康丹丹，任德利

（重慶郵電大學(xué)移通學(xué)院，重慶 401520）

香菇（Lentinus edodes）有“山珍之王”的美稱，是一種著名的藥食同源食用真菌，不僅作為食品深受人們喜愛(ài)，還具有珍貴的藥用價(jià)值[1]。從香菇子實(shí)體中分離得到的香菇多糖為高分子葡聚糖，以β-（1，3）-D-葡萄糖為主鏈，具有多種生物活性，如抗病毒、抗炎、抗氧化、降血壓、降血脂等，因此受到越來(lái)越多的關(guān)注，以香菇多糖為主要成分的制劑、膠囊等也已在臨床上廣泛應(yīng)用[2]。

關(guān)于香菇多糖的抗疲勞作用已出現(xiàn)于文獻(xiàn)報(bào)道，胡蘇林等[3]研究顯示，高劑量香菇多糖能夠增強(qiáng)小鼠的抗疲勞和耐缺氧能力（P＜0.05）。疲勞的最主要表現(xiàn)就是運(yùn)動(dòng)耐力的下降，提高運(yùn)動(dòng)耐力即增強(qiáng)抗疲勞的能力。研究香菇多糖對(duì)提高小鼠運(yùn)動(dòng)耐力的作用，為相關(guān)功能產(chǎn)品的研發(fā)和應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

動(dòng)物：雄性健康昆明小鼠40只，由山東省天然藥物研究中心提供，SPF級(jí)，8周齡，體重20 g～22 g，飼養(yǎng)溫度18℃～22℃、相對(duì)濕度50%～55%。小鼠喂養(yǎng)一段時(shí)間，經(jīng)過(guò)初篩，身體狀況基本一致的用于試驗(yàn)。

試劑：香菇子實(shí)體，上海農(nóng)科院食用菌研究所提供。

血乳酸（BLA）試劑盒、血清尿素氮（BUN）試劑盒、肝糖原（HG）試劑盒、肌糖原（MG）試劑盒，由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 儀器與設(shè)備

超聲波清洗機(jī)，寧波新芝生物科技有限責(zé)任公司；TGL-16A高速臺(tái)式離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；DKZW電熱恒溫水浴鍋，鄭州南北儀器設(shè)備有限公司；FA1204T分析天平，廈門(mén)雄發(fā)儀器儀表有限公司；JD-XSC型小鼠恒溫游泳池，上海繼德教學(xué)實(shí)驗(yàn)器械廠；752型紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)，上海光譜儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 香菇多糖的提取

稱取新鮮香菇子實(shí)體4 kg，采用微波預(yù)處理-超聲波提取法對(duì)香菇子實(shí)體進(jìn)行粗提取，微波功率為800 W，溫度為70℃，處理120 s；超聲功率為300 W，超聲時(shí)間25 min，料液比1∶30。離子交換樹(shù)脂法去除色素和蛋白質(zhì)，以乙醇分級(jí)沉淀，對(duì)香菇多糖進(jìn)一步純化[4-6]。

1.3.2 分組與給藥

將40只小鼠按體重隨機(jī)分為對(duì)照組和低劑量、中劑量、高劑量試驗(yàn)組，每組10只。對(duì)照組以生理鹽水灌胃，試驗(yàn)組以香菇多糖溶液灌胃，劑量分別為 20 mg·kg-1d-1、60 mg·kg-1d-1、180 mg·kg-1d-1，連續(xù)灌胃14 d。

1.3.3 力竭游泳試驗(yàn)

末次灌胃30 min后，在各組小鼠的尾部系上1 g錫條，放入恒溫游泳池中進(jìn)行力竭游泳試驗(yàn)。游泳池長(zhǎng)50 cm，水深30 cm，水溫（25±1.0）℃。從進(jìn)入泳池開(kāi)始計(jì)時(shí)，人工驅(qū)趕小鼠不停游泳，至小鼠頭部沉入水中7 s不浮出水面計(jì)時(shí)結(jié)束，記錄每只小鼠的游泳力竭時(shí)間[7]。

1.3.4 血清乳酸、尿素氮含量的測(cè)定

力竭游泳試驗(yàn)后，將小鼠眼球取血，在4℃下3 000 r·min-1離心10 min，取上清液，按試劑盒說(shuō)明并結(jié)合紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)法分別測(cè)定血清乳酸、尿素氮含量。

1.3.5 肝糖原、肌糖原含量的測(cè)定

同時(shí)分離趾長(zhǎng)伸肌和肝臟，經(jīng)0.9%氯化鈉注射液漂洗后，用濾紙吸干，迅速稱重，按試劑盒說(shuō)明并結(jié)合紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法分別測(cè)定肝糖原、肌糖原含量[8]。

1.3.6 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 16.0軟件處理數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)結(jié)果均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間差異分析采用t檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)差異顯著。

2 結(jié)果分析

2.1 香菇多糖對(duì)小鼠力竭時(shí)間的影響

香菇多糖對(duì)小鼠力竭時(shí)間的影響見(jiàn)表1。

表1 香菇多糖對(duì)小鼠力竭時(shí)間的影響Tab.1 Effect of Lentinus edodes polysaccharide on the time of exhaustion in mice

根據(jù)表1可知，試驗(yàn)組小鼠的力竭時(shí)間均比對(duì)照組有所延長(zhǎng)，且與香菇多糖的劑量呈正相關(guān)。低劑量組小鼠的力竭時(shí)間為（167.67±1.15）min，延長(zhǎng)作用不明顯，高劑量試驗(yàn)組小鼠的力竭時(shí)間最長(zhǎng)，為 （248.66±2.25）min，延長(zhǎng)率為 79.8% （P＜0.05）。結(jié)果表明，香菇多糖能夠延長(zhǎng)小鼠游泳力竭時(shí)間，對(duì)運(yùn)動(dòng)耐力的提高有一定作用。

2.2 香菇多糖對(duì)血清生化指標(biāo)的影響

香菇多糖對(duì)血清生化指標(biāo)的影響見(jiàn)表2。

表2 香菇多糖對(duì)血清生化指標(biāo)的影響Tab.2 Effect of Lentinus edodes polysaccharide on serum biochemical indicators

根據(jù)表2可知，灌胃香菇多糖的3個(gè)試驗(yàn)組小鼠與對(duì)照組相比，血乳酸和血清尿素氮含量均降低，且差異顯著（P＜0.05）。乳酸含量與香菇多糖的劑量呈負(fù)相關(guān)，低劑量、中劑量、高劑量組的乳酸含量分別下降至 （4.45± 0.15）mmol·L-1、（4.04± 0.17）mmol·L-1、（3.29 ±0.36）mmol·L-1，說(shuō)明香菇多糖能夠有效降低血乳酸含量；血清尿素氮的含量隨香菇多糖劑量的增加而下降，低劑量、中劑量、高劑量組的血清尿素氮含量分別為（5.11±1.67）mmol·L-1、（5.02 ± 1.75）mmol·L-1、（4.89 ± 0.82）mmol·L-1，說(shuō)明香菇多糖能夠使血清尿素氮的含量下降。

2.3 香菇多糖對(duì)肝糖原、肌糖原含量的影響

香菇多糖對(duì)肝糖原、肌糖原含量的影響見(jiàn)表3。

表3 香菇多糖對(duì)肝糖原和肌糖原含量的影響Tab.3 Effect of mushroom polysaccharide on the content of liver glycogen and muscle glycogen

根據(jù)表3可知，與對(duì)照組相比，3個(gè)試驗(yàn)組小鼠的肝糖原和肌糖原含量均增加，且與香菇多糖的劑量呈正相關(guān)，差異顯著（P＜0.05），其中高劑量試驗(yàn)組的肝糖原和肌糖原含量增加最為明顯，分別為（19.91±1.08）mg·g-1和 （1.83±0.94）mg·g-1。結(jié)果說(shuō)明，香菇多糖能夠提高肝糖原和肌糖原的含量，增加其儲(chǔ)備。

3 結(jié)論

提高運(yùn)動(dòng)耐力就是延緩疲勞的產(chǎn)生或加速疲勞的消除，而疲勞發(fā)生的機(jī)制有能量代謝、物質(zhì)代謝、內(nèi)分泌調(diào)節(jié)機(jī)制、氧自由基損傷等，血乳酸、血清尿素氮、肝糖原、肌糖原的含量指標(biāo)與機(jī)體疲勞密切相關(guān)[9]。測(cè)定運(yùn)動(dòng)耐力的方法有爬桿、游泳和運(yùn)動(dòng)跑臺(tái)，游泳試驗(yàn)是最為常用的一種方法，力竭游泳時(shí)間可以直觀地反映運(yùn)動(dòng)耐力[10]。試驗(yàn)中灌胃香菇多糖的小鼠游泳時(shí)間明顯比對(duì)照組長(zhǎng)，且高劑量試驗(yàn)組的時(shí)間最長(zhǎng)，與低劑量組相比有顯著差異。由此可見(jiàn)，香菇多糖可以增加小鼠的力竭游泳時(shí)間，提高運(yùn)動(dòng)耐力。

疲勞的程度可以用血乳酸水平來(lái)表示[11]。減少乳酸的產(chǎn)生或加快乳酸的清除可以有效緩解疲勞，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)耐力。在本試驗(yàn)中，低劑量、中劑量、高劑量組的血乳酸含量均低于對(duì)照組，該結(jié)果表明，香菇多糖能減少運(yùn)動(dòng)后乳酸的積累，減輕機(jī)體疲勞程度。

血清尿素氮含量可以反映體內(nèi)蛋白質(zhì)分解和合成代謝的情況[8]。血清尿素氮含量越低，說(shuō)明含氮物質(zhì)的分解越少[12]。試驗(yàn)中，低劑量、中劑量、高劑量試驗(yàn)組小鼠血清尿素氮含量均低于對(duì)照組，說(shuō)明香菇多糖能夠加快尿素氮的清除，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)負(fù)荷的適應(yīng)能力，緩解疲勞程度。

肌糖原分解成葡萄糖后不能直接被利用，需要經(jīng)過(guò)丙氨酸-葡萄糖循環(huán)途徑，在肝臟中生成葡萄糖進(jìn)入血液，為機(jī)體供能，而肝糖原分解后，葡萄糖則直接進(jìn)入血液[12]。糖原的儲(chǔ)備與運(yùn)動(dòng)耐力呈正相關(guān)。試驗(yàn)中，灌胃香菇多糖的試驗(yàn)組小鼠的肝糖原和肌糖原含量與對(duì)照組相比有明顯升高，其中以高劑量試驗(yàn)組效果最為明顯，該結(jié)果表明香菇多糖有助于運(yùn)動(dòng)后肝糖原和肌糖原水平的恢復(fù)，增加其儲(chǔ)備，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)耐力。

綜上所述，補(bǔ)充香菇多糖可以增加小鼠力竭游泳的時(shí)間，使血乳酸和血清尿素氮的含量降低，并且增加肝糖原和肌糖原的含量。香菇多糖通過(guò)加快乳酸、尿素氮的清除，增加肝糖原、肌糖原的儲(chǔ)備，參與體內(nèi)代謝活動(dòng)，調(diào)節(jié)內(nèi)環(huán)境，進(jìn)而增強(qiáng)抗疲勞能力，提高運(yùn)動(dòng)耐力。