阮少江,黃偉卿,,倪建成,周逢芳,林培華,葉祖云
(1.福建省特色藥用植物工程技術(shù)研究中心,福建 寧德 352100;2.寧德師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,福建 寧德 352100;3.寧德市鼎誠(chéng)水產(chǎn)有限公司,福建 寧德 352100)
大黃魚(yú)Larimichthys crocea 主要分布在中國(guó)黃海南部、東海、臺(tái)灣海峽到南海雷州半島以東,2017年產(chǎn)量達(dá)17.76 萬(wàn)t,居海水養(yǎng)殖魚(yú)類產(chǎn)量之首,為我國(guó)近海海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖規(guī)模最大和八大優(yōu)勢(shì)出口水產(chǎn)品之一[1]。近幾年,隨著養(yǎng)殖規(guī)?;图s化水平的不斷提高,養(yǎng)殖環(huán)境變化、長(zhǎng)期投喂冰鮮餌料和落后的飼養(yǎng)管理水平等使養(yǎng)殖水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)緩慢、病害頻發(fā),藥物用量和頻率增加,制約著整個(gè)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展[2]。因此,開(kāi)發(fā)促進(jìn)養(yǎng)殖水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)、增強(qiáng)抗病能力的環(huán)保型飼料添加劑已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展新趨勢(shì)[3,4]。
太子參Pseudostellaria heterophylla(又名孩兒參)是一種可用于保健的中藥材,含有多糖、皂甙、環(huán)肽、氨基酸、微量元素等活性物質(zhì)[5],具有抗應(yīng)激、抗疲勞、抗氧化、抗炎等藥理活性[6,7]。對(duì)小鼠[8-10]、豬[11-13]的研究結(jié)果表明,太子參可提升動(dòng)物機(jī)體免疫保護(hù)作用,促進(jìn)增長(zhǎng);對(duì)水生生物的研究?jī)H見(jiàn)于提高對(duì)蝦Penaeus orientalis[14]和福瑞鯉Cyprinus carpio[15]的抗病能力,太子參提取物在大黃魚(yú)養(yǎng)殖中的應(yīng)用未見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。
本研究通過(guò)將太子參提取液添加到大黃魚(yú)飼料中,研究其對(duì)大黃魚(yú)養(yǎng)殖成活率和生長(zhǎng)性能的影響,以期為開(kāi)發(fā)提升大黃魚(yú)品質(zhì)的健康環(huán)保型飼料改進(jìn)劑提供參考。
試驗(yàn)用魚(yú):來(lái)源于寧德市鼎誠(chéng)水產(chǎn)有限公司自行繁育的健康、規(guī)格一致,平均體長(zhǎng)(23.45±0.83)cm,體質(zhì)量(34.05±8.23)g 的大黃魚(yú)幼魚(yú)。
太子參提取液的制備:選取太子參塊根,洗凈風(fēng)干,研磨成粉,過(guò)60 目篩備用。將太子參粉末置圓底底燒瓶中,加80%乙醇,水浴90℃回流提取3h,趁熱過(guò)濾,殘?jiān)?5℃超純水浸提4h 后過(guò)濾,兩次濾液混合、濃縮,去除水分,即為太子參提取液(濃度為40mg/mL),保存于4℃冰箱中備用。
試驗(yàn)用飼料:采用“海馬”牌大黃魚(yú)人工配合飼料(粗蛋白≥45.0,粗脂肪≥6.0,粗纖維≤5.0,粗灰分≤14.0,3.0≥鈣≥1.0,總磷≥1.0,3.0≥氯化鈉≥0.5,賴氨酸≥2.8,水分≤10.0)。
試驗(yàn)在寧德師范學(xué)院國(guó)家海洋局海西海洋生物種質(zhì)資源及生物制品開(kāi)放利用公共服務(wù)平臺(tái)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中1.5T 養(yǎng)殖桶中進(jìn)行。試驗(yàn)組飼料中分別添加太子參提取液濃度為0.5%(C0.5)、1.0%(C1.0)、1.5%(C1.5)和2.0%(C2.0),對(duì)照組不添加太子參提取液。每組設(shè)置3 個(gè)平行組,每組300 尾大黃魚(yú)幼魚(yú)。每天分2 次投喂魚(yú)體質(zhì)量1%~2%的試驗(yàn)飼料,視攝食情況酌情調(diào)整。
養(yǎng)殖水體水溫控制在24~26℃之間,溶解氧大于5.0mg/L,pH8.0 左右,氨氮小于0.2mg/L。常規(guī)養(yǎng)殖管理,做好養(yǎng)殖記錄。
在試驗(yàn)中期(60d)和試驗(yàn)結(jié)束(120d)時(shí),每組隨機(jī)取30 尾樣品,采用丁香酚麻醉后,測(cè)量(精度0.1 cm)體長(zhǎng)和稱量(精度0.1g)體質(zhì)量、內(nèi)臟重和肝臟重,測(cè)量后放回繼續(xù)養(yǎng)殖。
測(cè)定和計(jì)算公式如下:
成活率(%)=Nt/N0×100%
體重絕對(duì)增加率(g/d)=(M2-M1)/(T2-T1)
絕對(duì)增長(zhǎng)率(cm/d)=(L2-L1)/(T2-T1)
增積量=(M2-M1)×(L2-L1)/(T2-T1)2
肥滿度=M/L3×100%
臟體比(%)=m/M×100%
肝體比(%)=n/M×100%
式中:Nt為終末魚(yú)尾數(shù);N0為初始魚(yú)尾數(shù);M 為體質(zhì)量(g);L 為體長(zhǎng)(cm);M1、M2和L1、L2分別為時(shí)間T1、T2時(shí)的體質(zhì)量(g)和體長(zhǎng)(cm);m 為內(nèi)臟重量,n 為肝臟重量。
數(shù)據(jù)采用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)分析。用Duncan’s 多重比較分析差異顯著性。
由圖1 可知:試驗(yàn)60d 時(shí),C1.0和C2.0組的成活率分別為(96.5±2.8)%和(95.4±3.5)%,顯著高于對(duì)照組(P<0.05);試驗(yàn)120d 時(shí),C0.5、C1.0和C2.0組的成活率分別為(84.5±4.1)%、(88.1±5.3)%和(84.9±5.7)%,均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),且C1.0的養(yǎng)殖成活率均高于其他各組(圖1)。
試驗(yàn)60d 時(shí),C1.5組大黃魚(yú)的體質(zhì)量絕對(duì)增加率(0.22±0.007)g/d 顯著高于對(duì)照組(P<0.05),C0.5和C2.0組魚(yú)的體質(zhì)量絕對(duì)增加率低于對(duì)照組,差異不顯著(P>0.05);試驗(yàn)120d 時(shí),試驗(yàn)組的體質(zhì)量絕對(duì)增加率均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),C0.5組的體質(zhì)量絕對(duì)增加率最大,為(0.25±0.004)g/d(圖2-A)。
試驗(yàn)60d 時(shí),C1.0組大黃魚(yú)的絕對(duì)增長(zhǎng)率(0.033±0.005)cm/d,顯著高于對(duì)照組(P<0.05),其他試驗(yàn)組均顯著低于對(duì)照組(P<0.05);試驗(yàn)120d 時(shí),C0.5組的絕對(duì)增長(zhǎng)率最大,為(0.026±0.006)cm/d,C1.5組的絕對(duì)增長(zhǎng)率最小,為(0.016±0.004)cm/d,除C1.5組,其他試驗(yàn)組的絕對(duì)增長(zhǎng)率均高于對(duì)照組(圖2-B)。
試驗(yàn)60d 時(shí),C0.5和C2.0組大黃魚(yú)的增積量顯著低于對(duì)照組(P<0.05),C1.0組的增積量顯著高于對(duì)照組(P<0.05);試驗(yàn)120d 時(shí),C0.5、C1.0和C2.0組的增積量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),C1.5組的低于對(duì)照組,但差異不顯著(P>0.05)(圖3-A)。
試驗(yàn)60d 時(shí),試驗(yàn)組大黃魚(yú)的肥滿度均高于對(duì)照組,差異不顯著(P>0.05);試驗(yàn)120d 時(shí),對(duì)照組的肥滿度(2.43±0.36)最大,顯著高于試驗(yàn)組(P<0.05)(圖3-B)。
試驗(yàn)60d 時(shí),試驗(yàn)組魚(yú)的臟體比均高于對(duì)照組,其中C0.5和C1.5組顯著高于對(duì)照組(P<0.05);試驗(yàn)120d 時(shí),C1.0組顯著低于其他各組(P<0.05),C2.0組顯著高于其他各組(P<0.05)(圖3-C)。
試驗(yàn)60d 時(shí),C0.5組的肝體比最大,為(1.39±0.21)%,C0.5組的肝體比最小,為(1.00±0.14)%,組間差異不顯著(P>0.05);試驗(yàn)120d 時(shí),對(duì)照組的肝體比為(1.95±0.23)%,顯著高于試驗(yàn)組(P<0.05)(圖3-D)。
王家葵等[16]、宋玉龍等[17]、Yang 等[18]的研究結(jié)果表明,太子參活性物質(zhì)對(duì)損傷動(dòng)物免疫機(jī)體起到保護(hù)作用,具有較強(qiáng)的增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫力的功效。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組和對(duì)照組大黃魚(yú)均感染了嗜水氣單胞菌病Aeromonas hydrophila 和假單胞菌病Pseudomonadaceae,而試驗(yàn)組死亡率明顯下降,可見(jiàn)太子參提取液提高了大黃魚(yú)的免疫力、抗病能力和成活率。
本研究還發(fā)現(xiàn),隨著太子參提取液添加量的不斷增加,大黃魚(yú)養(yǎng)殖成活率卻下降,添加量為1.0%組的成活率最高。這與謝忠毅[19]將太子參應(yīng)用在鯉上出現(xiàn)的結(jié)果一致。太子參提取液的主要成分是多糖和皂苷,這兩種成分對(duì)大黃魚(yú)機(jī)體免疫能力影響的濃度及最適添加量將在后期進(jìn)一步探討。
本研究結(jié)果表明,飼料中添加太子參提取液養(yǎng)殖60d 時(shí),大黃魚(yú)體質(zhì)量絕對(duì)增加率提高。筆者認(rèn)為,太子參能促進(jìn)人體腸胃消化吸收的功效[20,21],對(duì)大黃魚(yú)可能也有同樣功效。隨著養(yǎng)殖時(shí)間的增長(zhǎng),養(yǎng)殖120d 后,大黃魚(yú)的體質(zhì)量絕對(duì)增加率、絕對(duì)增長(zhǎng)率和增積量均顯著高于對(duì)照組,與丁春花[22]對(duì)太子參藥效評(píng)價(jià)中得出具有藥力平和的特點(diǎn)結(jié)果一致,長(zhǎng)時(shí)間的使用效果更佳。經(jīng)過(guò)120d 的養(yǎng)殖試驗(yàn),各試驗(yàn)組大黃魚(yú)的肥滿度顯著小于對(duì)照組,說(shuō)明太子參對(duì)大黃魚(yú)有健胃消食作用效果。
肝臟是魚(yú)類碳水化合物代謝的重要器官,在糖酵解和糖異生作用中調(diào)節(jié)血糖含量變化中發(fā)揮重要作用[23]。而肝臟的這種調(diào)節(jié)能力隨著魚(yú)食性的變化而有所不同,一般情況下,肉食性魚(yú)類表現(xiàn)出比較低的水平[24,25]。本次研究前期(60d),投喂添加太子參提取液的大黃魚(yú)臟體比和肝體比高于對(duì)照組,這主要與太子參提取液中含有多糖有關(guān);試驗(yàn)后期(120d),部分肝體比和臟體比均低于對(duì)照組,這與對(duì)金頭鯛Sparus aurata[26]、河鱸Perca fluviatilis[27]和歐洲鱸Dicentrarchus labrax[28]的研究結(jié)果一致。太子參高糖飼料對(duì)肝臟PK 活力影響有待深入研究。
大量的研究表明,太子參具有顯著的增強(qiáng)免疫、抗炎和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的作用,在畜牧生產(chǎn)中已有較多應(yīng)用[8]。在水生動(dòng)物上,已在對(duì)蝦[14]和福瑞鯉[15]中進(jìn)行了應(yīng)用,并取得了良好的抗病和提高免疫力的效果。本次在大黃魚(yú)中的應(yīng)用,對(duì)促進(jìn)大黃魚(yú)的抗病、生長(zhǎng)和形體性能均有一定的促進(jìn)和改良效果。太子參作為一種新型綠色的免疫增強(qiáng)劑,具毒性低、無(wú)污染、無(wú)耐藥性、無(wú)藥物殘留等特點(diǎn),目前被廣泛認(rèn)可[29-31]。近年來(lái),以太子參的下腳料(莖和葉)作為飼料添加劑同樣具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[32],可為后期在生產(chǎn)上廣泛應(yīng)用中降低生產(chǎn)成本和太子參的綜合利用提供新思路。隨著太子參及其下腳料中的有效成分作用于水生動(dòng)物機(jī)制的深入研究,將可能實(shí)現(xiàn)其作為水生動(dòng)物飼料綠色、新型添加劑,作為獸用藥物的替代品應(yīng)用于生產(chǎn)中。