■文 敏 孫弟芬 黃 巧 孔 潔 潘舒蕾 葉臍濂 張 鵬 舒 剛

（四川農業(yè)大學動物醫(yī)學院，四川成都611130）

鵪鶉產業(yè)是世界第三大養(yǎng)禽業(yè)，近年來在我國迅速發(fā)展[1-2]。鵪鶉的產蛋能力強，但產蛋高峰后，鵪鶉產蛋率雖可保持在80%左右，但死淘率和料蛋比增加，鵪鶉蛋破損率高。第11個產蛋月后不僅產蛋率下降、次蛋率的比例明顯升高（有時可達20%），而且種鵪鶉的受精率、受精蛋的孵化率和健雛率均明顯下降，嚴重影響了飼養(yǎng)期間的經濟效益[3]。因此，改善老年鵪鶉的產蛋性能，提高鵪鶉的蛋品質，成為提高經濟效益的一種有利的方式。中藥添加劑具有天然活性、毒副作用小和無抗藥性等優(yōu)點，不僅能提高動物的生產性能, 而且能改善其產品品質。因此，關于中藥添加劑作為抗生素替代品的研究已受到越來越多研究者的關注[4]。中藥口服液是當前中藥生產中新興的中藥添加劑，由中藥湯劑為基礎發(fā)展而來的熱門劑型，具有起效快，作用明顯，方便攜帶，便于保存等優(yōu)點[5]。

試驗以益母草、黃精和丹參三味中藥制備益母黃丹口服液，并通過在鵪鶉產蛋后期飲水中添加不同劑量的益母黃丹口服液，研究其對鵪鶉產蛋后期的產蛋性能、蛋品質和蛋黃膽固醇的影響，為益母黃丹口服液作為復方中藥添加劑在生產中的應用提供試驗依據。

1 材料方法

1.1 試驗材料

益母黃丹口服液（益母草∶黃精∶丹參=3∶2∶1，相當于生藥濃度1 g/ml，自制）；歸芪益母口服液（購自某公司，批號20190521）；益母草、黃精、丹參（均購自四川省成都市金牛區(qū)荷花池中藥材專業(yè)市場，由四川農業(yè)大學藥學系鑒定為正品藥材）。

UV1100 型紫外可見分光光度計(上海天美科學儀器有限公司)、XC-110A型超聲波清洗器（濟寧鑫欣超聲電子設備有限公司）、PWC184電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）、恒溫水浴鍋（余姚市亞星儀器儀表有限公司）、BP211S 型電子分析天平(北京Sartorius 天平有限公司)、離心機（上海賽默生物科技發(fā)展有限公司）。

1.2 益母黃丹口服液的制備

將益母草、黃精、丹參三味藥材按照比例共計6 kg放置于敞口鍋中，加一定量的蒸餾水浸泡30 min后，進行煎煮3次，每次30 min，趁熱用8層紗布濾過，合并濾液并濃縮，將濃縮后的藥液放涼后，加入乙醇后，含乙醇量達到50%。將通過醇沉后的藥液攪拌均勻后靜置于4 ℃冰箱24 h，隨后置于離心機以3 000 r/min離心10 min，取出上層濾液，棄去殘渣。加一定量蒸餾水置于濾液中，使藥液中原生藥含量達到1 g/ml，共得6 L。向藥液中加入2.4 g 的苯甲酸鈉和2.4 g 苯甲酸，攪拌均勻，用0.2%NaOH 調pH值，使藥液pH值在5～7之間；將所制藥液進行分裝，滅菌即可[6]。

1.3 試驗動物及試驗設計

試驗選取640只狀態(tài)良好、體重均勻的10月齡老年黃羽產蛋鵪鶉（四川省成都市邛崍市羊安鎮(zhèn)鵪鶉養(yǎng)殖場提供），隨機分為4個組，每組4個重復，每個重復40 只。Ⅰ組為空白對照組，飲用自來水；Ⅱ組為低劑量組，在飲水中按照每只3 ml/l 劑量添加益母黃丹口服液；Ⅲ組為高劑量組，在飲用水中按照每只鵪鶉6 ml/l劑量添加益母黃丹口服液；Ⅳ組為陽性組，在飲用水中按照每只鵪鶉4 ml/l 劑量添加歸芪益母口服液，試驗為期14 d。記錄鵪鶉的采食量和產蛋量，并在第14 d每組隨機采集12枚鵪鶉蛋，每個重復3枚測定蛋品質。

1.4 試驗日糧

基礎日糧的組成和營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平（以風干計）

1.5 飼養(yǎng)管理

試驗鵪鶉養(yǎng)殖舍內采用自然通風加風機抽風換氣。飼養(yǎng)方式采用4層疊層式籠養(yǎng)，每組對應重復在同一高度水平，每籠飼喂40 只鵪鶉。白天為自然光照，早晚輔以紅光人工照明，按常規(guī)清掃和消毒鵪鶉舍。鵪鶉自由采食飼料、自由飲水（乳頭式飲水器供水），每日8：00和17：00飼喂，9：00撿蛋，保持安靜，盡量防止應激而導致鵪鶉驚群，其他按正常飼養(yǎng)管理進行。

1.6 測定指標及方法

1.6.1 產蛋性能測定

試驗期間準確記錄每個重復的采食量、產蛋數、破蛋數、軟殼蛋數及沙殼蛋數，準確稱量各組蛋的重量，計算平均蛋重、產蛋率、平均日采食量及料蛋比。

平均蛋重（g）=總蛋重/總蛋數

產蛋率(%)=[總產蛋數/(鵪鶉數×試驗期天數)]×100

平均日采食量（g）=（每籠飼喂量-剩余料量）/鵪鶉只數

料蛋比=平均采食量/平均蛋重

1.6.2 蛋品質指標測定

在試驗第14 d，每重復隨機選取3 枚，每組共12 枚。使用國家標準測定方法測定蛋殼強度、蛋白高度和蛋黃色度。計算蛋形指數、哈氏單位、蛋殼率和蛋黃率。

蛋形指數=雞蛋縱徑/橫徑

哈氏單位=100×lg(H-1.7W0.37+7.57)

式中：H——濃蛋白高度（mm）；

W——每枚蛋重（g）。

蛋殼率(%)=蛋殼重/蛋重×100

蛋黃率(%)=蛋黃重/蛋重×100

1.6.3 蛋黃膽固醇含量測定

隨機選取每重復3枚蛋，使用硫酸鐵銨法測定蛋黃重的膽固醇含量。具體操作如下：準確稱取充分混勻的蛋黃約0.10 g 于15 ml 離心管中，加入2.0 mol/l的KOH-乙醇溶液2.5 ml，振蕩混勻，置于65 ℃水浴中皂化30 min (每隔5 min 振蕩1 次)后取出，經流水冷卻，加入飽和氯化鈉溶液1.0 ml 后再加人石油醚10.0 ml，漩渦混勻后離心分離，吸取上清液1.0 ml 于15 ml 具塞比色管中，再于65 ℃水浴中氨氣吹干，加入2.0 ml 冰醋酸溶解殘渣，加1.0 ml 硫酸鐵銨顯色劑，混勻，10 min 后在分光光度計560 nm波長處比色測定。按測得的吸光度在標準曲線上查得相應的膽固醇含量。以吸光度A 對其質量m（mg）得膽固醇標準曲線為：A=6.13m+0.003，r=0.999 3。根據m=[(A-0.003)/6.13]計算出每組中的蛋黃膽固醇含量[7]。

1.7 數據分析

試驗數據利用SPSS20.0 進行方差分析，Duncan's法進行多重比較顯著性水平，P＜0.05 為差異顯著，結果用“平均值±標準誤”表示。

2 結果與分析

2.1 益母黃丹口服液對鵪鶉日常行為的影響

試驗過程中空白組有一只鵪鶉死亡，死亡率為0.63%（見表2），其余組鵪鶉未出現死亡或食欲不振、精神萎靡等異常情況，采食和飲水、產蛋、糞便情況正常。

2.2 益母黃丹口服液對鵪鶉產蛋性能的影響(見表2)

由表2 可知，與空白組相比，低劑量組、高劑量組、陽性對照組的平均蛋重、產蛋率和平均采食量均有所提高，平均蛋重分別提高11.69%、10.75%、7.96%，且差異顯著（P＜0.05）；產蛋率分別提高9.39%、12.34%、8.27%，均差異顯著（P＜0.05）；平均采食量分別提高6.01%、7.02%、8.19%，均差異顯著（P＜0.05）；低劑量組、高劑量、陽性對照組間的平均蛋重、產蛋率和平均采食量差異不顯著（P＞0.05）；與空白組相比，各組沙殼蛋數、破蛋數差異均不顯著（P＞0.05），但各試驗組優(yōu)于空白組。以上結果表明益母黃丹口服液與歸芪益母口服液都能提高鵪鶉產蛋性能。

2.3 益母黃丹口服液對鵪鶉蛋品質的影響(見表3)

表3 益母黃丹口服液對蛋品質的影響

由表3可知，與空白組相比，低、高劑量組和陽性組的蛋殼強度增強且差異顯著（P＜0.05）；與空白組相比，高劑量組和陽性對照組的蛋殼厚度增厚，差異顯著（P＜0.05），低劑量組稍有增加但不顯著。與空白組相比，低劑量組和陽性對照組的蛋殼率有所增加，分別提高15.58%、10.65%，且差異顯著（P＜0.05），但高劑量組與空白對照組間差異不顯著（P＞0.05）。與空白組對比，各組蛋黃率差異不顯著（P＞0.05），但低劑量組平均蛋黃率較空白組蛋黃率提高了20.50%。與空白組相比，陽性對照組的蛋黃色度提高了15.63%，且差異顯著（P＜0.05），低、高劑量組雖差異不顯著，但蛋黃色度有所上升。與空白組相比，各組蛋形指數、哈氏單位均差異不顯著（P＞0.05）。與空白對照組相比，低劑量組、高劑量組、陽性對照組的蛋黃膽固醇含量均顯著降低（P＜0.05），分別降低了18.05%、41.66%、43.93%。

3 討論

3.1 益母黃丹口服液對鵪鶉產蛋性能的影響

鵪鶉產蛋數量的多少直接決定了經濟效益的高低，鵪鶉的生產性能提高則會直接增加經濟效益。試驗結果表明，在鵪鶉飲水中添加0.3 ml/l和0.6 ml/l劑量的益母黃丹口服液均能提高鵪鶉蛋蛋重、產蛋率。其中0.3 ml/l 劑量對蛋重的提升效果更顯著，0.6 ml/l劑量對產蛋率的提升效果更為顯著，但對減少軟蛋、沙殼蛋、破蛋的作用不明顯。張雪等[8]指出益母草中主要活性物質與活血化瘀相關，其藥理作用與改變血液流變學，改善微循環(huán)和心肌缺血以及抗血栓等有關。益母草堿有利于新陳代謝與畜禽增重，對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌具有明顯抑制作用，減少腸道感染，使營養(yǎng)物質更易吸收[9]。劉培培等[10]證實，產蛋雞日糧中添加益母草提取物可以顯著提高產蛋率、降低料蛋比。韋陽朔等[11]的研究表明益母草復合添加劑在三黃種雞養(yǎng)殖中應用能夠很好地提升產蛋率、降低死亡淘汰數量，顯著提高養(yǎng)殖效益。劉家國等[12]研究表明，以調整氣血為主要藥理作用的中藥組方能夠提高血液運氧能力，從而提高蛋雞的生產性能。有研究表明在飼料中添加19.5%丹參可以使雞、鴨產蛋率提高10%～15%[13]。本試驗結果與上述研究一致。益母黃丹口服液中的益母草可能通過促進子宮和卵巢的發(fā)育，增加成熟卵泡和疏通輸卵管內淤血，興奮下丘腦垂體性腺軸，促進性腺激素分泌，從而改善鵪鶉的生產性能的。益母草中含有鋅、銅、錳、鐵等多種微量元素，這些物質還能夠補充動物的生理需求，進一步提高動物的生產性能。黃精中主要含有黃精多糖，黃精具有調節(jié)氣血，增強機體的抵抗力等生理功能，調節(jié)激素的分泌和代謝，影響神經內分泌系統(tǒng)，也可以提供鵪鶉的生產性能。丹參能夠對畜禽機體起到活血化瘀，改善畜禽機體的血液微循環(huán)的作用[14]。丹參含有多種有效成分，具有活血化瘀、通經止痛，可以促進血液循環(huán)，消除炎癥等作用，使鵪鶉機能改善從而提高生產性能?？诜褐幸婺覆?、黃精和丹參配伍發(fā)揮活血化瘀和補益氣血等作用使鵪鶉生理機能得到提高，促使其產蛋性能增加。

3.2 益母黃丹口服液對鵪鶉蛋品質的影響

蛋品質的優(yōu)劣與鵪鶉蛋的經濟效益息息相關，蛋殼強度是評價蛋殼質量的重要指標之一，蛋殼強度提高能降低雞蛋保存與運輸過程中的經濟損失。蛋制品因營養(yǎng)物質豐富受到消費者的喜愛，所以蛋品質的提高會帶來更多的經濟效益。隨著產蛋家禽日齡的增加，家禽自身的消化代謝水平逐漸降低，影響其對鈣的吸收代謝，從而導致蛋殼質量下降，蛋殼變薄。益母草、黃精等中藥中含有多種能促進營養(yǎng)的吸收和消化的生物活性物質，可以促進鵪鶉對飼料中的營養(yǎng)物質的吸收和代謝[15]。芪草提取物使蛋殼質量顯著提高，可能是因為黃芪、益母草改善了機體的鈣磷代謝，使蛋殼中鈣含量增加，提高了蛋殼強度和蛋殼厚度，進而改善了蛋品質[16]。劉培培等[10]證實益母草因含有黃酮類物質影響禽類對鈣、磷的代謝，從而增強蛋殼強度，增厚蛋殼厚度，蛋殼率得到提高，進而改善了蛋品質。鵪鶉蛋蛋殼強度增強和蛋殼厚度的增加另一方面可能是由于益母黃丹口服液中含有豐富的糖類、氨基酸、微量元素、維生素等營養(yǎng)物質有關[17]。本試驗在鵪鶉飲水中添加3 ml/l和6 ml/l劑量的益母黃丹口服液能增加蛋殼厚度和蛋殼強度，其中6 ml/l 劑量的效果更佳。

蛋黃顏色是色素在卵形成的過程中沉積到蛋黃中的, 雞自身不能合成色素，多從飼料中攝取。在本試驗中，與空白對照組相比，高劑量組的蛋黃色度顯著升高（P＜0.05），但其他組與其相比差異不顯著。李霞輝等[18]研究發(fā)現添加0.4%黃精多糖鵪鶉蛋的蛋黃色度明顯提高。本試驗在飲水中添加黃精后，高劑量組的蛋黃色度明顯改善，與孫曉蛟等[19]、劉培培等[10]的研究結果一致?？赡苁怯捎诟邉┝拷M的益母黃丹口服液促進了鵪鶉對飼料中的色素的攝取。哈氏單位是蛋白質量的計量單位，蛋越新鮮，哈氏單位的數值就越高。本試驗添加益母黃丹口服液后哈氏單位無顯著變化，可能是試驗期時長不夠導致的。蛋形指數與鵪鶉本身有關，因此本試驗添加益母黃丹口服液后, 蛋形指數并無顯著改變。綜合分析試驗結果中蛋品質各項指標可得，益母黃丹口服液對提升鵪鶉蛋的蛋品質有一定作用。

蛋黃富含豐富的營養(yǎng)物質，但其中還含有可引起心血管疾病的膽固醇。因此，研究低膽固醇蛋制品具有一定的必要性。雞、鵪鶉、鴨三種禽蛋中蛋黃膽固醇含量均顯著高于蛋清，蛋黃是蛋制品膽固醇含量最高的部分[20]。徐國銀[21]在蛋雞飼糧中添加大豆黃酮，顯著降低了雞蛋的蛋黃膽固醇含量，并且時間越久作用效果越明顯。劉培培等[10]在蛋雞飼糧中加入益母草等提取物，結果發(fā)現血清中的膽固醇、甘油三酯(TG)含量顯著降低。陳楊超等[22]研究表明益母草和女貞子超微粉能顯著提高產蛋后期蛋雞的生產性能并改善其蛋品質。金娜等[16]研究發(fā)現在蛋雞的飼糧中加入芪草提取物后，隨著試驗時間的延長，蛋黃膽固醇含量逐漸降低，在第12 周時顯著下降。黃精是良好的降血脂和膽固醇的中藥，很早以前就有人類臨床試驗證明其功效[23]。丹參的提取物，對調節(jié)膽固醇代謝十分重要，它可抑制內源性膽固醇的合成和增加膽固醇轉化為膽汁酸[24]。益母草中富含生物堿活性物質，可以和膽固醇部分結合，減少了腸道對膽固醇的吸收，從而降低了膽固醇的含量[25]。本試驗結果與前人研究基本一致，益母黃丹口服液顯著降低了鵪鶉蛋黃膽固醇的含量，主要原因可能是益母草、黃精和丹參的配伍減少了外源性膽固醇的吸收，抑制內源性膽固醇的合成，增多了膽固醇轉化為膽汁酸的活性物質。

4 結論

本次試驗結果表明在產蛋后期鵪鶉的飲水中添加益母黃丹口服液，可以改善鵪鶉的產蛋性能，提高蛋品質，降低蛋黃膽固醇含量。同時，從經濟角度出發(fā)，飲水中添加3 ml/l的劑量可取得較好效果。