趙 嵐，方曉丹，王蒙荷，劉 英，陳益平，蔣紅心

(1.浙江省金華市人民醫(yī)院兒科，浙江 金華 321000；2.浙江省義烏市中心醫(yī)院兒科，浙江 義烏 322000；3.溫州醫(yī)科大學(xué)感染科，浙江 溫州 325000；4.浙江省東陽市婦保院兒科，浙江 東陽 322100)

急性呼吸道感染患兒臨床表現(xiàn)以鼻塞、咳嗽、流涕、全身不適、肌肉酸痛、氣短或呼吸困難等為主，嚴(yán)重危害兒童健康[1]。近年來，臨床上發(fā)現(xiàn)大部分急性呼吸道感染是由病毒引起的，常見的引起呼吸道感染的病毒包括鼻病毒(human rhinovirus，HRV)、偏肺病毒(human metapneumovirus，HMPV)、呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytin virus，RSV)、腺病毒(adenovirus，ADE)、副流感病毒Ⅰ型(para influenza，PIV1)、PIV2、PIV3、流感病毒A型(influenza virus A，F(xiàn)luA)、FluB等，原有的呼吸道病毒仍在流行，新的呼吸道病毒在不斷被發(fā)現(xiàn)[2-3]。有研究表明，不同季節(jié)、不同年齡兒童急性呼吸道感染的分布差異較大[4]。由此可見，掌握兒童急性呼吸道感染的流行病學(xué)特征，對于減少兒童急性呼吸道感染的發(fā)生具有重要意義[5]。因此，本研究對浙江省金華市人民醫(yī)院兒科收治的452例急性呼吸道感染患兒的HRV、HMPV、RSV、ADE、PIV1、PIV2、PIV3、FluA、FluB 9種病原體流行特征進(jìn)行調(diào)查研究，探討兒童急性呼吸道感染的流行病學(xué)及HRV感染情況，旨在為臨床更好地防治兒童急性呼吸道感染提供依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1研究對象

選取浙江省金華市人民醫(yī)院兒科在2016年1至12月收治的452例急性呼吸道感染患兒為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①確診為急性呼吸道感染患兒；②年齡介于0～12歲之間；③臨床資料完整者；④患兒家長簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①非金華地區(qū)常住人口；②依從性差，不配合本次研究者；③合并有自身免疫性疾病。通過檢索我院兒科電子病歷系統(tǒng)或檔案室患兒病歷資料，詳細(xì)、準(zhǔn)確收集患兒基線資料。452例患兒中男258例，女194例；按入院季節(jié)分為：春季(立春至立夏)122例，占26.99%(122/452)，夏季(立夏至立秋)118例，占26.11%(118/452)，秋季(立秋至立冬)120例，占26.55%(120/452)，冬季(立冬至立春)92例，占20.35%(92/452)；按年齡分為：0～4歲患兒200例，占44.25%(200/452)，5～8歲患兒152例，占33.63%(152/452)，9～12歲患兒100例，占22.12%(100/452)。

1.2方法

1.2.1收集資料與標(biāo)本

由兩名醫(yī)護(hù)人員采用我院自擬調(diào)查問卷專門的對患兒及其家長進(jìn)行調(diào)查，調(diào)查問卷內(nèi)容包括年齡、性別、發(fā)病年齡及發(fā)病季節(jié)等。所有患兒咽拭子標(biāo)本均在發(fā)病3d之內(nèi)且未使用抗病毒藥物前進(jìn)行采集，具體措施如下：采集標(biāo)本者左手持一次性壓舌板壓住患兒舌頭，右手持無菌拭子對患兒咽后壁及雙側(cè)咽扁桃體進(jìn)行擦拭，在操作過程中應(yīng)避免觸及舌部。將拭子頭浸泡于采樣液中，并擠壓拭子頭部3～5次，將拭子的尾部用力折斷后棄去。將咽拭子標(biāo)本放于2mL的培養(yǎng)基中并充分搖勻，室溫下放置60min后進(jìn)行離心處理，取上清液放于-70℃的冰箱中保存待測。

1.2.2指標(biāo)檢測

按照試劑盒說明書，對病毒總核酸進(jìn)行提取，在同一反應(yīng)條件下對HRV、HMPV、RSV、ADE、PIV1、PIV2、PIV3、FluA、FluB 9種病原體同時(shí)進(jìn)行擴(kuò)增。每種病原體為1個(gè)反應(yīng)孔。每次測試均設(shè)陽性、陰性對照，各檢測孔均與標(biāo)準(zhǔn)孔進(jìn)行對照。

1.2.3主要試劑及儀器

核酸提取試劑盒由北京盛科博源生物科技有限公司提供；實(shí)時(shí)定量PCR檢測試劑盒由上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司提供；各型病毒的探針和引物均由北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供；LNB48+型熒光定量RT-PCR檢測儀由上海皓莊儀器有限公司生產(chǎn)；TG1850-WS臺式高速離心機(jī)由上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司生產(chǎn)；MDF-592型醫(yī)用-70℃冰柜由日本SANYO公司生產(chǎn)；LabAide漩渦混勻器由世界精密儀器商貿(mào)(上海)有限公司生產(chǎn)；MF31型熒光顯微鏡由廣州市明美光電技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

1.3觀察指標(biāo)

觀察急性呼吸道感染患兒HRV、HMPV、RSV、ADE、PIV1、PIV2、PIV3、FluA、FluB 9種病原體陽性表達(dá)情況并比較不同性別、年齡、季節(jié)的發(fā)病情況，分析兒童急性呼吸道病毒感染情況及流行病學(xué)特征。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件處理數(shù)據(jù)，HRV、HMPV、RSV、ADE、PIV1、PIV2、PIV3、FluA、FluB 9種病原體陽性表達(dá)情況等計(jì)數(shù)資料用百分率(%)描述，采用卡方(χ2)檢驗(yàn)，設(shè)置檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1病毒檢出情況

452例患兒中，共檢出病毒核酸陽性204例，陽性檢出率為45.13%(204/452)，其中HRV陽性數(shù)檢出最多，為51例，陽性率為11.28%(51/452)；其次為FluA 40例，陽性率8.85%(40/452)；混合感染23例，陽性率5.09%(23/452)，見表1。

表1 452例患兒病毒檢出情況Table 1 The positive detection rates of the viruses in 452 children

2.2性別分布情況

不同性別患兒的病毒總陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；不同性別患兒各病毒陽性檢出率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，見表2。

表2 不同性別患兒病毒陽性檢出情況比較[n(%)]Table 2 Comparison of positive detection rates of the viruses in children between different gender groups[n(%)]

2.3季節(jié)分布情況

冬季患兒的病毒總陽性檢出率明顯高于其他季節(jié)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；患兒HRV、FluA陽性檢出率亦明顯高于其他季節(jié)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其余各病毒陽性檢出率在不同季節(jié)間比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，見表3。

表3 不同季節(jié)患兒病毒陽性檢出情況比較[n(%)]Table 3 Comparison of positive detection rates of the viruses in children among different seasons [n(%)]

2.4年齡分布情況

0～4歲患兒病毒總陽性檢出率明顯高于其他年齡段患兒，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)；0～4歲患兒HRV、FluA陽性檢出率明顯高于其他年齡段患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)；其余各病毒陽性檢出率在不同年齡段間比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)；患兒病毒總陽性檢出率和HRV、FluA陽性檢出率隨著年齡增長而逐漸下降，見表4。

表4 不同年齡患兒病毒陽性檢出情況比較[n(%)]Table 4 Comparison of positive detection rates of the viruses in children among different age groups [n(%)]

3討論

3.1引起兒童急性呼吸道感染的主要病原體

引起兒童急性呼吸道感染的病原體的種類較多，一般認(rèn)為病原體的分離培養(yǎng)是最佳的檢測方式，但由于其時(shí)間長、要求高，臨床并未推廣使用。而采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法對急性呼吸道感染患兒病原體進(jìn)行檢測，具有敏感性好、檢出結(jié)果快等優(yōu)點(diǎn)，故本研究選取此方法對急性呼吸道感染患兒HRV、HMPV、RSV、ADE、PIV1、PIV2、PIV3、FluA、FluB 9種病原體進(jìn)行檢測[6-7]。

本研究結(jié)果顯示，452例患兒中HRV陽性檢出最多，為51例，陽性率為11.28%，表明急性呼吸道感染患兒中以HRV感染為主。HRV是一種小核糖核酸病毒科RNA病毒，是導(dǎo)致個(gè)體發(fā)生上呼吸道感染的主要病毒[8]。HRV可通過鼻、眼、口等侵入人體[9]。HRV感染后與細(xì)胞間黏附因子進(jìn)行結(jié)合，對轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行激活，誘導(dǎo)白細(xì)胞介素-6、粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子、白細(xì)胞介素-8等的合成，這些炎性因子可以使嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等炎性細(xì)胞在氣道黏膜及黏膜下層進(jìn)行積聚，導(dǎo)致氣道屏障功能受損，從而導(dǎo)致炎癥反應(yīng)及組織、細(xì)胞病變的產(chǎn)生[10]。

3.2兒童急性呼吸道感染的可能機(jī)制與防治

本研究結(jié)果顯示，冬季患兒病毒總陽性檢出率和HRV、FluA陽性檢出率明顯高于其他季節(jié)，說明冬季是兒童發(fā)生急性呼吸道感染的危險(xiǎn)時(shí)期。分析原因?yàn)槎練鉁氐停容^寒冷，兒童更喜歡在室內(nèi)活動(dòng)，減少了開窗通風(fēng)的幾率，再加上開空調(diào)取暖，導(dǎo)致室內(nèi)外的溫差較大，從而增加了兒童發(fā)生急性呼吸道感染的風(fēng)險(xiǎn)[11-12]。徐莉立等[13]研究結(jié)果顯示，青海省10—12月兒童急性呼吸道感染病毒陽性檢出率最高，與本研究結(jié)果并不一致，這主要與地區(qū)差異有關(guān)。本研究中，0～4歲患兒病毒總陽性檢出率和HRV、FluA陽性檢出率明顯高于其他年齡患兒，患兒病毒總陽性檢出率和HRV、FluA陽性檢出率隨著年齡增長而逐漸下降?？赡茉蚴?～4歲兒童免疫系統(tǒng)發(fā)育不成熟，細(xì)胞免疫功能尚未完善，且氣道黏膜缺少分泌型免疫球蛋白，抵抗力相對較差[14-15]。因此，臨床應(yīng)加大兒童急性呼吸道感染相關(guān)知識的宣傳力度，提高兒童及家長的保健意識。

綜上所述，兒童急性呼吸道感染以HRV感染為主，好發(fā)于冬季，0～4歲為易感人群。臨床上應(yīng)根據(jù)兒童急性呼吸道感染的流行病學(xué)特點(diǎn)制定相關(guān)防治措施，以減少其發(fā)生。