吳春麗，李 娟

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)一科，黑龍江 佳木斯 154007)

近年來(lái)我國(guó)高血壓發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)[1-2]。目前原發(fā)性高血壓發(fā)病機(jī)制不明，腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(renin-angiotensin-aldosterone system，RAAS)在原發(fā)性高血壓(essential hypertension，EH)的發(fā)生、發(fā)展及維持中起著重要作用[3]。一些學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，11β-HSD2活性與高血壓的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[4]。尿中氫化可的松(Hydrocortisone，F(xiàn))與可的松(cortisone，E)的比值是表示11β-HSD2活性更靈敏可靠的指標(biāo)[5]。本研究應(yīng)用高效液相色譜法測(cè)得11β-HSD2活性，探討EH患者11β-HSD2活性與腎素之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 對(duì)象選取2018年10月至2019年7月間我院高血壓門診就診或住院的未經(jīng)藥物治療(或停藥12周)的原發(fā)性高血壓患者113例為EH組，其中男性64例，女性49例，平均年齡為(49.79±13.75)歲。EH組的診斷及分級(jí)均符合2010年《中國(guó)高血壓防治指南》[6]診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：正在使用降壓藥物者(β-阻斷劑、ACEI/ARB、鈣阻劑)、繼發(fā)性高血壓等其他慢性疾病者。隨機(jī)選取我院同一時(shí)期門診健康體檢者121例為對(duì)照組，其中男性67例，女性54例，平均年齡為(47.38±12.76)歲。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會(huì)已審核、批準(zhǔn)本研究方案，所有入選患者充分了解知情同意書，并認(rèn)可其內(nèi)容，自愿簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 血漿腎素濃度(Plasma renin concentration，PRC)測(cè)定 所有受檢對(duì)象采血前囑其保持立位，無(wú)劇烈活動(dòng)>2h，均采集清晨空腹肘靜脈血5mL置于EDTA抗凝管中，靜置20min，離心10min分離出血漿，-20℃冰箱保存待測(cè)。采用Auto 2000化學(xué)發(fā)光儀及其配套試劑完成血漿腎素濃度(立位腎素)檢測(cè)。根據(jù)Alderman M[7]等標(biāo)準(zhǔn)將原發(fā)性高血壓分為低腎素型、中間腎素型、高腎素型三種，對(duì)應(yīng)腎素水平如下：低腎素型高血壓(<4 pg/mL)、中間腎素型高血壓(4～38 pg/mL)、高腎素型高血壓(>38 pg/mL)(佳大附院實(shí)驗(yàn)室指導(dǎo)參數(shù)[8]立位腎素的參考范圍4～38 pg/mL標(biāo)準(zhǔn)分類)。試劑盒購(gòu)自鄭州安圖生物工程股份有限公司。檢測(cè)前已完成產(chǎn)品在本實(shí)驗(yàn)的性能驗(yàn)證，檢測(cè)過(guò)程按照產(chǎn)品說(shuō)明操作。腎素檢測(cè)變異系數(shù)(CV)<5%。

1.2.2 11β-HSD2活性的測(cè)定 留取晨尿10mL，樣品處理后，-20℃冰箱保存待測(cè)，應(yīng)用高效液相色譜法測(cè)定并計(jì)算尿液標(biāo)本中F和E對(duì)內(nèi)標(biāo)皮質(zhì)酮的峰高比，然后代入標(biāo)準(zhǔn)曲線求出F和E的濃度，計(jì)算出它們的比值(F/E)，從而測(cè)得11β-HSD2活性，F(xiàn)/E值表示11β-HSD2活性，F(xiàn)/E比值越大，11β-HSD2活性越低[4]。經(jīng)方法學(xué)考核得出的回收率和日內(nèi)、日間精密度表明此方法靈敏、穩(wěn)定、可靠，符合生物樣品檢測(cè)的方法要求。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料均符合正態(tài)分布，以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析;計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn);EH患者11β-HSD2活性與腎素關(guān)系采用Pearson相關(guān)性分析，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較EH組和對(duì)照組一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

2.2 EH組和對(duì)照組腎素水平、11β-HSD活性比較EH組腎素水平顯著低于對(duì)照組(P=0.013)，而兩組F/E值相比差異無(wú)顯著(P=0.519)，見表2。

表2 兩組腎素、11β-HSD活性比較

2.3 不同腎素型EH患者與對(duì)照組11β-HSD活性比較低腎素型EH患者F/E值顯著增高于對(duì)照組(P<0.05)；低腎素型EH患者F/E值與高腎素型EH相比也有顯著差異(P<0.05)；低腎素型EH患者F/E值與中間腎素型EH相比無(wú)顯著差異(P>0.05)；高腎素型EH、中間腎素型EH的F/E值與對(duì)照組相比，均無(wú)顯著差異(P>0.05)，見表3。

表3 不同腎素型高血壓與對(duì)照組11β-HSD2活性比較

注：與對(duì)照組相比，*P<0.05；與高腎素型EH相比，#P<0.05

2.4 EH患者11β-HSD2活性與腎素之間相關(guān)性分析F/E值與腎素相關(guān)性分析結(jié)果顯示，F(xiàn)/E比值與腎素之間存在負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.797，P=0.000)，而F/E比值越大，11β-HSD2活性越低，所以，EH患者11β-HSD2活性與血漿腎素之間呈正相關(guān)。

3 討論

11β-HSD屬于微粒體酶，分為11β-HSD1、11β-HSD2兩種同工酶，與原發(fā)性高血壓有關(guān)的主要是11β-HSD2。它主要作用是將血液中F轉(zhuǎn)化為E(在嚙齒動(dòng)物為皮質(zhì)醇、脫氫皮質(zhì)醇)，使F濃度降低，從而使鹽皮質(zhì)激素受體(Mineralocorticoid receptor，MR)特異性與醛固酮結(jié)合，發(fā)揮正常生理功能。因此，腎組織內(nèi)F、E水平的高低主要取決于11β-HSD2的活性[9]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，EH組血漿腎素顯著低于對(duì)照組，與梁莉紅、吳紅珍、王朝暉等[10-12]報(bào)道一致，這是由于EH患者受到長(zhǎng)期的惡性循環(huán)刺激，導(dǎo)致RAAS系統(tǒng)處于活躍狀態(tài)，長(zhǎng)期的高血壓環(huán)境及低滲環(huán)境會(huì)導(dǎo)致腎素濃度降低，其誘發(fā)高血壓的機(jī)制可能與鈉水潴留及細(xì)胞外液容量增加有關(guān)[13]。曾報(bào)道Soro[14]對(duì)68名未治療的EH患者皮質(zhì)醇排泄分析表明11β-HSD和5β-還原酶活性比對(duì)照組偏低(P<0.05)，但亦有報(bào)道差別無(wú)顯著性[15]。姚兵等[16]對(duì)84例原發(fā)性高血壓患者和健康志愿者11β-HSD活性的測(cè)定研究表明，原發(fā)性高血壓患者11β-HSD2活性與健康志愿者相比無(wú)顯著差異，但發(fā)現(xiàn)EH患者中有12%的F/E偏高。本研究結(jié)果顯示：EH患者F/E與對(duì)照組相比也無(wú)顯著差異(P<0.05)，可能是因?yàn)槲磳?duì)EH患者進(jìn)行腎素分型時(shí)，所有EH患者的F/E均值與對(duì)照組較接近。

蔣文龍等[17]對(duì)54名EH患者測(cè)定11β-HSD2活性的研究表明，在血漿腎素水平降低的EH患者中發(fā)現(xiàn)11β-HSD2活性降低。Wilson[18]等報(bào)道了一例11β-HSD基因缺陷導(dǎo)致低腎素型高血壓，該研究從側(cè)面提示在眾多低腎素型高血壓中可能隱藏著11β-HSD活性異常降低。張林等[19]探討EH與腎11β-HSD2活性之間關(guān)系研究表明，11β-HSD2活性下降，導(dǎo)致水鈉潴留及血漿腎素分泌受抑，可能是引起低腎素型EH的原因之一。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：低腎素型EH患者11β-HSD2活性與對(duì)照組相比顯著降低，與高腎素型EH相比也有顯著差異，表示EH患者11β-HSD2活性與腎素關(guān)系密切。進(jìn)行相關(guān)性分析結(jié)果F/E比值與腎素之間存在負(fù)相關(guān)關(guān)系，而F/E比值越大，11β-HSD2活性越低，患者11β-HSD2活性與血漿腎素之間呈正相關(guān)，原因可能為11β-HSD2活性降低，導(dǎo)致氫化可的松轉(zhuǎn)化為可的松減少，使游離氫化可的松增多，與醛固酮競(jìng)爭(zhēng)MR，表現(xiàn)為體內(nèi)鈉水潴留、血容量增加，即產(chǎn)生了高血壓，同時(shí)通過(guò)負(fù)反饋又抑制了血漿腎素分泌，導(dǎo)致血漿腎素水平降低。近年來(lái)研究[20-21]11β-HSD2活性與高血壓的關(guān)系較為統(tǒng)一觀點(diǎn)是11β-HSD2活性下降，血壓升高，但EH患者11β-HSD2活性與腎素關(guān)系的研究國(guó)內(nèi)外尚未見報(bào)道。王述琦[22-24]等人研究證實(shí)，11β-HSD2參與原發(fā)性高血壓的發(fā)病，且與低腎素型高血壓的關(guān)系密切，但具體作用途徑尚存在爭(zhēng)議。

綜上所述，原發(fā)性高血壓患者血漿腎素水平降低，腎素水平與11β-HSD2活性呈正相關(guān)，11β-HSD2在原發(fā)性高血壓發(fā)病中可能有重要的作用，有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行深入研究，為原發(fā)性高血壓發(fā)病機(jī)制的研究提供新的線索。