黃秀明， 利旭輝，肖春花，周偉澤

(廣東省惠州市第三人民醫(yī)院，廣東 惠州 516000)

現(xiàn)階段世界范圍內(nèi)，感染HCV的大約有1.7億人。HCV感染可能會導致患者發(fā)生慢性丙型肝炎、肝癌以及肝硬化[1]。HCV主要有6個基因型以及不同亞型，在美國、歐洲以及亞太地區(qū)中，直接抗病毒藥物治療(DAA藥物治療)已經(jīng)成為丙型肝炎患者的抗病毒治療首選方案。HCV RNA載量對病毒的復制程度以及患者的疾病變化情況有直接的反應，并且該指標屬于診斷丙型肝炎以及對抗病毒療效進行衡量的一項重要指標[2]。基于此，對HCV基因型以及各型HCV RNA載量之間的相關性進行研究具有重要臨床意義。本研究中，針對丙型肝炎患者HCV RNA定量與基因分型的相關性展開了分析?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：收集2016年1月～2019年1月我院的300份丙型肝炎患者HCV RNA定量陽性標本，收集標本之后將其放置于-70 ℃進行冷凍儲存等待檢驗。

1.2方法

1.2.1HCV RNA檢測：抗-HCV復測結果呈陽性的標本進行HCV RNA檢測，采用實時熒光定量PCR法進行檢測，試劑盒的檢測下限應設置為500 IU/ml，試劑批號為20180711，20180912；20181121，同時對質(zhì)控品進行檢測。

1.2.2丙型肝炎基因型檢測：針對檢測出HCV RNA高于下限的標本，采用針對HCV5'非編碼區(qū)的特異性引物實施逆轉(zhuǎn)錄以及套式PCR擴增，給予擴增產(chǎn)物進行凝膠電泳檢測，溴化乙錠染色之后，將其放置于紫外燈下進行觀察，HCV1b型：144bp；HCV2a型：174bp；HCV2b型：123bp。

2 結果

2.1基因分型結果：300份標本中，共檢測出三種單基因型，分別是1b、2a、2b，一種混合感染形式為1b/2a，11例未分型。其中174份HCV1b型，占比58%；70份2a型，占比23.33%；8例2b型，占比2.67%；4例1b/2a混合型，占比1.33%；44例6a型，占比14.67%。

2.2不同基因型間HCV RNA載量的分析：對285例HCV單基因型患者的基因型與首次血清病毒RNA定量進行單因素方差分析，最終得出的結果顯示基因型與HCV RNA定量之間存在顯著統(tǒng)計學差異，1b型的丙型肝炎病毒RNA拷貝數(shù)明顯高于2a型以及2b型。見表1。

表1 不同基因型的患者抗體濃度對比以及患者HCV RNA載量對比[中位數(shù)(95%CI)]

基因型例數(shù)HCV RNA(x±s,kIU/L)1b2076.12±0.832a706.14±0.572b85.61±0.971b/2a46.61±0.63F值3.382P值0.001

3 討論

HCV是一種單股線性正鏈RNA病毒，該病毒的基因組序列具有高度的變異性[3]。根據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計可知，大約有1.7億人患有慢性丙肝，并且存在繼發(fā)肝癌的風險[4]?；颊邔Ρ透涡圆《镜姆磻獜亩a(chǎn)生的抗體，是篩查HCV感染時最主要的一項標志物，但是其中存在一項較為突出的問題—假陽性，因此，需要采用病毒核酸擴增試驗或是重組免疫印記實驗對抗HCV陽性的標本進行確認，從而使標本檢驗結果存在假陽性的問題能夠減少[5]。

HCV是黃疸病毒科肝炎病毒屬的一項主要部分，其基因組主要是單股正鏈RNA，極易發(fā)生突變情況，當長期演變之后，會出現(xiàn)很多基因變異株。近幾年來，丙型肝炎抗病毒藥物發(fā)展迅速，在丙型肝炎的治療史中，DAA是一項標志性事件，由于DAA藥物在實際的應用過程中具有有效性高、便于服用以及全基因型覆蓋的優(yōu)勢[6]，因此，已經(jīng)得到了廣泛的應用。丙型肝炎抗病毒治療的治療效果與患者的基因型之間存在一定的聯(lián)系。根據(jù)2019年慢性丙型肝炎防治指南中，Ⅲ期臨床試驗1B型12周SVR為99%，2a型12周SVR為100%，3型為97%。

在本研究中，可以看到，檢出HCV基因型主要是1b以及2a型，分別占比58.00%、23.33%。根據(jù)最終的分析結果可以得出，1b型的丙型肝炎病毒RNA拷貝數(shù)明顯高于2a型以及2b型。由此可知，丙型肝炎患者在接受治療之前，患者的HCV基因型與體內(nèi)的病毒含量具有緊密聯(lián)系，而這一因素也有可能對慢性丙型肝炎患者治療情況以及預后情況產(chǎn)生影響。

綜上所述，根據(jù)本研究中獲得的標本分型結果分析可以得出，丙型肝炎患者抗-HCV水平與病毒基因型具有一定的相關性，但還需進行更多的研究對此結論進行證實。