韓修文，孫玲 萬志兵，胡凌峰，付琳玉

（安徽黃山學(xué)院生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，黃山 245041）

珠 蘭（Chloranthus spicatus（Thunb.）Makino），又名金粟蘭，系金粟蘭科金粟蘭屬，在我國多分布于云南、四川、貴州等區(qū)域，主要生于山坡、溝谷密林下，海拔150～990 m，但野生珠蘭較為少見，現(xiàn)各地多為栽培[1]。珠蘭可用于提取珠蘭油和浸提珠蘭浸膏等香料[2]，也是傳統(tǒng)的傣藥植物[3]，全株可入藥，具跌打損傷、消腫鎮(zhèn)痛、瘡癤腫毒等功效[4]，珠蘭也可被作為茶用經(jīng)濟(jì)植物，其熏制的珠蘭花茶暢銷國內(nèi)外，是中國四大著名茶花之一[5]。隨著各地的栽培范圍的增加，其生物資源價(jià)值逐漸得到開發(fā)利用。

農(nóng)林間作是中國最重要的混農(nóng)林業(yè)形式之一，并且中國農(nóng)林間作的規(guī)模和模式都處于世界領(lǐng)先地位[6]，農(nóng)林間作復(fù)合生態(tài)系統(tǒng)對(duì)于生態(tài)系統(tǒng)的調(diào)控以及農(nóng)林業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具重要作用[7]，物種間化感作用對(duì)于群落的組成和分布具有一定影響，在間作中不同物種間通過化感作用可提高產(chǎn)量或抑制雜草生長等[8]?；凶饔眉粗参锿ㄟ^揮發(fā)、雨霧淋溶、根的分泌、植物組織腐敗后釋放物[9]等方式向環(huán)境中釋放次化感物質(zhì)從而對(duì)一定生長范圍內(nèi)其他植物體生長產(chǎn)生直接或間接影響[10-11]，其作用程度受土壤、氣候、水分、病蟲害、化感物質(zhì)及數(shù)量等影響[12]?；形镔|(zhì)可分為14 類[13]，主要包括酚類、萜類、含氮化合物、聚乙炔及香豆素等次生物質(zhì)，隨研究深入相繼發(fā)現(xiàn)了倍半烯內(nèi)酯、樹脂糖苷等復(fù)合結(jié)構(gòu)物質(zhì)[9]?；凶饔每梢酝ㄟ^影響植物種子萌發(fā)、幼苗生長、成株的開花與結(jié)實(shí)等影響周圍植物生長情況[14]，并在一定程度上影響群落組成，森林更新及演替過程[15]。許多物種間都存在不同程度的化感作用，如喜旱蓮子草、白車軸草和小飛蓬葉片水浸液各濃度梯度抑制小麥種子萌發(fā)[16]，新銀合歡水提液對(duì)白灰毛豆幼苗生長均表現(xiàn)為隨濃度升高而增強(qiáng)的抑制作用[17]，沙芥水不同部位浸提液對(duì)白菜種子萌發(fā)和幼苗生長均有抑制作用且隨提取液濃度升高抑制作用增強(qiáng)[18]；低濃度的三七水提液可以促進(jìn)玉米種子萌發(fā)和幼苗生長，三七與耐受性較強(qiáng)的玉米間作可提高玉米產(chǎn)量[11]；在小麥與大豆間套種植時(shí)，由于化感作用存在使其根系還原力提高30%左右，吸磷能力也顯著提高[12]。根據(jù)不同物種間的化感作用來進(jìn)行合理間作配置，是農(nóng)林間作的一項(xiàng)重要舉措[10]。

目前國內(nèi)對(duì)珠蘭花的研究主要為其茶用價(jià)值，藥用價(jià)值及栽培技術(shù)，關(guān)于珠蘭化感作用相關(guān)研究較少，但對(duì)其同科植物研究表明，使用多種柱色譜技術(shù)從金粟蘭科金粟蘭屬狹葉金粟蘭地上部分甲醇提取物的醋酸乙酯萃取部位分離得到8 個(gè)化合物，分別鑒定為1-乙酰氧基2，3，4，5-四羥基-5-對(duì)甲氧基苯基戊烷（1）、（E）-5-（4-甲氧基苯基）-4-烯-1，2，3-三羥基戊醇（2）、異嗪皮啶（3）、（-）-二氫脫氫二松柏醇（4）、（±）-赤式-愈創(chuàng)木酚基甘油-4'-二氫松柏醇醚（5）、（-）-rosiridol（6）、（4S）-對(duì)薄荷烯4，7-二醇（7）、地芰普內(nèi)酯（8）[19]；陳超、曾慧婷等[20]對(duì)幾種金粟蘭屬植物進(jìn)行了較為系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，從中共分離鑒定了上百個(gè)化合物，其中近半數(shù)為新化合物且多為倍半萜和二萜類成分，這些結(jié)果對(duì)于珠蘭花化感研究有一定的參考，通過間作合理配置可利用植物間化感作用提高珠蘭產(chǎn)量，且珠蘭喜溫暖潮濕忌烈日直曬，通過與其他植物間作也可提高春冬季林內(nèi)生境溫度減少凍害，夏季其他植物可起遮陰作用避免珠蘭受陽光直射。實(shí)驗(yàn)主要通過珠蘭鮮葉不同溶劑及濃度梯度提取液對(duì)白菜種子萌發(fā)及幼苗生長情況的影響，探究珠蘭鮮葉中化感物質(zhì)的化感效應(yīng)，為珠蘭生物資源開發(fā)利用和農(nóng)林間作合理配置提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

2018 年6 月于黃山市珠蘭花培育基地采集珠蘭花鮮葉，清洗晾干后置于冰箱備用。實(shí)驗(yàn)種子為上海青，由杭州科豐種子有限公司生產(chǎn)，其純度96%，凈度98%，含水量≤7%，發(fā)芽率≥85%，選取健康種子于1%次氯酸鈉溶液中消毒30 min，再用蒸餾水沖洗3 次備用。實(shí)驗(yàn)所用甲醇、乙醚、乙酸乙酯均為分析純。

所用儀器主要有電子天平（感量0.000 1 g）、游標(biāo)卡尺（精確度為0.1 mm）、分液漏斗、移液槍、光照培養(yǎng)箱、烘箱、去離子水裝置等。

1.2 方法

參考朱成磊[21]的實(shí)驗(yàn)方法并做一定修改，將洗凈晾干的珠蘭鮮葉（70 g）放進(jìn)缽體研磨，用400 mL 80%甲醇溶液浸24 h 后收集上清液保存，在濾渣中加入400 mL 乙醚溶液浸提24 h，收集上清液保存。將兩次上清液混合后過濾，將濾液放置于35 ℃烘箱中揮干，揮干后加入去離子水定容至70 mL，得到1.0 g·mL-1的母液。

將母液加入分液漏斗中，加入400 mL 甲醇溶液浸提18 h 后收集上清液于35 ℃條件下?lián)]干，再加入去離子水定容至70 mL 配成濃度為1.0 g·mL-1的溶液，稱為甲醇相態(tài)液，再分別加入無菌水稀釋配置0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 g·mL-1各梯度各20 mL。

操作方法同上，得到乙醚相態(tài)液及乙酸乙酯相態(tài)液，各相態(tài)液稀釋同樣濃度梯度后加入試管中置于4 ℃冰箱保存。

在培養(yǎng)皿（Φ=9 cm）的底部鋪上2 層濾紙，向每個(gè)皿內(nèi)分別加入珠蘭的各相態(tài)溶液6 mL，并以相同體積去離子水為對(duì)照組。每個(gè)處理3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100 粒白菜種子，將培養(yǎng)皿置于25 ℃恒溫光照培養(yǎng)箱中，18 h 光照與6 h 黑暗條件交替培養(yǎng)，72 h 后統(tǒng)計(jì)發(fā)芽數(shù)（長出子葉為準(zhǔn)），測(cè)量根長、莖長及鮮重，計(jì)算發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率化感指數(shù)、發(fā)芽勢(shì)化感指數(shù)、根長化感指數(shù)、莖長化感指數(shù)、鮮重化感指數(shù)等。

1.3 性狀測(cè)定

從播種72 h 后統(tǒng)計(jì)發(fā)芽數(shù)（長出子葉為準(zhǔn)），計(jì)算種子發(fā)芽率。

種子發(fā)芽率（%）=發(fā)芽終期（72 h）正常發(fā)芽種子總數(shù)/供試種子總數(shù)×100[22]。

種子發(fā)芽勢(shì)（%）=日平均發(fā)芽數(shù)達(dá)到最高日正常發(fā)芽的種子總數(shù)/供試種子總數(shù)×100[10]。

根長化感指數(shù)、芽長化感指數(shù)、鮮重化感指數(shù)：播種72 h 后，以每株幼苗平均根長、莖長、鮮重計(jì)算。

化感指數(shù)RI=處理值/對(duì)照值-1，RI＞0 則表示促進(jìn)作用，RI＜0 則表示抑制作用，絕對(duì)值越大則表示化感作用越強(qiáng)。

實(shí)驗(yàn)采用Excel 2010 記錄數(shù)據(jù)及Word 2010 繪制表格，用SPSS 17.0 進(jìn)行方差分析，LSD 法進(jìn)行多重檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 珠蘭鮮葉不同溶劑及濃度梯度提取液對(duì)種子萌發(fā)影響

2.1.1 對(duì)種子發(fā)芽率影響

種子發(fā)芽率可作為評(píng)判種子質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。由表1，表2 可知，珠蘭鮮葉甲醇相態(tài)液對(duì)白菜種子發(fā)芽率具抑制作用，且其抑制作用隨甲醇相態(tài)液濃度升高而增加。當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度處于0.2～0.4 g·mL-1時(shí)，其抑制程度急劇增加，0.2 g·mL-1甲醇相態(tài)液處理組與0.4 g·mL-1甲醇相態(tài)液處理組發(fā)芽率分別達(dá)到25.33%、5.00%，化感指數(shù)分別達(dá)到-0.694、-0.940，兩處理組發(fā)芽率存在極顯著性差異，并且0.2 g·mL-1甲醇相態(tài)液處理組與對(duì)照組差異極顯著，0.4 g·mL-1甲醇相態(tài)液處理組與對(duì)照組之間差異極顯著。當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度≥0.6 g·mL-1時(shí)，各甲醇相態(tài)液處理組發(fā)芽率分別達(dá)到1.67%、0.67%、0.00%，化感指數(shù)分別-0.980、-0.992、-1.00 0，與對(duì)照組及0.2 g·mL-1甲醇相態(tài)液處理組差異極顯著，說明從濃度為0.2 g·mL-1起抑制作用隨提取液濃度升高加強(qiáng)，當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度為1.0 g·mL-1時(shí)，其抑制作用極強(qiáng)，無種子展開子葉，說明不同濃度梯度甲醇相態(tài)液對(duì)白菜種子發(fā)芽情況具抑制作用，且抑制程度隨濃度升高越來越強(qiáng)烈。

當(dāng)珠蘭鮮葉乙醚相態(tài)液濃度≤0.4 g·mL-1時(shí)，對(duì)白菜種子發(fā)芽率具抑制作用且抑制作用隨乙醚相態(tài)液濃度升高而逐漸加強(qiáng)，各乙醚相態(tài)液處理組發(fā)芽率分別達(dá)到69.33%，58.00%，化感指數(shù)達(dá)到-0.161，-0.298，與對(duì)照組之間差異不顯著。當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度為0.6 g·mL-1時(shí)，其發(fā)芽率達(dá)到39.00%，化感指數(shù)達(dá)到-0.528，其發(fā)芽率與對(duì)照組及其余處理組之間差異極顯著。當(dāng)乙醚相態(tài)液濃度＞0.6 g·mL-1時(shí)，各處理組發(fā)芽率分別為10.00%，9.67%，化感指數(shù)達(dá)到-0.879，-0.883，與對(duì)照組均存在極顯著差異，以上說明隨濃度升高對(duì)白菜種子發(fā)芽率具抑制作用且低濃度抑制作用不顯著，高濃度抑制作用極顯著。

珠蘭鮮葉不同梯度乙酸乙酯相態(tài)液對(duì)白菜種子發(fā)芽率整體趨勢(shì)表現(xiàn)為逐漸增強(qiáng)的抑制作用。當(dāng)乙酸乙酯相態(tài)液濃度為0.2 g·mL-1時(shí)，其發(fā)芽率為66.33%，化感指數(shù)達(dá)到-0.198，與對(duì)照組差異不顯著。當(dāng)乙酸乙酯相態(tài)液濃度為0.4 g·mL-1和0.6 g·mL-1時(shí)，其發(fā)芽率分別達(dá)到54.67%和44.00%，化感指數(shù)達(dá)到-0.339 和-0.468，與對(duì)照組差異極顯著，當(dāng)乙酸乙酯相態(tài)液濃度為0.8 g·mL-1和1.0 g·mL-1時(shí)，發(fā)芽率分別為32.33%，14.67%，與對(duì)照組均存在極顯著性差異，化感指數(shù)達(dá)到-0.609 和-0.823，以上說明不同濃度梯度乙酸乙酯相態(tài)液隨濃度升高對(duì)白菜種子發(fā)芽率具抑制作用，且隨濃度升高抑制程度越來越顯著。

2.1.2 對(duì)種子發(fā)芽勢(shì)影響

種子的發(fā)芽勢(shì)反映種子發(fā)芽的整齊度。實(shí)驗(yàn)中，種子發(fā)芽率按發(fā)芽終期（72 h）時(shí)種子發(fā)芽情況計(jì)算，此時(shí)恰好是日平均發(fā)芽數(shù)達(dá)到最高日正常發(fā)芽時(shí)，因此白菜種子發(fā)芽率與發(fā)芽勢(shì)絕對(duì)值相等。

珠蘭鮮葉甲醇相態(tài)液不同濃度較于對(duì)照組對(duì)種子的發(fā)芽勢(shì)均具抑制作用，且抑制程度與甲醇相態(tài)液濃度呈正相關(guān)關(guān)系。在處理組中，當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度處于0.2～0.4 g·mL-1時(shí)，其抑制程度急劇增加，0.2 g·mL-1與0.4 g·mL-1甲醇相態(tài)液處理組發(fā)芽勢(shì)分別為25.33%、5.00%，化感指數(shù)分別為-0.694、-0.940，兩者差異極顯著，并且0.2 g·mL-1甲醇相態(tài)液處理組與對(duì)照組相比差異極顯著，0.4 g·mL-1甲醇相態(tài)液處理組與對(duì)照組之間也存在極顯著差異。當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度≥0.6 g·mL-1時(shí)，各處理組發(fā)芽勢(shì)分別達(dá)到1.67%、0.67%、0，化感指數(shù)分別-0.980、-0.992、-1.000，與對(duì)照組及0.2 g·mL-1甲醇相態(tài)液處理組差異極顯著，各處理組之間差異不顯著，說明從甲醇相態(tài)液濃度為0.2 g·mL-1起抑制作用隨甲醇相態(tài)液濃度升高加強(qiáng)，當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度為1.0 g·mL-1時(shí)，其抑制作用極強(qiáng)。以上說明在種子萌發(fā)初期，珠蘭鮮葉甲醇相態(tài)液濃度對(duì)種子發(fā)芽勢(shì)具抑制作用。

當(dāng)珠蘭鮮葉乙醚相態(tài)液濃度≤0.4 g·mL-1時(shí)，隨濃度升高對(duì)白菜種子發(fā)芽勢(shì)具抑制作用且抑制作用加強(qiáng)，各乙醚相態(tài)液處理組發(fā)芽率分別為69.33%，58.00%，化感指數(shù)達(dá)到-0.161，-0.298，與對(duì)照組差異不顯著。當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度為0.6 g·mL-1時(shí)，其發(fā)芽率達(dá)到39.00%，化感指數(shù)達(dá)到-0.528，與對(duì)照組及其余處理組差異極顯著。當(dāng)乙醚相態(tài)液濃度為0.8 g·mL-1和1.0 g·mL-1時(shí)，各處理組發(fā)芽率分別為10.00%，9.67%，化感指數(shù)達(dá)到-0.879，-0.883，與對(duì)照組差異極顯著，以上說明隨濃度升高對(duì)白菜種子發(fā)芽勢(shì)具抑制作用且低濃度抑制作用不顯著，高濃度抑制極顯著，因此低濃度提取液下，種子發(fā)芽整齊度優(yōu)于高濃度下種子的發(fā)芽整齊度。

珠蘭鮮葉不同梯度乙酸乙酯相態(tài)液對(duì)白菜種子發(fā)芽勢(shì)整體趨勢(shì)表現(xiàn)為逐漸增強(qiáng)的抑制作用。當(dāng)乙酸乙酯相態(tài)液濃度為0.2 g·mL-1時(shí)，其發(fā)芽率為66.33%，化感指數(shù)達(dá)到-0.198，與對(duì)照組差異不顯著。當(dāng)乙酸乙酯相態(tài)液濃度為0.4 g·mL-1和0.6 g·mL-1時(shí)，其發(fā)芽率分別達(dá)到54.67%和44.00%，化感指數(shù)達(dá)到-0.339 和-0.468，與對(duì)照組差異極顯著，當(dāng)乙酸乙酯相態(tài)液濃度為0.8 g·mL-1和1.0 g·mL-1時(shí)，發(fā)芽率分別為32.33%，14.67%，化感指數(shù)達(dá)到-0，609 和-0.823，與對(duì)照組及其他處理組存在極顯著差異。以上說明不同梯度乙酸乙酯相態(tài)液隨濃度升高對(duì)白菜種子發(fā)芽勢(shì)具抑制作用，且隨濃度升高，種子發(fā)芽的整齊度降低。

2.2 珠蘭鮮葉不同溶劑及濃度梯度提取液對(duì)幼苗生長影響

2.2.1 對(duì)幼苗根長影響

由表1，表2 可知，珠蘭鮮葉甲醇相態(tài)液對(duì)白菜種子根長具抑制作用，且其抑制作用隨甲醇相態(tài)液濃度升高而增強(qiáng)。當(dāng)甲醇相態(tài)液處理組濃度為0.2 g·mL-1時(shí)，抑制指數(shù)達(dá)到-0.750，根長達(dá)到4.28 mm，與對(duì)照組存在極顯著差異，與其他處理組差異不顯著，各處理組之間差異均不顯著。

珠蘭鮮葉乙醚相態(tài)液對(duì)白菜種子根長具抑制作用，當(dāng)乙醚相態(tài)液濃度＜1.0 g·mL-1時(shí)抑制程度隨提取液濃度升高而加強(qiáng)，當(dāng)乙醚相態(tài)液濃度為1.0 g·mL-1時(shí)抑制程度減弱。當(dāng)乙醚相態(tài)液處理組濃度為0.2 g·mL-1時(shí)，根長達(dá)到12.53 mm，與對(duì)照組存在顯著差異。當(dāng)乙醚相態(tài)液處理組濃度為0.6 g·mL-1時(shí)，根長達(dá)到8.75 mm，與對(duì)照組存在極顯著差異，乙醚相態(tài)液濃度＞0.6 g·mL-1的各處理組與對(duì)照組均存在極顯著差異，各處理組之間差異不顯著。

珠蘭鮮葉不同濃度梯度乙酸乙酯相態(tài)液對(duì)白菜種子發(fā)芽整體趨勢(shì)表現(xiàn)為逐漸增強(qiáng)的抑制作用。當(dāng)乙酸乙酯相態(tài)液濃度為0.2 g·mL-1時(shí)，化感指數(shù)達(dá)到-0.259，根長為12.67 mm，與對(duì)照組存在極顯著差異。當(dāng)乙酸乙酯相態(tài)液濃度＞0.2 g·mL-1時(shí)抑制程度繼續(xù)隨濃度升高而增強(qiáng)，所有乙酸乙酯相態(tài)液處理組均與對(duì)照組均存在極顯著差異。

2.2.2 對(duì)幼苗莖長影響

由表1 和表2 可知，珠蘭鮮葉甲醇相態(tài)液對(duì)白菜幼苗莖長具抑制作用，且其抑制作用隨珠蘭鮮葉甲醇相態(tài)液濃度升高而增加。當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度為0.2 g·mL-1時(shí)，與對(duì)照組存在極顯著差異，當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度＞0.2 g·mL-1時(shí)抑制作用隨提取液濃度升高而增強(qiáng)，當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度達(dá)到1.0 g·mL-1時(shí)莖長為0，化感指數(shù)為-1.000，幼苗無莖生長。各甲醇相態(tài)液處理組與對(duì)照組均存在極顯著差異，各處理組間差異不顯著。

珠蘭鮮葉乙醚相態(tài)液對(duì)白菜種子莖長具抑制作用，當(dāng)乙醚相態(tài)液濃度為0.4 g·mL-1時(shí)抑制作用減弱，當(dāng)乙醚相態(tài)液濃度＞0.4 g·mL-1時(shí)抑制作用隨提取液濃度升高而加強(qiáng)，乙醚相態(tài)液濃度為1.0 g·mL-1時(shí)抑制作用減弱。當(dāng)乙醚相態(tài)液提取液濃度為0.6 g·mL-1時(shí)與對(duì)照組差異顯著，乙醚相態(tài)液濃度為≥0.8 g·mL-1時(shí)與對(duì)照組存在極顯著差異。乙醚對(duì)幼苗莖長的抑制作用表現(xiàn)為上升的波狀曲線，在濃度為0.4 g·mL-1與濃度為1.0 g·mL-1時(shí)抑制作用均減弱。

珠蘭鮮葉不同濃度梯度乙酸乙酯相態(tài)液對(duì)白菜種子莖長表現(xiàn)出抑制作用。當(dāng)乙酸乙酯相態(tài)液濃度分別為0.4 g·mL-1和0.6 g·mL-1時(shí)，莖長分別為4.17 mm和4.54 mm，即在乙酸乙酯相態(tài)液濃度為0.6 g·mL-1時(shí)抑制作用減弱。當(dāng)乙酸乙酯相態(tài)液濃度為1.0 g·mL-1時(shí)，化感指數(shù)達(dá)到-0.621，與對(duì)照組差異極顯著，抑制作用表現(xiàn)為隨濃度升高而增強(qiáng)，各乙酸乙酯相態(tài)液處理組與對(duì)照組差異均不顯著，且各處理組之間差異不顯著。

表1 珠蘭鮮葉提取液對(duì)白菜種子萌發(fā)及幼苗生長影響Table 1 Effects of fresh leaves extract of Chloranthus spicatus（Thunb.）Makino on seed germination and seedling growth of Chinese cabbage

表2 珠蘭鮮葉提取液對(duì)白菜種子萌發(fā)及幼苗生長影響化感指數(shù)差異Table 2 Allelopathic index of the extract of fresh leaves of Chloranthus spicatus（Thunb.）on the germination of chinese cabbage seeds and the growth of seedlings

2.2.3 對(duì)幼苗鮮重影響

由表1，表2 可知，珠蘭鮮葉甲醇相態(tài)液對(duì)白菜種子鮮重具抑制作用，且其抑制作用隨甲醇相態(tài)液濃度升高而增加。當(dāng)甲醇相態(tài)液濃度為0.2 g·mL-1時(shí)，化感指數(shù)為-0.327，鮮重達(dá)到0.008 8 g，與處理組存在極顯著差異。各甲醇相態(tài)液處理組與對(duì)照組均存在差異性顯著，各處理組間差異不顯著。

珠蘭鮮葉乙醚相態(tài)液對(duì)白菜種子鮮重具抑制作用，當(dāng)乙醚相態(tài)液濃度為0.4 g·mL-1時(shí)抑制作用減弱，濃度＞0.4 g·mL-1時(shí)抑制作用隨提取液濃度升高而加強(qiáng)，濃度為1.0 g·mL-1時(shí)抑制作用減弱。濃度＞0.4 g·mL-1的各處理組與對(duì)照組差異極顯著，濃度＜0.4 g·mL-1處理組與對(duì)照組差異不顯著。乙醚對(duì)幼苗鮮重的抑制作用表現(xiàn)為上升的波狀曲線，在濃度為0.4 g·mL-1與濃度為1.0 g·mL-1時(shí)抑制作用均減弱。

珠蘭鮮葉不同濃度梯度乙酸乙酯相態(tài)液對(duì)白菜種子鮮重抑制作用，各處理組化感指數(shù)分別達(dá)到-0.178，-0.284，-0.295，-0.308，-0.601，表現(xiàn)為其抑制作用隨乙酸乙酯相態(tài)液濃度升高而增加。乙酸乙酯相態(tài)液濃度為0.2 g·mL-1處理組與對(duì)照組差異不顯著，0.4，0.6 g·mL-1與0.8 g·mL-1處理組與對(duì)照組差異顯著，1.0 g·mL-1處理組與對(duì)照組差異極顯著。

3 結(jié)論與討論

植物化感作用指植物通過揮發(fā)、淋浴、分解和分泌方式產(chǎn)生化感物質(zhì)從而對(duì)周圍植物生長產(chǎn)生影響的生態(tài)學(xué)現(xiàn)象，如蕨類的落葉中含有阿魏酸和咖啡酸等酚類物質(zhì)，強(qiáng)烈抑制周圍環(huán)境中的草本植物生長[8]；油蒿通過釋放化感物質(zhì)使周圍一年生植物無法生長[23]；紫花苜蓿對(duì)自身種子生長抑制作用隨其浸提液濃度升高而增強(qiáng)[24]?；形镔|(zhì)通常為高分子化合物，以酯鍵形態(tài)存在于土壤-植物體系中，其種類繁多，但最常見的化感物質(zhì)主要為酚酸類物質(zhì)[16-25]，且由于酚類化感物質(zhì)具有水溶性特征，因此很容易在自然條件下被雨霧淋溶而進(jìn)入土壤中。化感物質(zhì)常通過調(diào)控種子的萌發(fā)機(jī)制，包括破壞種子細(xì)胞結(jié)構(gòu)，抑制胚的生長，影響種子萌發(fā)的代謝途徑，干擾種子活性氧的含量等[26]，來達(dá)到抑制種子萌發(fā)和幼苗生長的效應(yīng)。在正常生理下，植物的活性氧的產(chǎn)生和消除處于動(dòng)態(tài)平衡[27]，植物體具保護(hù)酶系統(tǒng)，處于逆境時(shí)通過POD、SOD、CAT 等保護(hù)酶清除植物體內(nèi)有害的活性氧自由基[26]。幼苗受到提取液中化感物質(zhì)的脅迫，導(dǎo)致其POD、CAT 等保護(hù)酶含量增加而消除植物體內(nèi)過度活性氧自由基含量，避免細(xì)胞過氧化[27]。

研究表明，許多植物浸提液的濃度對(duì)于其他植物生長具“高抑低促”的現(xiàn)象，如白三葉根系分泌物對(duì)禾本科草坪草的影響[28]、白三葉腐解液對(duì)禾本科草坪草的影響[29]、白樺各器官水浸液對(duì)落葉松種子胚根的影響[15]、桉樹葉水浸提液對(duì)綠豆種子的萌發(fā)影響[30]等。而實(shí)驗(yàn)不同溶劑提取的珠蘭鮮葉提取液對(duì)種子及幼苗的各生長形態(tài)指標(biāo)均表現(xiàn)出不同程度的抑制作用，并且抑制程度與浸提液濃度成正比，而并沒有表現(xiàn)出促進(jìn)作用，這與盧彪儒[31]，李悅[32]，沈潔[33]等的研究結(jié)果一致。推測(cè)該原因是珠蘭葉片相較于植物體其他部位在提取液中水溶性的化感物質(zhì)較多[34]，高濃度的提取液對(duì)種子的萌發(fā)及幼苗的生長產(chǎn)生顯著的抑制作用[27]，若降低提取液的最低濃度，則可實(shí)現(xiàn)提取液對(duì)種子萌發(fā)及幼苗生長的促進(jìn)作用。

研究表明，不同植物的不同溶劑萃取組分的化感效應(yīng)表現(xiàn)有所差異。在實(shí)驗(yàn)中，珠蘭鮮葉不同溶劑提取液對(duì)白菜種子萌發(fā)及幼苗生長均具有抑制作用，且甲醇相態(tài)提取液抑制作用表現(xiàn)最強(qiáng)，在濃度為1.0 g·mL-1時(shí)，白菜種子發(fā)芽率發(fā)芽勢(shì)和幼苗莖長化感指數(shù)達(dá)到-1.000，根長化感指數(shù)達(dá)到-0.955，鮮重化感指數(shù)達(dá)到-0.784，表明珠蘭鮮葉中化感物質(zhì)主要出現(xiàn)在甲醇相態(tài)提取液中，這與百合根系分泌物化感效應(yīng)[35]結(jié)果相似。這是由于不同的有機(jī)溶劑的極性存在差異，并且所萃取的化感物質(zhì)的種類和極性也存在差異[36]，并隨溶劑的極性增強(qiáng)而增強(qiáng)，因此不同溶劑提取液所萃取的化感物質(zhì)種類和極性不同，導(dǎo)致最終表現(xiàn)的化感效應(yīng)有所差異。

不同溶劑珠蘭鮮葉提取液對(duì)白菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)均具抑制作用，這可能與化感物質(zhì)通過調(diào)控細(xì)胞伸長與分裂來阻止胚根伸長[14]有關(guān)。不同溶劑珠蘭鮮葉提取液對(duì)白菜幼苗根長抑制程度均大于莖長，這可能由于胚根首先接觸提取液，因此胚根細(xì)胞的分裂和伸長受抑制導(dǎo)致幼苗生長受抑制，這與霍鴻浩等[37]研究結(jié)果一致。

化感作用的作用方式是通過植物、微生物與土壤間相互作用而產(chǎn)生的結(jié)果，在農(nóng)業(yè)中間作、混作、套作等復(fù)合種植模式具有重要作用并得到廣泛應(yīng)用。化感作用隨生物技術(shù)的發(fā)展逐漸得到重視與認(rèn)同，并隨研究深入進(jìn)一步認(rèn)識(shí)。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中可通過控制提取液質(zhì)量濃度來制得生長調(diào)節(jié)劑[38]。實(shí)驗(yàn)為室內(nèi)試驗(yàn)，種子及幼苗生長環(huán)境如水分、溫度、光照等條件均嚴(yán)格設(shè)置，避免了自然環(huán)境的一些因素如土壤、大氣等。然而實(shí)際中植物生長環(huán)境錯(cuò)綜復(fù)雜，因此如何利用化感效應(yīng)來進(jìn)行農(nóng)作物之間合理有效的間作措施，仍有待進(jìn)一步研究。