舒 楊，張春燕，程昱璇，桑培培，蔣 濤，朱永闌，崔佳奕，檀旭東，史文杰，張民杰，田亞平

(中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室，北京 100853)

肥胖患者體內(nèi)脂肪堆積過(guò)多和(或)分布異常，通常伴有體質(zhì)量增加。如果脂肪主要在腹壁和腹腔內(nèi)蓄積過(guò)多，被稱為“中心性”或“向心性”肥胖，是多種慢性病的最重要危險(xiǎn)因素之一。肥胖會(huì)對(duì)身體許多組織的功能產(chǎn)生不利影響，包括胰腺、肝臟、骨骼肌、心臟、關(guān)節(jié)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)。臨床上脂肪組織的積累會(huì)導(dǎo)致2型糖尿病(T2DM)、高血壓、高膽固醇血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、非酒精性脂肪肝疾病、膽囊疾病及某些癌癥的風(fēng)險(xiǎn)，關(guān)節(jié)炎和阿爾茨海默病的發(fā)展。雖然很可能有多種分子機(jī)制將肥胖與其并發(fā)癥聯(lián)系起來(lái)，但炎癥是一種常見(jiàn)的機(jī)制。

近年來(lái)的研究提示，血清C反應(yīng)蛋白(CRP)水平與肥胖密切相關(guān)。CRP作為急性時(shí)相反應(yīng)的一項(xiàng)靈敏指標(biāo)，血漿CRP水平在炎性反應(yīng)時(shí)迅速升高[1-2]。目前超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)廣泛應(yīng)用于感染狀況以及炎性反應(yīng)[3]，hs-CRP水平的測(cè)定比CRP更加靈敏。肥胖導(dǎo)致的代謝不平衡增加了慢性肝病的風(fēng)險(xiǎn)，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)是判斷肝臟損傷的標(biāo)志物。血液中的氨基酸水平反映了機(jī)體組織蛋白代謝和能量代謝的情況，因此本研究探討肥胖與hs-CRP、肝功能指標(biāo)以及氨基酸水平的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院體檢人員145例，自愿填寫(xiě)樣本采集表，按照體質(zhì)量指數(shù)(BMI)分組分為體質(zhì)量正常組和肥胖組，其中正常組78例，平均年齡(43.4±1.6)歲；肥胖組67例，平均年齡(44.4±1.5)歲，兩組年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1生化指標(biāo)監(jiān)測(cè) 根據(jù)研究者的身高、體質(zhì)量計(jì)算BMI；按照采集手冊(cè)相關(guān)要求規(guī)范采集靜息狀態(tài)下體檢者靜脈血2 mL，3 000 r/min離心10 min分離血清(不含溶血，脂血標(biāo)本)待測(cè)。應(yīng)用羅氏cobas6000及配套羅氏試劑和質(zhì)控品檢測(cè)血漿hs-CRP、ALT、AST、清蛋白(ALB)、GGT水平，按要求進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.2.2氨基酸檢測(cè) 串聯(lián)質(zhì)譜(MS/MS)分析用直徑為3.2 mm的打孔器進(jìn)行干血斑的打孔，置于96孔過(guò)濾板中，加入配制好的氨基酸和肉堿的內(nèi)標(biāo)工作液100 μL，用封膜套覆蓋過(guò)濾板，并確保密封良好，然后將96孔板放入振蕩孵育器內(nèi)，45 ℃孵育45 min，轉(zhuǎn)速為650～750 r/min，振蕩完畢后，靜置5～10 min，將板中液體轉(zhuǎn)移80 μL至V型耐熱板中，靜置2 h后，上機(jī)檢測(cè)。

1.3納入標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1BMI具體計(jì)算方法是BMI=體質(zhì)量/身高2(kg/m2)。中國(guó)肥胖問(wèn)題工作組織(WGOC)建議BMI<18.5 kg/m2為低體質(zhì)量；18.5 kg/m2≤BMI≤23.9 kg/m2為正常體質(zhì)量；23.9 kg/m2≤BMI≤27.9 kg/m2；BMI>27.9 kg/m2為體質(zhì)量超重為肥胖[4]。

1.3.2生化指標(biāo)正常范圍 hs-CRP：0.0～0.8 mg/dL、ALT：0.0～40.0 U/L、AST：0.0～40.0 U/L、ALB:35.0～50.0 g/L、GGT:0.0～50.0 U/L。

1.3.3氨基酸正常范圍 ALA：135.0～573.0 μmol/L、亮氨酸(LEU+ILE+PRO-OH):71.0～307.0 μmol/L、苯丙氨酸(PHE):25.0～84.0 μmol/L、酪氨酸(TYR):35.0～262.0 μmol/L、纈氨酸(VAL):64.0～286.0 μmol/L。

2 結(jié) 果

2.1兩組BMI和hs-CRP水平比較 分別對(duì)正常組78例，肥胖組67例進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，經(jīng)分析得出： 肥胖組BMI值明顯高于正常組(21.70±0.16)kg/m2，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；肥胖組hs-CRP明顯高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，且hs-CRP有增高的趨勢(shì)，見(jiàn)表1、圖1。

表1 肥胖組與正常組BMI、hs-CRP水平比較

圖1 正常組與肥胖組hs-CRP水平比較

表2 肥胖組與正常組肝功能指標(biāo)比較

2.2正常組與肥胖組肝功能相關(guān)指標(biāo)比較 分別對(duì)正常組78例，肥胖組67例進(jìn)行分析，經(jīng)分析得出：正常組的ALT水平為(19.30±1.50)U/L、AST(27.0±1.1)U/L、ALB(46.50±0.40)g/L、GGT(14.14±1.20)U/L；肥胖組的ALT水平為(44.20±5.60)U/L、AST(38.60±2.60)U/L、ALB(47.70±0.40)g/L、GGT(41.10±3.90)U/L，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2、圖2。

2.3正常組與肥胖組氨基酸水平比較 經(jīng)分析得出：正常組氨基酸水平ALA、LEU+ILE+PRO-OH、PHE、TYR、VAL與肥胖組氨基酸水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.000 1)，見(jiàn)表3、圖3。

圖2 正常組與肥胖組肝功能指標(biāo)水平比較

表3 正常組與肥胖組氨基酸水平比較

圖3 正常組與肥胖組氨基酸指標(biāo)水平比較

3 討 論

根據(jù)2015年《中國(guó)居民營(yíng)養(yǎng)與慢性病狀況報(bào)告》調(diào)查結(jié)果顯示，我國(guó)18歲及以上成人超重率為30.10%，肥胖率為11.90%，6～17歲兒童青少年超重率為6.00%，肥胖率為6.40%。隨著居民生活水平的提高，肥胖逐漸發(fā)展成為影響人類身體健康的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素，并被視為慢性低度炎癥狀態(tài)，肥胖與2型糖尿病、心血管疾病、高血壓等疾病有關(guān)[5-6]。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),肥胖和各種代謝性疾病，以及心血管的發(fā)病率大部分重疊[7-8]，雖然近幾年心血管疾病的病死率有所降低，但是隨著肥胖及其并發(fā)癥患病率大大增加，有可能會(huì)破壞這一現(xiàn)象[9]。越來(lái)越多的肥胖相關(guān)疾病被認(rèn)為是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的一項(xiàng)巨大挑戰(zhàn)。過(guò)度營(yíng)養(yǎng)不良，特別是高脂肪和碳水化合物的攝入，缺乏運(yùn)動(dòng)和久坐不動(dòng)的生活方式是體質(zhì)量增加和肥胖的主要原因。

CRP是炎性因子，參與炎癥發(fā)展的過(guò)程，然而對(duì)于低水平的CRP，效果不佳，因此為了提高靈敏度與準(zhǔn)確度，本研究探討肥胖與hs-CRP、肝功能指標(biāo)以及氨基酸水平的相關(guān)性。

產(chǎn)生CRP是由細(xì)胞因子調(diào)節(jié)的，主要是白細(xì)胞介素-6(IL-6)，其影響通過(guò)其他細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子修飾通過(guò)激素,如皮質(zhì)醇和胰島素以及生產(chǎn)細(xì)胞因子和其他應(yīng)激激素，可以在除了炎癥或損傷的其他條件來(lái)改變。已顯示來(lái)自肥胖人的脂肪細(xì)胞過(guò)量產(chǎn)生腫瘤壞死-α(TNF-α)。 TNF-α是各種細(xì)胞生產(chǎn)IL-6生產(chǎn)的有效誘導(dǎo)。這可以解釋為什么高體質(zhì)量指數(shù)與CRP的血清水平增加有關(guān)。

hs-CRP是機(jī)體受到損傷或炎性反應(yīng)刺激后在肝臟合成的一種非特異性標(biāo)志物。有文獻(xiàn)報(bào)道體質(zhì)量正常者血清hs-CRP水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于肥胖患者[10]。在本次的研究中，肥胖組與正常組相比，hs-CRP水平明顯升高，因此也驗(yàn)證了這一點(diǎn)，同時(shí)也反映出肥胖患者存在炎性反應(yīng)狀態(tài)，提示hs-CRP水平升高是肥胖患者的重要相關(guān)因子[11]。除此以外，hs-CRP水平與體質(zhì)量指數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系，提示hs-CRP水平的升高與內(nèi)臟脂肪含量的增多有關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)，不僅hs-CRP水平升高，ALT、AST、ALB、GGT水平也升高，ALT、AST、GGT是常規(guī)用于檢測(cè)肝損傷最敏感的肝功能酶[12-15]，肥胖容易引起肝功能損傷。肝臟損傷分為非酒精性脂肪性肝病和酒精性脂肪性肝病。超過(guò)80.00%的非酒精性脂肪性肝病的患者為肥胖。ALT和AST活性正?；蛘咧卸壬撸珹ST/ALT<1，表明這兩種酶是脂肪肝的標(biāo)志物。作為蛋白質(zhì)合成器官，肝臟占循環(huán)蛋白質(zhì)體積的85.00%～90.00%。ALB是這些分泌蛋白中水平最高的蛋白質(zhì)，平均占血漿蛋白總量的55.00%。肥胖患者腹部脂肪細(xì)胞豐富，容易因刺激引起肝細(xì)胞損傷[16]。肥胖易引起脂肪肝、肝硬化等肝臟疾病[17]。受損傷的肝細(xì)胞細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變，因此血清酶的改變可以反映出肝臟的狀態(tài)。肝臟是機(jī)體主要的代謝器官，尤其是脂代謝和糖代謝。肝臟以糖原形式儲(chǔ)存葡萄糖的能力，通過(guò)糖生成途徑進(jìn)食和組裝葡萄糖，所以響應(yīng)禁食是至關(guān)重要的。肝臟氧化脂質(zhì)，但也可以包裹多余的脂質(zhì)以分泌和儲(chǔ)存在其他組織中，例如脂肪。肝臟是蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的主要處理者，因?yàn)樗?fù)責(zé)血液中分泌的大部分蛋白質(zhì)(無(wú)論是基于質(zhì)量還是基于獨(dú)特蛋白質(zhì)的范圍)，氨基酸處理能量，以及處理含氮廢物來(lái)自尿素代謝形式的蛋白質(zhì)降解。碳水化合物和脂肪紊亂會(huì)導(dǎo)致肝臟胰島素抵抗。代謝失衡甚至?xí)?dǎo)致危及生命的情況。因此，維持肝臟的正常代謝功能至關(guān)重要。當(dāng)肝臟處于病理狀態(tài)時(shí)，肝臟代謝穩(wěn)態(tài)受到破壞，代謝紊亂會(huì)進(jìn)一步加重肝臟疾病。因此，確定肝病與代謝紊亂之間的關(guān)系至關(guān)重要。

在人體內(nèi)，氨基酸通過(guò)代謝可以發(fā)揮作用，比如：合成組織蛋白質(zhì)；變成酸、激素、抗體、肌酸等含氨物質(zhì)；轉(zhuǎn)變?yōu)樘妓衔锖椭荆谎趸啥趸己退澳蛩?，產(chǎn)生能量，因此，肥胖與代謝功能具有相關(guān)性。肥胖是由食物攝入和能量消耗之間的不平衡引起的，這導(dǎo)致脂肪組織的過(guò)度積累。脂肪組織現(xiàn)在不僅被認(rèn)為是儲(chǔ)存來(lái)自食物攝入的過(guò)剩能量的主要部位，而且還被認(rèn)為是內(nèi)分泌器官。脂肪組織的擴(kuò)張產(chǎn)生許多生物活性物質(zhì)，稱為脂肪細(xì)胞因子或脂肪因子，它們引發(fā)慢性低度炎癥并與許多不同器官中的一系列過(guò)程相互作用。雖然確切的機(jī)制仍不清楚，由過(guò)量的脂肪組織和脂肪組織功能障礙引起的這些脂肪因子的失調(diào)的產(chǎn)生或分泌可能有助于肥胖相關(guān)的代謝疾病的發(fā)展。

20世紀(jì)60年代首次報(bào)道了肥胖患者中支鏈氨基酸水平升高，支鏈氨基酸包括：亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸，支鏈氨基酸不僅是構(gòu)建肌肉組織的基本組成部分，而且參與了蛋白質(zhì)的合成。支鏈氨基酸是人體必需氨基酸，必須從食物中獲得。支鏈氨基酸的水平升高，說(shuō)明營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩，從而會(huì)導(dǎo)致肝功能損傷。

總之，本研究表明，肥胖與hs-CRP水平密切相關(guān)，同時(shí)肥胖患者對(duì)肝功能相關(guān)指標(biāo)有影響。肥胖成為影響人體健康的重要隱患，其肥胖的根本原因就是攝入過(guò)多，運(yùn)動(dòng)少以及內(nèi)分泌系統(tǒng)失調(diào)，為了防止肥胖的發(fā)生，應(yīng)根據(jù)自身情況，攝入適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)、脂肪、維生素等礦物質(zhì)。多食用粗糧，例如：糙米、胚芽米等。不宜食用油炸食品。

4 結(jié) 論

hs-CRP水平升高是肥胖患者的重要相關(guān)因子，肥胖會(huì)引起肝臟損傷以及部分氨基酸代謝異常。改善飲食、多運(yùn)動(dòng)就可以有效降低肥胖的發(fā)生，進(jìn)一步減少疾病的發(fā)生。