李 哲 高敬華 李永生 趙 瑾 宋麗娜 孫 震

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)約占所有肺癌的85%[1]。與小細(xì)胞癌相比，NSCLC對(duì)化學(xué)療法相對(duì)不敏感，手術(shù)治療仍為目前最為徹底和有效的治療方法，大部分早期患者經(jīng)手術(shù)切除后能獲得較長的生存期[2]。血清CEA是一種較為敏感的腫瘤分子標(biāo)志物，對(duì)腫瘤的早期監(jiān)測具有積極意義[3]，同時(shí)也可有效調(diào)控體內(nèi)的磷酸化反應(yīng)，對(duì)細(xì)胞凋亡具有重要意義[4]。Cyfra21-1是近年來用于肺癌分型診斷中敏感性較高的一個(gè)監(jiān)測指標(biāo)[5]。阿帕替尼是一種新型的小分子多靶點(diǎn)TKI：靶向VEGF、CEA、FGFR1等基因靶標(biāo)，可應(yīng)用于治療二線以后晚期肺癌、肝癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌等多種晚期癌癥。本研究旨在針對(duì)阿帕替尼聯(lián)合化療一線治療及聯(lián)合放化療治療非小細(xì)胞肺癌的療效及對(duì)患者血清CEA及Cyfra21-1水平的影響進(jìn)行分析。

1 材料與方法

1.1 一般資料

以本院2014年至2018年收治的160例NSCLC患者為研究對(duì)象。患者平均年齡(56.33±15.38)歲；男性95例，女性65例；肺癌分期參照2017年1月開始實(shí)施的最新版(第八版)肺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，其中Ι期11例，Ⅱ期6例，Ⅲ期47例，Ⅳ期96例。

1.2 分組方案

160例患者遵循隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)設(shè)計(jì)的原則分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組80例，實(shí)驗(yàn)組接受阿帕替尼同期聯(lián)合放、化療，對(duì)照組接受阿帕替尼同期聯(lián)合化療。化療采用EP和IP方案。放療方案：由于NSCLC中病灶局限于一側(cè)肺，有同側(cè)肺門和(或)同側(cè)和對(duì)側(cè)縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和(或)同側(cè)鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。放療劑量：常規(guī)分割法鱗癌60～70 Gy，腺癌、大細(xì)胞癌65 Gy。患者接受1個(gè)完整療程后隨訪8～23個(gè)月(平均14.2個(gè)月)，分別統(tǒng)計(jì)2組患者的癌轉(zhuǎn)移情況。

1.3 觀察指標(biāo)

分別于治療前及1個(gè)完整療程后(不同個(gè)體間存在時(shí)間差異，以醫(yī)囑內(nèi)容為準(zhǔn))進(jìn)行生物采樣，清晨空腹抽取靜脈血3 ml，均在室溫放置1 h血液凝固后，3 000 r/min離心8 min后取上層血清注入EP管中，并將其保存在-80 ℃的冰箱內(nèi)，避免反復(fù)融凍。采用ELISA法測定受試者患者血清CEA及Cyfra21-1水平，按照試劑盒(武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司)說明書進(jìn)行操作，并結(jié)合相應(yīng)的軟件對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 治療前后2組血清CEA、Cyfra21-1水平比較

對(duì)實(shí)驗(yàn)組以及對(duì)照組治療前后血清CEA、Cyfra21-1水平比較發(fā)現(xiàn)，治療前實(shí)驗(yàn)組以及對(duì)照組血清CEA、Cyfra21-1水平均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，但2組治療后與治療前相比血清CEA、Cyfra21-1水平均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，且治療后實(shí)驗(yàn)組血清CEA、Cyfra21-1水平均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

表1 2組治療前后血清CEA、Cyfra21-1水平比較

2.2 2組預(yù)后及其血清CEA及Cyfra21-1水平比較

所有患者接受1個(gè)完整療程后，實(shí)驗(yàn)組共發(fā)生轉(zhuǎn)移3例，對(duì)照組共發(fā)生轉(zhuǎn)移10例，轉(zhuǎn)移率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14.67，P=0.001)。實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組治療后未發(fā)生轉(zhuǎn)移的NSCLC患者血清CEA及Cyfra21-1水平均低于發(fā)生轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。見表2。

2.3 NSCLC患者不同亞組間血清CEA及Cyfra21-1水平的相關(guān)性分析

NSCLC患者不同亞組間血清CEA及Cyfra21-1水平的相關(guān)性分析結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組治療后未轉(zhuǎn)移組、實(shí)驗(yàn)組治療后轉(zhuǎn)移組血清CEA及Cyfra21-1水平均呈統(tǒng)計(jì)學(xué)正相關(guān)(P均<0.05)。見表3。

表2 2組不同預(yù)后患者血清CEA、Cyfra21-1水平比較

表3 NSCLC患者不同亞組間血清CEA及Cyfra21-1水平的相關(guān)性分析

注：*表示P<0.05，**表示P<0.01。

3 討論

NSCLC缺乏特異性的癥狀與體征，患者主要表現(xiàn)為肺部感染與氣管受壓，若病變體積小，則無明顯癥狀；若病變體積大，則繼發(fā)肺部感染或/和囊腫，若壓迫進(jìn)一步嚴(yán)重，則表現(xiàn)出氣胸、呼吸窘迫、低氧血癥等，有效的治療手段已經(jīng)成為目前臨床醫(yī)務(wù)工作者關(guān)注的熱點(diǎn)[6]。本研究是從臨床檢驗(yàn)的層面探討阿帕替尼聯(lián)合化療一線治療及聯(lián)合放化療治療非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的療效及對(duì)患者血清CEA及Cyfra21-1水平的影響。

本組NSCLC患者中接受1個(gè)完整療程后，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組轉(zhuǎn)移率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療后實(shí)驗(yàn)組NSCLC患者血清CEA及Cyfra21-1水平均低于對(duì)照組，治療后實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組未發(fā)生轉(zhuǎn)移的NSCLC患者血清CEA及Cyfra21-1水平均低于發(fā)生轉(zhuǎn)移者。有研究者分析了阿帕替尼對(duì)人胃癌SCG-7901裸小鼠移植瘤的療效，表明阿帕替尼藥效明顯強(qiáng)于Vatalanib，而且藥效與劑量關(guān)系呈現(xiàn)正相關(guān)。后續(xù)的跟進(jìn)研究也證實(shí)了5-Fu、阿霉素、奧沙利鉑等聯(lián)用的試驗(yàn)均表明，藥效明顯增強(qiáng)。對(duì)于腫瘤患者，放射治療也是治療的重要手段之一，最近幾年的研究顯示，放療對(duì)于早期的非小細(xì)胞肺癌治療的效果非常好[7-8]。

血清CEA水平在NSCLC患者發(fā)生特異性升高的理論依據(jù)已被國內(nèi)大量相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道證實(shí)[7]。因其蛋白表達(dá)產(chǎn)物對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞具有趨化作用，與NSCLC發(fā)生密切相關(guān)，同時(shí)對(duì)炎癥細(xì)胞的活化、聚集起重要作用。對(duì)癌癥的發(fā)生發(fā)展過程而言，血清Cyfra21-1蛋白本身并不直接參與癌癥病情的進(jìn)展和遷移，更多的只是充當(dāng)輔助型角色幫助其他癌癥相關(guān)引自進(jìn)一步發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。CEA協(xié)助Cyfra21-1調(diào)控體內(nèi)的磷酸化反應(yīng)主要是通過磷酸化信號(hào)通路的自由開關(guān)來實(shí)現(xiàn)，在相關(guān)的分子免疫學(xué)研究中曾經(jīng)報(bào)道Cyfra21-1可以有效改善NSCLC相關(guān)信號(hào)通路中的基因突變狀況，據(jù)既往報(bào)道結(jié)果顯示NSCLC中突變率最高的基因?yàn)門P53、EGFR、VEGF、KRAS基因等[7-11]，支持本研究得到的結(jié)論。眾所周知，腫瘤的發(fā)生是多基因聯(lián)合多階段變異的結(jié)果，其中Cyfra21-1基因突變導(dǎo)致其編碼的蛋白有更強(qiáng)的激酶活性和催化效率，因此使胞外的活化信號(hào)更加強(qiáng)烈和持久的向胞內(nèi)表達(dá)，而這是導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞持續(xù)異常增殖的生理學(xué)基礎(chǔ)之一。

此外，血清CEA、Cyfra21-1水平對(duì)于癌癥轉(zhuǎn)移的診斷價(jià)值可能與拷貝數(shù)變異有關(guān)[9]。拷貝數(shù)變異(copy number variation，CNV)是指基因組上長度超過1 kb的DNA片斷，在不同個(gè)體間拷貝數(shù)的差異。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)CNVs在人類基因組中的分布可影響至少基因組中10%的序列，同時(shí)也有諸多實(shí)驗(yàn)室的研究證實(shí)拷貝數(shù)變異與許多復(fù)雜疾病相關(guān)，在腫瘤相關(guān)基因中的CNV會(huì)對(duì)腫瘤的發(fā)生及轉(zhuǎn)移有很大的影響?；诖耍錍EA、Cyfra21-1水平的研究可以結(jié)合CNV對(duì)其作出更多理論層面的推斷，并通過生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)加以證實(shí)。