1 兩組T2DM患者的臨床基線資料情況比較（±s）

表1 兩組T2DM患者的臨床基線資料情況比較（±s）

空腹血糖（mmol/L）對照組（n=41）觀察組（n=41）分組 性別（男/女）年齡（歲）病程（年）體重指數(shù)（kg/m2）25/16 24/17 53.70±13.50 54.60±13.60 6.90±3.80 7.10±3.70 23.40±2.50 29.60±18.30 10.10±2.80 9.90±2.70餐后血糖（mmol/L）12.70±3.60 12.50±3.50糖化血紅蛋白（%）使用胰島素治療頻率[n(%)]8.98±1.63 8.77±1.73 6（14.6）5（12.2）

表2 兩組患者ACTH、CRH、CORS水平變化情況比較（±s）

表2 兩組患者ACTH、CRH、CORS水平變化情況比較（±s）

注：*與對照組予以治療后相比，P＜0.05

65.38±43.49 64.56±45.73 68.18±45.57 45.42±24.96*分組 治療時間 ACTH（ng/L） CRH（ng/L） CORS（μg/L）對照組（n=41）觀察組（n=41）治療前治療6周后治療前治療6周后29.67±18.37 28.21±17.69 30.36±19.02 22.56±10.25*746.83±663.36 725.65±647.28 751.19±672.97 456.82±297.59*

表4 兩組治療前后SOD、MDA、GSH-Px水平變化比較（±s）

表4 兩組治療前后SOD、MDA、GSH-Px水平變化比較（±s）

注：*與對照組治療6周后相比，P＜0.05

分組 治療時間 SOD（kIU/L） MDA（nmol/L）GSH-Px（IU/L）對照組（n=41）觀察組（n=41）治療前治療6周后治療前治療6周后47.68±7.93 48.62±8.12 48.76±7.81 67.21±10.97*5.41±1.26 5.32±1.19 5.39±1.31 4.38±0.95*69.39±15.45 75.42±15.96 70.58±14.99 97.47±23.18*

表3 兩組患者治療前后糖脂代謝水平的變化比較（±s）

表3 兩組患者治療前后糖脂代謝水平的變化比較（±s）

注：*與對照組予以安慰劑治療后相比，P＜0.05

HbA1c（%）8.93±1.51 8.76±1.34 8.89±1.54 7.67±1.17*分組 治療時間 FPG（mmol/L） TC（mmol/L） TG（mmol/L） HDL-C（mmol/L）對照組（n=41）觀察組（n=41）治療前治療6周后治療前治療6周后10.17±1.68 9.88±1.97 10.22±1.79 7.44±1.56*5.69±1.81 5.61±1.72 5.74±1.84 5.12±1.28 3.42±1.68 3.37±1.65 3.44±1.76 3.32±1.59 1.12±0.23 1.14±0.29 1.10±0.30 1.13±0.24 LDL-C（mmol/L）3.34±1.32 3.21±1.38 3.41±1.47 3.12±1.41

3 討論

2型糖尿?。═2DM）是一種以胰島素抵抗的慢性高血糖為主要特征的代謝性疾病。糖尿病患病率逐年上升，導(dǎo)致許多T2DM致殘或致死，因此探索T2DM的有效治療途徑迫在眉睫。研究表明[5，6]，T2DM的HPA軸表現(xiàn)出一定亢進(jìn)狀態(tài)，患者血液中皮質(zhì)醇、兒茶酚胺等胰島素拮抗激素水平明顯升高，加重胰島素抵抗作用，從而加重機體糖代謝紊亂惡化，因此推測HPA軸功能紊亂可能是T2DM發(fā)病的重要機制之一，通過改善HPA軸功能對治療T2DM具有重要意義[7]。

褪黑素是一種由松果體腺合成分泌的神經(jīng)內(nèi)分泌主要激素，其不僅有改善神經(jīng)內(nèi)分泌免疫功能、調(diào)節(jié)機體生物晝夜節(jié)律作用，還有較強的抗氧化應(yīng)激效果。褪黑素對處于抑制或應(yīng)激狀態(tài)下的下丘腦水平HPA軸功能具有改善糾正作用[8]。研究發(fā)現(xiàn)，對患者連續(xù)給予褪黑素5d治療能夠顯著改善因地塞米松長期使用所致HPA軸功能紊亂，連續(xù)給予褪黑素7d可明顯降低因急慢性應(yīng)急刺激而升高的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素的水平[9，10]。另有研究表明，對慢性應(yīng)激小鼠給予一定量的褪黑素進(jìn)行治療，可使上升的皮質(zhì)酮水平降至非應(yīng)急組的水平，降低了血液中的胰島素拮抗激素濃度，改善胰島素抵抗作用[11，12]。本研究結(jié)果顯示在給予6周褪黑素治療后，HPA軸激素ACTH、CRH、CORS水平較治療前明顯降低，且對照組患者ACTH、CRH、CORS均高于觀察組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。表明褪黑素能通過抑制 T2DM患者HPA軸功能亢進(jìn)作用，可能改善胰島素抵抗作用以減緩疾病發(fā)生進(jìn)展。另有結(jié)果顯示觀察組患者FPG、HbA1c水平較治療前相比下降，而TC、TG、HDL-C、LDL-C較治療前無明顯改變，差異無統(tǒng)計意義（P＞0.05）；對照組經(jīng)安慰劑處理后的血糖及血脂指標(biāo)無明顯差異。表明褪黑素可以改善T2DM的脂質(zhì)代謝反應(yīng)，減輕應(yīng)激反應(yīng)程度。觀察組經(jīng)褪黑素6周處理后血清SOD、GSH-Px較治療前明顯上升，而MDA較治療前明顯下降，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義 （P＜0.05）。 而對照組血清 SOD、GSH-Px、MDA均無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。這一結(jié)果表明經(jīng)褪黑素治療后，T2DM患者機體中自由基清除系統(tǒng)能力明顯加強，脂質(zhì)過氧化物也明顯降低，發(fā)揮出顯著的抗氧化應(yīng)激作用[13-16]。

綜上所述，應(yīng)用褪黑素治療T2DM及其并發(fā)癥具有良好的臨床應(yīng)用價值。褪黑素可能參與改善胰島素抵抗作用、糖脂代謝穩(wěn)態(tài)及抑制HPA軸功能過程，其還通過提高機體的抗氧化應(yīng)激能力來延緩糖尿病及并發(fā)癥的發(fā)生進(jìn)展。但褪黑素與T2DM的具體作用機制、給藥劑型劑量及使用時間仍不明確，褪黑素通過調(diào)節(jié)HPA軸來改善糖尿病的發(fā)生進(jìn)展分子機制尚需進(jìn)一步研究。本研究將褪黑素作為臨床藥物治療糖尿病及其并發(fā)癥的臨床應(yīng)用是通過調(diào)節(jié)HPA軸來防治T2DM，為臨床治療T2DM提供有力理論依據(jù)，也為今后從分子水平闡明褪黑素治療T2DM具體機制奠定重要理論基礎(chǔ)。