肖 煒 伊犁州檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證研究院 新疆伊犁 835000

用外行話說(shuō)，不確定度額定值是指不可靠的程度，主要用來(lái)表示實(shí)驗(yàn)測(cè)量結(jié)果的可行性程度。它可以用來(lái)測(cè)試參與實(shí)驗(yàn)的人員、適用的測(cè)量?jī)x器和設(shè)備、以及具體的實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件等因素對(duì)測(cè)量能力的水平進(jìn)行量化。

1 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)食品從2018年至2019年隨機(jī)抽檢的236批蛋糕和肉制品中抽取。實(shí)驗(yàn)中涉及的食物主要有火腿、烤雞、蛋糕等不同種類。[1]BP計(jì)數(shù)瓊脂:用北京路橋有限公司提供的培養(yǎng)基按照說(shuō)明書配制培養(yǎng)液，將配制好的培養(yǎng)液倒在平板上。腦心提取肉湯(BHI)、兔血漿、小斜營(yíng)養(yǎng)瓊脂均由北京路橋有限公司提供，直接用于實(shí)驗(yàn)。生理鹽水緩沖液由伊犁州產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)所食品室配制而成。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 分析培養(yǎng)基增菌技術(shù)

目前，在我國(guó)食品微生物檢測(cè)過(guò)程中，主要采用選擇性培養(yǎng)基和顯色培養(yǎng)基兩種技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)基的生長(zhǎng)[2]。值得注意的是，雖然選擇性培養(yǎng)基常用于區(qū)分不同類型的細(xì)菌，但檢測(cè)結(jié)果不能用于準(zhǔn)確識(shí)別細(xì)菌類型，只有通過(guò)分型鑒定等方式才能確定是否有相應(yīng)菌株的存在。

1.2.2 沙門氏菌檢驗(yàn)

在食品病原微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過(guò)程中，微生物檢測(cè)能力的高低直接影響檢測(cè)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性，是檢測(cè)質(zhì)量控制的關(guān)鍵[3-4]。長(zhǎng)期以來(lái)，中國(guó)食品藥品檢驗(yàn)所等機(jī)構(gòu)一直以實(shí)驗(yàn)室比對(duì)計(jì)劃的形式開(kāi)展沙門氏菌檢測(cè)能力驗(yàn)證活動(dòng)。在具體的驗(yàn)證過(guò)程中，盲樣檢測(cè)過(guò)程主要采用《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)》（GB4789.4-2016）。

1.2.3 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)

在食品微生物檢測(cè)過(guò)程中，日常采用《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)》(GB4789.10-2016)作為檢測(cè)方法，包括預(yù)富集培養(yǎng)、分離培養(yǎng)、菌落形態(tài)觀察、血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)等多個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟。然而，在傳統(tǒng)的檢測(cè)過(guò)程中，檢測(cè)的具體操作步驟煩瑣且需要大量的時(shí)間[5]。檢測(cè)靈敏度不夠，容易出現(xiàn)漏檢問(wèn)題。隨著微生物研究技術(shù)的不斷完善，應(yīng)用于食品中病原微生物檢測(cè)的相關(guān)技術(shù)也在不斷完善，金黃色葡萄球菌的檢測(cè)技術(shù)得到了很大的發(fā)展，從傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法中衍生出了大量更有效的檢測(cè)方法[6]。金黃色葡萄球菌的檢測(cè)也應(yīng)用了生物化學(xué)、分子生物學(xué)和免疫學(xué)等不同領(lǐng)域的方法和技術(shù)[7-8]。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 樣品致病菌檢測(cè)結(jié)果

表1 肉制品和蛋糕的致病菌檢測(cè)結(jié)果

2.2 選定兩份樣品Y1和Y2檢測(cè)的結(jié)果

從樣本Y1和Y2的檢測(cè)結(jié)果可以看出，兩個(gè)樣本中均有定量檢測(cè)金黃色葡萄球菌[10-11]。用公式計(jì)算樣品Y1中同批次的5個(gè)獨(dú)立包裝得到：低于10CFU/g、20CFU/g、低于10CFU/g、15CFU/g和30CFU/g，而樣品Y2的5個(gè)獨(dú)立包裝檢測(cè)結(jié)果為：15CFU/g、20CFU/g、低于10CFU/g、30CFU/g、低于10CFU/g[12]。結(jié)合相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，可以得出Y1和Y2不存在過(guò)量的金黃色葡萄球菌的結(jié)論[13]。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)論

事實(shí)上，影響平板上金黃色葡萄球菌計(jì)數(shù)結(jié)果的因素很多。在本實(shí)驗(yàn)中，主要因素是樣品的稀釋程度、菌落數(shù)量、樣品體積的大小、個(gè)體計(jì)數(shù)的重復(fù)性以及實(shí)驗(yàn)人員確認(rèn)研究了計(jì)數(shù)過(guò)程中的不確定度。在整個(gè)研究過(guò)程中，也存在著不同的影響因素，如標(biāo)準(zhǔn)菌種、培養(yǎng)箱參數(shù)、菌落重疊、培養(yǎng)基質(zhì)量、采樣均勻性、菌落計(jì)數(shù)誤差等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析和計(jì)算可以證明，在檢測(cè)過(guò)程中,樣品中金黃色葡萄球菌的平皿計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)的不確定性,重復(fù)計(jì)數(shù),不確定性的血漿凝固酶陽(yáng)性細(xì)菌的數(shù)量確認(rèn)測(cè)試是最有影響力的生成因素。