李 燊，吳海濤，2

（1.青島大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，山東 青島 266071；2.軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院軍事認(rèn)知與腦科學(xué)研究所，北京 100850）

孤獨(dú)癥譜系障礙（autism spectrum disorder，ASD）是一種神經(jīng)發(fā)育相關(guān)精神疾病，具有復(fù)雜的遺傳和環(huán)境成因。1943年，美國(guó)兒童精神病醫(yī)師KANNER[1]報(bào)道了11例ASD患兒的臨床癥狀，成為ASD診斷的重要基礎(chǔ)。ASD典型特征主要表現(xiàn)為社會(huì)交往障礙和重復(fù)刻板樣行為，部分ASD患者同時(shí)存在智力障礙和癲癇。ASD全球患病率為1.7%[2]，并逐年升高。ASD一旦發(fā)病，其癥狀會(huì)伴隨終生，對(duì)家庭和社會(huì)帶來(lái)沉重的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)?，F(xiàn)階段，對(duì)于ASD的診斷和治療仍缺乏行之有效的手段和方法，迫切需要通過(guò)深入的發(fā)病機(jī)制探討，來(lái)探尋其病因及病理生理學(xué)進(jìn)程，為新型臨床診療和干預(yù)措施研發(fā)提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)支撐。

目前，關(guān)于ASD的生物學(xué)研究主要圍繞經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型展開(kāi)。因此，構(gòu)建穩(wěn)定可靠的ASD動(dòng)物模型，對(duì)于深入探索ASD發(fā)病機(jī)制、病理生理進(jìn)程、行為學(xué)變化及診斷治療等具有至關(guān)重要的研究?jī)r(jià)值?；诓煌瑢?shí)驗(yàn)動(dòng)物模型在ASD研究中的重要性，本綜述將重點(diǎn)圍繞近年來(lái)用于構(gòu)建ASD的常見(jiàn)模式動(dòng)物及其構(gòu)建方法進(jìn)展進(jìn)行梳理和總結(jié)，以期為ASD相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究提供線索和依據(jù)。

1 孤獨(dú)癥譜系障礙研究常用的模式動(dòng)物

基于模式動(dòng)物在ASD研究中的重要價(jià)值，當(dāng)前，國(guó)內(nèi)外不同實(shí)驗(yàn)室已成功構(gòu)建了包括非人靈長(zhǎng)類、嚙齒類、鳴禽、斑馬魚、果蠅、海兔和秀麗隱桿線蟲(chóng)等在內(nèi)的多種ASD模式動(dòng)物。

各類模式動(dòng)物的構(gòu)建旨在模擬與ASD相關(guān)的核心表型，包括社交和溝通障礙、興趣受限和刻板重復(fù)樣行為等。并在此基礎(chǔ)上，借助各類ASD模式動(dòng)物在不同層面和維度深入解析ASD發(fā)病機(jī)制。我們將現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道的常用ASD相關(guān)模式動(dòng)物及其研究?jī)?yōu)勢(shì)總結(jié)如下（表1）。

2 常見(jiàn)孤獨(dú)癥譜系障礙動(dòng)物模型構(gòu)建方法

由于ASD發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，需要借助不同方式構(gòu)建不同類型的ASD動(dòng)物模型。目前ASD動(dòng)物模型的構(gòu)建方法主要分為遺傳學(xué)方法、化學(xué)藥物誘發(fā)和生物因素誘導(dǎo)3大類。

2.1 基于遺傳學(xué)方法構(gòu)建

大多數(shù)研究者認(rèn)為，ASD的病因及發(fā)病機(jī)制與遺傳因素密切相關(guān)。隨著基因組學(xué)研究的迅速發(fā)展，借助新型基因測(cè)序技術(shù)，人們獲得了大批ASD相關(guān)易感及致病基因。近年來(lái)，隨著鋅指核酸酶、轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶以及CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)的發(fā)展，使基因突變動(dòng)物模型迅速發(fā)展。目前熱門的突變基因主要包括編碼突觸黏附蛋白神經(jīng)配蛋白（neuroligin，NL）基因和神經(jīng)連接蛋白（neurexin，NR）類基因，Rett綜合征MeCP2基因，染色體22q13.3缺失綜合征Shank3基因，結(jié)節(jié)性硬化綜合征1（tuberous sclerosis complex 1，Tsc1）和Tsc2基因和脆性X綜合征Fmr1基因等（表2）。

表1 實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)孤獨(dú)癥譜系障礙（ASD）模式動(dòng)物類型及其研究?jī)?yōu)勢(shì)

2.1.1 神經(jīng)配蛋白

NL是存在于突觸后膜上的細(xì)胞黏附分子，與NR相互作用促進(jìn)突觸前膜和后膜的形成。NL-1敲除小鼠和NL-1 P89L敲入小鼠均表現(xiàn)出空間記憶受損。NL-1敲除小鼠顯示出強(qiáng)烈的梳理刻板行為表型，而NL-1 P89L雜合子小鼠則未顯示異常的刻板梳理行為[14-15]。另外，NL-2敲除小鼠也表現(xiàn)出ASD樣行為，其社交行為正常，但焦慮樣行為增加，疼痛敏感性降低以及運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)性差[16]。NL-3缺失小鼠則表現(xiàn)出超聲發(fā)聲受損和社會(huì)記憶改變[17]。MODI等[18]發(fā)現(xiàn)，NL-3 敲除小鼠表現(xiàn)出明顯的社交能力缺陷。 ROTHWELL等[19]報(bào)道了NL-3 R451C敲入小鼠具有社交新穎性偏好缺陷、過(guò)度活躍和重復(fù)行為等ASD相關(guān)行為表型。浙江大學(xué)羅建紅等[20]利用NL-3 R451C敲入小鼠進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，前額葉皮質(zhì)腦區(qū)gamma振蕩異?？赡苁菍?dǎo)致小鼠社交行為障礙的主要原因，而通過(guò)操控前額葉皮質(zhì)腦區(qū)抑制性PV中間神經(jīng)元可有效逆轉(zhuǎn)NL-3 R451C敲入小鼠的社交缺陷。

HAMILTON等[21]還描述了利用鋅指核酸酶基因編輯方法開(kāi)發(fā)的NL-3敲除大鼠模型，這為利用大鼠作為研究ASD相關(guān)基因的致病機(jī)制提供了重要實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究發(fā)現(xiàn)，NL-3敲除大鼠表現(xiàn)出過(guò)度活躍，且對(duì)驚恐刺激產(chǎn)生的前脈沖抑制受損，腦電圖研究顯示，該突變大鼠睡眠中斷與ASD患者睡眠障礙癥狀高度一致[22]。

2.1.2 神經(jīng)連接蛋白

NR編碼α和β神經(jīng)毒素，并且作為NR的突觸前結(jié)合配體，在突觸的黏附、分化和成熟中具有重要作用。目前較常見(jiàn)的模型鼠來(lái)自NR-1α/2α/3α3個(gè)基因全部敲除的小鼠，或來(lái)自NR-1α/2α雙敲小鼠。與野生型小鼠對(duì)比，三敲和雙敲小鼠分別在腦干和新皮質(zhì)中顯示較少的抑制性突觸[23]。

ESCLASSAN等[24]發(fā)現(xiàn)，NR-1α敲除大鼠存在顯著的非社會(huì)性認(rèn)知缺陷，最顯著的行為表型是類似多動(dòng)癥的過(guò)度活躍。有趣的是，ASD患者也常表現(xiàn)出注意缺陷多動(dòng)障礙等并發(fā)癥。

Cntnap2是另一類neurexin家族成員，目前在患有智力障礙和ASD的個(gè)體中可觀察到Cntnap2基因的隱性突變或染色體倒位。來(lái)自鳴禽的研究表明，Cntnap2與人類ASD有關(guān)，且富含與人類語(yǔ)言相關(guān)的神經(jīng)環(huán)路。已有報(bào)道，Cntnap2突變的小鼠顯示行為缺陷、多動(dòng)以及癲癇發(fā)作[25]。

2.1.3 甲基CpG結(jié)合蛋白2

甲基CpG結(jié)合蛋白2（methyl-CpG binding protein 2，MeCP2）靶向突變的ASD小鼠模型與臨床Rett綜合征具有高度的表型一致性。許多研究表明，MeCP2突變小鼠表現(xiàn)出社會(huì)行為受損。這些模型包含了許多與人類相似的癥狀，從而為理解ASD行為異常的神經(jīng)機(jī)制提供了有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)體系。

目前，較為經(jīng)典的MeCP2突變小鼠有缺失外顯子3[26]、缺失外顯子3和4[27]以及308X點(diǎn)突變[28]。盡管MeCP2敲除小鼠表現(xiàn)出Rett綜合征患者存在的大多數(shù)發(fā)育和行為缺陷，但在MeCP2過(guò)表達(dá)小鼠模型中難以鑒定出ASD樣行為[29]。WU等[30]構(gòu)建了MeCP2敲除大鼠模型，其表現(xiàn)出生長(zhǎng)遲緩、咬合不正、缺乏運(yùn)動(dòng)、前肢握力較弱和顯著的社會(huì)交往缺陷。

表2 常見(jiàn)遺傳修飾ASD哺乳類動(dòng)物模型的構(gòu)建

中科院上海神經(jīng)科學(xué)研究所仇子龍和孫強(qiáng)等[31]基于慢病毒感染策略，構(gòu)建了大腦中過(guò)表達(dá)人類MeCP2的轉(zhuǎn)基因食蟹猴（Macaca fascicularis），其表現(xiàn)出ASD樣行為并呈現(xiàn)出轉(zhuǎn)基因的種系穩(wěn)定遺傳。來(lái)自同濟(jì)大學(xué)醫(yī)學(xué)院、昆明理工大學(xué)等單位的研究人員詳細(xì)描述了利用轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶技術(shù)編輯MeCP2基因的新型MeCP2突變食蟹猴模型[32]。隨后，ZHANG等[33]探討了MeCP2突變猴的相關(guān)表型，包括靈長(zhǎng)類動(dòng)物獨(dú)特的眼動(dòng)追蹤檢測(cè)，結(jié)合磁共振成像分析，發(fā)現(xiàn)了同ASD患者相似的生理、行為和結(jié)構(gòu)異常。此類研究表明，使用基因工程方法構(gòu)建非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型研究腦部疾病的可行性和可靠性，對(duì)于ASD相關(guān)神經(jīng)機(jī)制研究以及潛在治療干預(yù)具有重要的研究?jī)r(jià)值。

2.1.4 SH3和多樣錨蛋白重復(fù)域蛋白

Shanks是一類突觸后密度蛋白，可同多種離子型和代謝型谷氨酸受體相互作用，并與肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架相聯(lián)系。Shank3的突變與ASD和Phelan-McDermid綜合征有關(guān)，其特征包括全腦發(fā)育遲緩、智力殘疾、言語(yǔ)延遲或缺失和輕微畸形等特征。目前已構(gòu)建了多種針對(duì)Shank3的多種動(dòng)物模型，Shank3正在成為ASD研究的熱點(diǎn)基因。

WANG等[34]描述了ASD相關(guān)Shank3基因敲除小鼠模型，發(fā)現(xiàn)皮質(zhì)-紋狀體-丘腦環(huán)路在突變體中過(guò)度活躍，但在社交行為期間活性降低。研究人員還可利用超聲發(fā)聲研究Shank3敲除大鼠的社交溝通行為[35]。MODI等[36]通過(guò)利用Shank2敲除大鼠模型，研究發(fā)現(xiàn)其表現(xiàn)出顯著的ASD行為表型，包括過(guò)度活躍、運(yùn)動(dòng)增加和重復(fù)刻板行為等，其過(guò)度活躍的表型可能與紋狀體中mGluR1表達(dá)上調(diào)、樹(shù)突分支增加和長(zhǎng)時(shí)程抑制增強(qiáng)有關(guān)。LIU等[37]使用CRISPR/Cas9基因編輯方法構(gòu)建了第一個(gè)可遺傳的Shank3b突變斑馬魚模型，其表現(xiàn)出明顯的ASD樣行為和突觸蛋白homer1和突觸素水平改變。JAMES等[38]在斑馬魚Shank3基因突變模型中驗(yàn)證了腸道運(yùn)動(dòng)障礙是由該基因突變所致。

中科院深圳先進(jìn)院腦認(rèn)知與腦疾病研究所ZHOU等[39]報(bào)道了食蟹猴Shank3的種系可傳播突變非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型。該突變猴表現(xiàn)出明顯的睡眠障礙、運(yùn)動(dòng)缺陷、重復(fù)行為增加及社交和學(xué)習(xí)障礙等，比嚙齒類動(dòng)物模型更加接近ASD樣行為和神經(jīng)表型。

2.1.5 脆性X智力低下蛋白1

脆性X綜合征主要是由脆性X智力低下基因（fragile X mental retardation 1，F(xiàn)mr1）啟動(dòng)子中胞嘧啶-鳥(niǎo)嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤三核苷酸的擴(kuò)增引起，少數(shù)是由點(diǎn)突變引起。男童的臨床癥狀較女童更加嚴(yán)重，包括智力殘疾、言語(yǔ)遲緩、焦慮、注意力缺陷障礙、多動(dòng)、癲癇發(fā)作和身體畸形等。

COMERY等[40]描述了Fmr1敲除小鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元樹(shù)突棘較野生型小鼠更長(zhǎng)、細(xì)而曲折，且頂樹(shù)突的樹(shù)突棘密度更大。HE等[41]通過(guò)在體雙光子鈣成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)mr1突變小鼠的神經(jīng)元對(duì)重復(fù)胡須刺激的適應(yīng)性明顯不足，提示皮質(zhì)感覺(jué)回路中適應(yīng)性受損可能是ASD觸覺(jué)防御的潛在原因之一。SAXENA等[42]通過(guò)穿管實(shí)驗(yàn)研究了Fmr1敲除大鼠社會(huì)支配地位和社會(huì)等級(jí)的變化，為理解Fmr1敲除大鼠群體之間復(fù)雜的社交動(dòng)態(tài)提供了新見(jiàn)解。

2.1.6 結(jié)節(jié)性硬化復(fù)合物蛋白1/2

Tsc是一種常染色體顯性遺傳的疾病，其特征是在多個(gè)器官（包括腦和腎）中產(chǎn)生塊莖樣良性腫瘤，甚至發(fā)展成惡性腫瘤。NORMAND等[43]研究結(jié)果表明，在胚胎后期被缺失丘腦Tsc1，能導(dǎo)致成年小鼠癲癇發(fā)作和強(qiáng)迫性梳理等ASD樣行為。REITH等[44]描述了與浦肯野細(xì)胞相關(guān)的Tsc2缺失小鼠模型，該小鼠浦肯野神經(jīng)元損傷并表現(xiàn)出社交障礙、重復(fù)行為和有限的興趣。由于浦肯野細(xì)胞缺失是ASD患者中最常見(jiàn)的解剖異常之一，該模型可為相關(guān)病理生理學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)支撐。

2.1.7 其他基因

有研究提示，多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（dopamine transporter，DAT）突變可能也和ASD的發(fā)生密切相關(guān)。自然界中存在一種DAT T365M的突變，即DAT肽鏈的第365位蘇氨酸突變?yōu)榈鞍彼?，在果蠅中，該突變被證實(shí)可產(chǎn)生包括運(yùn)動(dòng)過(guò)度、恐懼、重復(fù)動(dòng)作和社交互動(dòng)改變等與ASD類似的行為障礙[45]。DICARLO等[46]將該突變引入小鼠中，發(fā)現(xiàn)攜帶DAT T356M基因突變的小鼠表現(xiàn)出社交活動(dòng)減少、社會(huì)支配地位喪失以及埋珠行為減少等行為障礙。

2.2 化學(xué)因素誘發(fā)

經(jīng)過(guò)數(shù)十年的研究，大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，多種化學(xué)因素所致的腦功能發(fā)育障礙可能與ASD關(guān)系密切，進(jìn)而提出了多種發(fā)病機(jī)制假說(shuō)。常見(jiàn)的由化學(xué)因素誘發(fā)的動(dòng)物模型主要有丙戊酸（valproic acid，VPA）誘發(fā)模型、沙利度胺（thalidomide）模型和米索前列醇（misoprostol）模型等。

2.2.1 丙戊酸誘發(fā)模型

VPA是一種常用的抗癲癇藥物，也用于治療雙相情感障礙和神經(jīng)性疼痛。臨床研究表明，孕期服用VPA會(huì)增加神經(jīng)管缺陷發(fā)生率、發(fā)育遲緩和認(rèn)知障礙，并可誘發(fā)ASD。研究表明，產(chǎn)前暴露于VPA誘導(dǎo)的胚胎小鼠，其大腦中H3和H4組蛋白短暫高乙?；赡芘c產(chǎn)后ASD樣行為障礙相關(guān)[49]。此外，在大腦發(fā)育階段接觸VPA也可導(dǎo)致ASD樣行為，其機(jī)制可能是通過(guò)抑制糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK3β）從而促進(jìn)Wnt信號(hào)影響神經(jīng)元發(fā)育過(guò)程中的軸突重塑[50]。還有研究發(fā)現(xiàn)，VPA可通過(guò)β-catenin-大鼠肉瘤病毒原癌基因蛋白（rat sarcoma viral oncoyene homolog，Ras）-細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶p21（extracellular signal-regulated kinase-p21，ERK-p21）通路影響神經(jīng)祖細(xì)胞分化和增殖[51]。還可抑制參與GABA降解的GABA轉(zhuǎn)氨酶，并增強(qiáng)GABA合成酶谷氨酸脫羧酶活性，因此，VPA暴露可能導(dǎo)致GABA水平的顯著升高[52]?？傊?，胚胎發(fā)育早期暴露于VPA環(huán)境可能會(huì)影響大腦發(fā)育過(guò)程中神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的成熟，進(jìn)而導(dǎo)致ASD樣行為表型。

LIU等[53]發(fā)現(xiàn)，VPA誘導(dǎo)的ASD大鼠模型表現(xiàn)出ASD患者相似的腸道菌群失調(diào)。YASUE等[54]研究發(fā)現(xiàn)，VPA暴露可誘發(fā)狨猴缺乏社會(huì)動(dòng)機(jī)并降低對(duì)其同類的興趣，還發(fā)現(xiàn)該狨猴不會(huì)表現(xiàn)出對(duì)不公平待遇的厭惡。

2.2.2 沙利度胺模型

沙利度胺可引起多種先天性缺陷，如出生時(shí)缺失拇指、四肢發(fā)育不全、眼和耳缺陷及患有先天性心臟病等。TSUGIYAMA等[55]通過(guò)將孕大鼠產(chǎn)前第9和10天暴露于沙利度胺制備子代ASD大鼠模型。將該模型大鼠暴露于16 kHz純音環(huán)境下進(jìn)行聽(tīng)覺(jué)刺激，發(fā)現(xiàn)其具有聽(tīng)覺(jué)過(guò)敏表型。NARITA等[56]檢測(cè)了暴露于沙利度胺的大鼠行為學(xué)表型，僅發(fā)現(xiàn)其學(xué)習(xí)能力受損，未發(fā)現(xiàn)其他典型的ASD樣行為表型。

2.2.3 米索前列醇模型

米索前列醇是一種前列腺素類似物，通常用于防治胃潰瘍。有證據(jù)表明，產(chǎn)前暴露于高劑量（40 μg·kg-1）米索前列醇可導(dǎo)致默比烏斯綜合征、顱神經(jīng)核受損而導(dǎo)致單側(cè)或雙側(cè)面神經(jīng)麻痹、肌肉或骨骼肌畸形以及ASD樣行為癥狀。KOENIG等[57]研究發(fā)現(xiàn)，孕期暴露于米索前列醇40 μg·kg-1的小鼠，其子代呈現(xiàn)出明顯的異常行為，但并未發(fā)現(xiàn)顯著的ASD樣行為和神經(jīng)功能障礙。由于目前尚無(wú)令人信服的證據(jù)表明孕期暴露米索前列醇是神經(jīng)發(fā)育障礙（包括ASD）的一個(gè)危險(xiǎn)因素，因此，未來(lái)仍需進(jìn)一步深入開(kāi)展相關(guān)研究。

2.3 生物因素誘導(dǎo)

2.3.1 腸道菌群（gut microbiota，GM）模型

研究表明，GM的變化可調(diào)節(jié)胃腸生理、免疫功能甚至行為，GM中的特定細(xì)菌與ASD相關(guān)表型之間也可能存在一定相關(guān)性[58]。CORETTI等[59]研究了具有ASD相關(guān)表型的特發(fā)性BTBR T+tf/J近交系小鼠的GM變化，發(fā)現(xiàn)其GM顯著異常、腸道通透性增加以及免疫失調(diào)。SHARON等[60]將來(lái)自ASD患者和正常人的GM移植到無(wú)菌小鼠腸道中，證實(shí)源自ASD患者的GM足以誘導(dǎo)明顯的ASD樣行為。目前研究認(rèn)為，GM可通過(guò)調(diào)節(jié)神經(jīng)活性代謝產(chǎn)物影響小鼠行為，表明腸-腦軸可能與ASD的發(fā)病和病理生理學(xué)進(jìn)程密切相關(guān)。

2.3.2 丙酸（propionic acid，PPA）模型

PPA為一種短鏈脂肪酸，是腸道細(xì)菌代謝終產(chǎn)物，也是一種常見(jiàn)食品防腐劑。許多研究表明，PPA可引起大鼠ASD樣行為和神經(jīng)炎癥反應(yīng)。MACFABE等[61]發(fā)現(xiàn)，PPA處理的大鼠表現(xiàn)出對(duì)特定物體興趣減少和社交行為減弱的特征，免疫組織化學(xué)分析顯示，其腦組織反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞增生和小膠質(zhì)細(xì)胞活化，表明其具有先天性神經(jīng)炎癥反應(yīng)。

LOBZHANIDZE等[62]探討PPA對(duì)大鼠社交行為、焦慮行為和杏仁核中央核超微結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果表明，急性給予相對(duì)較低劑量的PPA（175 mg·kg-1）即可導(dǎo)致大鼠社交行為顯著減少。上述研究結(jié)果為利用PPA建立嚙齒類ASD動(dòng)物模型提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但這種模型與人類ASD之間的相關(guān)性仍有待進(jìn)一步深入驗(yàn)證。

2.3.3 博爾納病病毒（Borna disease virus，BDV）模型

BDV是一種高度嗜神經(jīng)性、非節(jié)段性、單股負(fù)鏈的RNA病毒。感染BDV的新生鼠表現(xiàn)為海馬和小腦發(fā)育異常和學(xué)習(xí)的障礙，這與一些ASD患兒的行為障礙表現(xiàn)較為一致。PLETNIKOV等[63]利用BDV感染幼年大鼠建立了一種全新的ASD動(dòng)物模型，該動(dòng)物模型表現(xiàn)出感覺(jué)、運(yùn)動(dòng)、社交、情緒和認(rèn)知等多種行為障礙。BDV作為一個(gè)獨(dú)特的致畸因子，可望用于研究遺傳與環(huán)境相互作用的病理生理學(xué)機(jī)制，也有助于開(kāi)展臨床前藥物治療測(cè)試。

3 展望

本文主要針對(duì)目前實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的孤獨(dú)癥譜系障礙實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法進(jìn)行了系統(tǒng)梳理和總結(jié)，相關(guān)研究可望為深入理解ASD的病因、發(fā)病機(jī)制和診療提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)支撐。需指出，由于不同ASD患者在遺傳和表型方面存在較大差異，因此，很難明確哪種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型或哪種構(gòu)建方法是模擬ASD發(fā)生的最佳模型，不同模型之間只有相互借鑒、優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)才能最大限度地發(fā)揮其研究?jī)r(jià)值。

隨著發(fā)育神經(jīng)生物學(xué)、系統(tǒng)生物學(xué)、連接組學(xué)、新型多光子在體成像技術(shù)、單細(xì)胞技術(shù)和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等學(xué)科和技術(shù)的不斷完善和突破，未來(lái)神經(jīng)科學(xué)家們可借助新工具和新方法產(chǎn)生的新信息和線索，用于指導(dǎo)新型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的制備和研究，必將進(jìn)一步深化對(duì)ASD致病機(jī)制的理解，為開(kāi)發(fā)新型ASD診療手段提供重要支撐。