姚 昕，涂 勇

(西昌學(xué)院農(nóng)業(yè)科學(xué)學(xué)院，四川 西昌 615013)

石榴(PunicagranatumL.)，為石榴科石榴屬植物，屬落葉灌木或小喬木，因其籽粒鮮艷，酸甜可口，營(yíng)養(yǎng)豐富，深受消費(fèi)者的喜歡。目前我國(guó)石榴栽植面積已躍居世界第一位，且四川攀西地區(qū)為最大的產(chǎn)區(qū)，石榴產(chǎn)業(yè)已成為攀西地區(qū)特色水果產(chǎn)業(yè)的重要支柱[1-2]。石榴貯藏期病害的發(fā)生是導(dǎo)致其果實(shí)腐爛的主要原因之一，且一些病害即使低溫貯藏亦不能明顯延緩其發(fā)生和危害，給石榴種植者和經(jīng)營(yíng)者帶來(lái)了較大的經(jīng)濟(jì)損失。一直以來(lái)化學(xué)殺菌劑因其高效、持效、經(jīng)濟(jì)且作用機(jī)理清楚等優(yōu)點(diǎn)普遍用于果蔬采后病害的控制，但伴隨著人們對(duì)食品安全問(wèn)題的日益關(guān)注，化學(xué)殺菌劑的使用不斷受到限制。本試驗(yàn)針對(duì)2種石榴貯藏期主要病害病原菌，測(cè)定前期篩選出7種食品防腐劑對(duì)其室內(nèi)毒力，并進(jìn)一步應(yīng)用于石榴果實(shí)貯藏期腐爛的控制，以期能優(yōu)選出高效、安全的保鮮劑，為石榴產(chǎn)業(yè)的良性發(fā)展提供一定的理論和實(shí)踐依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試石榴 品種為青皮軟籽，2019年8月20日采自四川省涼山州西昌市黃水鄉(xiāng)。挑選顏色均勻、無(wú)病蟲(chóng)害、無(wú)機(jī)械損傷的石榴果實(shí)。

1.1.2 供試菌株 干腐病病原菌石榴墊殼孢(Coniellagranati)和褐腐病病原菌小新殼梭孢(Neofusicoccumparvum)，實(shí)驗(yàn)室保藏。

1.1.3 供試試劑 脫氫乙酸鈉，對(duì)羥基苯甲酸乙酯，對(duì)羥基苯甲酸乙酯鈉，苯甲酸鈉，山梨酸鉀：食品級(jí)，湖北糖柜食品有限公司；ε-聚賴氨酸：食品級(jí)，鄭州拜納佛生物工程股份有限公司；肉桂醛：95%，上海展運(yùn)化工有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 室內(nèi)毒力測(cè)定 采用生長(zhǎng)速率法[3-4]，將供試7種食品防腐劑對(duì)石榴2種貯藏期病害病原菌進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。將7種食品防腐劑配制成含防腐劑的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)。先將7種食品防腐劑分別配制成濃度50mg/L、200mg/L、500mg/L、1000mg/L、1500mg/L、2000mg/L、5000mg/L和10000mg/L溶液。移取已配制好的溶液1mL于培養(yǎng)皿中，迅速倒入9mL 50℃左右的PDA培養(yǎng)基，趁熱混勻，冷卻，得到不同濃度含防腐劑的培養(yǎng)基，每個(gè)濃度3次重復(fù)，以無(wú)菌水為對(duì)照。將已活化好直徑約4mm的2種病原菌菌塊接于種培養(yǎng)基中央，置于25℃恒溫培養(yǎng)，5d后采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑(cm)，計(jì)算抑制率及毒力回歸方程，求出EC50和EC90，抑菌率的計(jì)算公式如下：

1.2.2 食品防腐劑對(duì)石榴果實(shí)的保鮮防腐效果 將篩選出來(lái)的2種抑菌效果較好的食品防腐劑按照各自的抑菌率為90%對(duì)應(yīng)的濃度進(jìn)行配制，對(duì)石榴果實(shí)浸泡3min，以清水為對(duì)照(CK)。每組設(shè)置3個(gè)平行處理，每箱50個(gè)果實(shí)。處理后自然晾干，0.01mmPE袋內(nèi)襯整箱包裝，常溫下貯藏。貯藏期間每5d統(tǒng)計(jì)各組石榴果實(shí)的腐爛率。腐爛率為腐爛果數(shù)在總果數(shù)中所占百分?jǐn)?shù)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)Excel 2003和SPSS.v.17.0軟件進(jìn)行處理和分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 7種食品防腐劑對(duì)石榴貯藏期主要病害病原菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

由表1知，7種食品防腐劑均對(duì)石榴墊殼孢和小新殼梭孢的菌絲生長(zhǎng)具有一定的抑制作用，且抑制效果差異較大。脫氫乙酸鈉的抑制效果最好，對(duì)2種病原菌毒力均最強(qiáng)，其EC50分別為16.5143mg/L和14.4868mg/L，EC90分別為296.9825和173.5392，平均EC50和EC90分別僅為15.5006mg/L和235.2609mg/L；其次為ε-聚賴氨酸，對(duì)2種病原菌的平均EC50和EC90分別為39.4516mg/L和375.9341mg/L；再次為對(duì)羥基苯甲酸乙酯鈉和對(duì)羥基苯甲酸乙酯，二者抑菌效果差異不大；山梨酸鉀和苯甲酸鈉對(duì)2種致病菌的抑制作用最弱，其平均EC50分別達(dá)到291.1787mg/L和305.5767mg/L，平均EC90亦分別高達(dá)1526.4834mg/L和1510.1008mg/L。

表1 7種防腐劑對(duì)石榴貯藏期主要病害病原菌室內(nèi)毒力測(cè)定

2.2 2種防腐劑對(duì)石榴保鮮防腐的效果

將2種優(yōu)選出來(lái)的食品防腐劑對(duì)石榴果實(shí)進(jìn)行浸果處理，貯藏過(guò)程中其腐爛率的變化情況見(jiàn)表2。由表2可知，2種防腐劑均對(duì)石榴果實(shí)的腐爛具有一定的抑制作用，且在貯藏后期效果尤為明顯。貯藏25d時(shí)，脫氫乙酸鈉處理組石榴果實(shí)腐爛率最低，僅為23.21%，ε-聚賴氨酸處理組為28.98%，2個(gè)處理組之間差異不顯著(P﹥0.05)，而此時(shí)對(duì)照組(CK)腐爛率已高達(dá)48.89%，且與2個(gè)處理組差異顯著(P﹤0.05)。

表2 2種防腐劑處理石榴果實(shí)貯藏期腐爛率(%)的變化

注：用Duncan法進(jìn)行多重比較，同列中標(biāo)有不同小寫(xiě)字母者表示組間差異顯著(P<0.05)。

3 結(jié)論與討論

石榴貯藏期病害防治試驗(yàn)結(jié)果表明，脫氫乙酸鈉和ε-聚賴氨酸能有效地抑制石榴貯藏期2種主要病害病原菌菌絲的生長(zhǎng)，從而對(duì)果實(shí)貯藏期的腐爛能起到較好地控制作用。張潤(rùn)光等[5]研究發(fā)現(xiàn)，由殼寡糖、那他霉素、葡萄糖酸-δ-內(nèi)酯、檸檬酸、抗壞血酸、六偏磷酸鈉和酪蛋白酸鈉7種組分配制而成的復(fù)合保鮮劑能抑制富氏葡萄核盤(pán)菌(Botryotiniafuckeliana)和青霉屬的小刺青霉(Penicilliumspinulosum)，1.0±0.5℃、相對(duì)濕度90%～95%條件下貯藏期可達(dá)160d，腐爛指數(shù)為0.16，商品果率為90.2%。高元媛等[6]研究發(fā)現(xiàn)，40%氟硅唑乳油對(duì)引起石榴褐斑病的病原菌—石榴假尾孢菌(Pseudocercosporapunicae)菌絲生長(zhǎng)具有較強(qiáng)的抑制作用。石榴貯藏期病害的發(fā)生是導(dǎo)致石榴果實(shí)腐爛的主要原因之一，新型保鮮劑在石榴上的應(yīng)用效果及其安全性近年來(lái)少有報(bào)道，需要進(jìn)一步研究不同保鮮劑對(duì)多種病原菌的綜合防效，以期篩選出高效、安全的石榴貯藏期病害防治方法。